细菌实验室检查项目
第一篇：细菌实验室检查项目
细菌室常规检测项目：
一形态学检查（Morphological Examination）
（一）各种染
1革兰染（Gram stain）：将细菌分为革兰阳性菌如葡萄球菌属，链球菌属等；革兰阴性菌如大肠埃希菌沙门菌，志贺菌等。
2抗酸染(Acid-fast stain)：通过染将细菌分为两大类：抗酸性细菌和非抗酸性细菌，抗酸性细菌种类较少，如结核分枝杆菌，麻风分枝杆菌等。正常：未见。抗酸染，到红分枝杆菌，及报告“见抗酸分枝杆菌”，量可以用加号表示：
++++每个视野>10根
+++每个视野发现1～10根
++100个视野发现10～99根
+300个视野发现3～9根
±300个视野发现1～2根
3异染颗粒染（Metachromatic granula stain）：用于检查棒状杆菌。
4墨汁染（Indian ink negative staining）：用背景着，而细菌本身不着的染方法，用于脑脊液中查新生隐球菌。正常：未见。
5鞭毛染（Flagella stain）：鞭毛的数目和位置随细菌种类而不同，可分为周毛菌、单毛菌、双毛菌和丛毛菌，是细菌分类和鉴定的重要依据。如弧菌是单鞭毛菌。
6荚膜染（Capsules stain）：荚膜是细菌壁外一层粘液性多聚物，赋予致病菌的侵袭力。染将荚膜染成与菌体不同颜，可作为细菌鉴定的依据。如肺炎链球菌。
（二）涂片检测(smear)
1便球杆比检查(stool cocus/bacillus)：即革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌之比。
正常值：便球杆比：1:3
临床意义：健康人肠道内寄居着大量厌氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂养的婴儿肠道内以革兰阳性球菌为主外，其余人均以革兰阴性杆菌占绝对优势。在肠道发生致病菌如沙门、志贺、弧菌感染时往往由于使用抗生素而是革兰阴性杆菌受到抑制，此时球菌/杆菌比值有可能变大。若比值显著增大，常提示肠道菌紊乱或发生二重感染。
2标本真菌涂片（fungi）：经革兰染如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝，可初步报告为：到真菌孢子和菌丝。
正常值：未见真菌。
3痰涂片检查（sputum smear）：
临床意义：目的确定标本是否适合做细菌培养，初步判定是否有致病菌存在。首先应确定标本是否为来自下呼吸道的痰，其标准为革兰染WBC>25/LPF(低倍视野),上皮细胞<10/LPF。有些细菌可做初步判断：
1)肺炎链球菌：革兰染为阳性球菌，成双或短链状排列
2)结核分枝杆菌：抗酸染，到红分枝杆菌，及报告“见抗酸分枝杆菌”，量可以用加号表示：++++每个视野>10根
+++每个视野发现1～10根
++100个视野发现10～99根
+300个视野发现3～9根
±300个视野发现1～2根
3)真菌：经革兰染如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝，可初步报告为：到真菌孢子和菌丝。
4)放线菌及奴卡菌：革兰染后，插件中央部分菌丝为革兰阳性，而四周放射的末梢菌丝为革兰阴性，切部分菌株有抗酸性。可报告：见疑似放线菌或奴卡菌。
4淋球菌涂片检查（Neisseria gonorrhoeae）
临床意义：标本：男性以灭菌盐水清洗尿道口，取尿道脓性分泌物涂片；女性尿道炎患者清洗尿道口后从阴道后壁从后向前方压迫尿道使分泌物排出，涂片。子宫颈炎患者先用灭菌盐水清洗宫颈口和阴道壁，再用阴道窥镜压迫子宫阴道部使分泌物排出。涂片革兰染后镜检，中性粒细胞内有革兰氏阴性双球菌具有诊断价值。报告结果：“中性粒细胞内（或/和）外见到革兰阴性双球菌”。正常：未见。
二细菌分离培养（Isolation and Culture of bacteria）
1血培养(blood culture)：临床意义：正常人体的血液是无菌的,当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时,血液中可出现细菌,依据程度不同称为菌血症或败血症.菌血症往往需要以多次血培养证实,如表皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是较常见的污染菌.正常：无菌生长。最终阴性报告时间为7天。亚急性心内膜炎患者标本如5～6天无菌生长，应继续培养至2周方可报告阴性结果。布鲁氏菌培养第3周做出最终阴性报告。厌氧菌培养应在第2周做出最终阴性报告。真菌血症应在第3周做出最终阴性报告。结核血培养应在第6周做出最终阴性报告。
bacterium2尿液培养（urine culture）：临床意义：正常人体膀胱中的尿液是无菌的，用膀胱穿刺取
出的尿液应是无菌的。当尿液经尿道排出体外，受到尿道中细菌的污染而混有细菌。取经尿道排出的中断尿，细菌数不会超过10ml，因而，以此界限作为诊断泌尿道系感染的依据。
尿液培养反映肾脏、尿道、前列腺等的炎症变化，帮助临床选择有效抗菌药物。正常48小时仍无菌生长可做最终阴性报告。24小时如有细菌生长即做细菌鉴定及药敏。
3痰培养：（sputum culture）：临床意义：痰中的病原菌不少属于机会致病菌，与正常菌同在，在报告时应做说明。对于机会致病菌，一般仅当其数量超过正常菌时才可报告鉴定结果及药敏试验结果。
检出致病菌时，除报告该菌的鉴定名称外，还需同时报告正常菌情况。通常以报告甲型链球菌和奈瑟氏菌作为正常菌存在的指标。
如：甲型链球菌+
奈瑟氏菌+
肺炎克雷伯氏菌2+
此报告表明肺炎克雷伯氏菌在数量上多于正常菌，诊断为病原菌。未检出致病菌时，应报告“正常菌”。
4咽拭子培养（pharynx swab culture）：临床意义：鼻、咽部的细菌感染病原菌源于口腔，口腔中既有需氧菌，也有厌氧菌。同痰培养一样，病原菌不少属于机会致病菌，与正常菌同在，要正确区分。未检出致病菌时，应报告“正常菌”。
5穿刺液标本（包括胸腹水、关节液、心包液）的培养（Serous Cavity Effusion culture）：临床意义:正常的穿刺液是无菌的，有感染的情况下，只要检出细菌，通常都可视为是病原菌。正常：无菌生长。6粪便培养（stool culture）：临床意义：一方面从肠道大量细菌中出致病菌，对肠道疾病进行病原学诊断并通过药敏试验为临床提供合适的用药；另一方面可对肠道菌进行监测，在疾病中预防菌紊乱。正常：未检出致病菌。
7脑脊液培养(CSF culture)：临床意义：正常人体脑脊液是无菌的。
当人体患有脑脊髓膜炎时,在脑脊髓液中可以出现病原菌。常见的病原菌有细菌、真菌和结核菌等。正常：无菌生长。
8化脓及创伤感染标本的培养（Purulent Secretion Culture）: 临床意义
组织或器官的化脓性感染,其病原菌的来源可以分为两类
内源性:感染源是炎症局部周围的器官中的正常菌(常在菌),由于损伤等因素造成常在菌进入无菌4-
5状态的组织内,发生感染.外源性:感染源是存在于人体外部自然界的微生物,由于外伤和直接接触,外界微生物通过人体表面进入人体,造成感染.常见细菌有金黄葡萄球菌、链球菌、消化链球菌；阳性杆菌有芽孢杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、溃疡棒状杆菌；阴性杆菌有肠杆菌、嗜血杆菌、产碱杆菌、假单胞菌、无杆菌、拟杆菌、弧菌、气单胞菌；其他有放线菌、奴卡氏菌、念珠菌、结核分枝杆菌。
三手工试验
1触酶试验(catalase test)：具有触酶（过氧化氢酶）的细菌，能催化过氧化氢，放出新生态氧，继而生成分子氧出现气泡。
2凝固酶试验（coagulase test）：金黄葡萄球菌产生的结合凝固酶，结合在细胞壁上，使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白附着于细菌表面，发生凝集反应。CAMP试验：B链球菌具有“CAMP”因子，能促进葡萄球菌β溶血素的活性，使两种细菌在划线处呈现箭头形透明溶血区。Optochin敏感试验：Optochin（ethylhydrocupreine，乙基氢化去甲奎宁的商品名）可干扰肺炎链球菌叶酸的生物合成，抑制该菌的生长，故肺炎链球菌对其敏感，其他链球菌对其耐药。
5氧化酶试验(oxidase test): 该试纸条适用于G-杆菌的氧化酶实验。具有氧化酶的细菌，首先使细胞素C氧化，再由氧化型细胞素C使盐酸对二甲氨基苯胺氧化，并与α萘酚结合，生成靛酚蓝而成蓝。用于初步判断奈瑟氏菌属及肠杆菌科的非发酵菌。
6超广谱β-内酰胺酶的测定（ESBLS检测）:有些大肠和肺克能产生超广谱β-内酰胺酶，他不仅能水解第一代和第二代头孢菌素，还能水解第三代头孢菌素类抗生素，如头孢他啶、头孢噻肟等和单酰胺酶，使其失去抗菌作用，但对碳青霉烯类无明显作用。MRSA和MRS检测：用30ug纸片的头孢西丁的药敏结果及新的折点能预测mecA介导的耐药。8 D－试验：大环内脂类耐药的葡萄球菌可以改变、诱导克林霉素耐药。由erm基因导致 23S rRNA
甲基化耐药，与大环内脂类, 林可霉素, 和 链霉素 B型有交叉，又叫 MLSB 耐药，或只耐大环内脂类(msrA 基因编码的泵出机制)

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