抗生素的贮液和工作液浓度
①以水为溶剂的抗生素贮存液应用
0.22 μm滤器过滤除菌;
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌;
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。
注意:
镁离子是四环素的拮抗剂。对于以四环素为筛选抗性的细菌,应使用不含镁离子的培养基,如LB培养基。
下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度
氨苄青霉素贮液浓度50 mg/ml溶于水-20℃保存工作浓度20 μg/ml(严紧型质粒)60 μg/ml(松弛型质粒)
羧苄青霉素贮液浓度50 mg/ml溶于水-20℃保存工作浓度20 μg/ml(严紧型质粒)60 μg/ml(松弛型质粒)
氯霉素贮液浓度34 mg/ml溶于乙醇-20℃保存工作浓度25 μg/ml(严紧型质粒)170 μg/ml(松弛型质粒)
卡那霉素贮液浓度10 mg/ml溶于水-20℃保存工作浓度10 μg/ml(严紧型质粒)50 μg/ml(松弛型质粒)
链霉素贮液浓度50 mg/ml溶于水-20℃保存工作浓度10 μg/ml(严紧型质粒)50 μg/ml(松弛型质粒)
四环素贮液浓度5 mg/ml溶于乙醇-20℃保存工作浓度10 μg/ml(严紧型质粒)50 μg/ml(松弛型质粒)construct用法
质粒类型:
DNA construct
Plasmids
pUC vectors
pBluescript? vectors
pGEM? vectors
pTZ vectorsOrigin of Replication Copy number Classification
pMB1*
ColE1
pMB1*
pMB1*500–700
300–500
300–400
>1000high copy
high copy
high copy
high copy
pBR322 and derivatives pMB1*
pACYC and derivativesp15A
pSC101 and derivatives pSC101
Cosmids
SuperCos
pWE15pMB1*
ColE115–20
10–12
~5
10-20
10-20low copy
low copy
very low copy
low copy
low copy
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