小米对高脂血症小鼠辅助降血脂功效研究
陈新宇1,柴亮听2,兰凤英1,张宗颖1,王健1
(1.河北北方学院,河北张家口075000;2.邯郸市第一医院,河北邯郸056000)
摘要:以SPF级昆明小鼠为研究对象,通过在维持饲料中添加不同比例的小米组分,研究小米对高脂血症血脂水平的辅助功效。用维持饲料做阳性对照,以总质量为基准,分别用40%% 60%和80%小米替代原维持饲料,辅助阿托伐他汀药物灌胃高血脂模型小鼠。同时以健康小鼠饲喂维持饲料结合生理盐水灌胃做空白对照,试验期28d。试验表明,阳性对照组小鼠TC水平在试验期第28d恢复正常状态。与空白对照组比较,40%小米试验组TC%甘油三脂(triglycer-ide,TG)%低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipytein-cholesteyl,LDL-C)水平在试验第7d已无显著性差6(5>0.05);60%小米试验组TC%HDL-C、LDL-C水平在试验第14d无显著性差异(5>
0.05);80%小米试验组TC%TG和LDL-C水平在第28d无显著性差6(5>0.05)。结果表明:当小
鼠维持饲料中小米比例为40%时,可使阿托伐他汀对高血脂小鼠的时间从28d缩短至7d。
关键词:小米;高脂血症;小鼠;阿托伐他汀
Study on the effect of millet on assist in lowering
blood lipin of hyperlipiSemia mict
CHEN Xin-yu1,CHAI Liang-ting2,LAN Feng-ying1,ZHANG Zong-ying1,WANG jian1
(1.Heeei North University,Zhangjiakou075000,Hebei,China;
2・Handan First Hospital,Handan056000,Heben China)
Abstraci:Taking SPF Kunming mice as the research object,millet components with di/eynt propor-ioon@weoeadded on maonienantefeed(MF)io@iudyihee f otatyofadkueaniioeaimeniofhypeoeopodemoa mote.MFwasused asposoioeetoniooe,and40%,60%and80%ofmo e iweoeused iooepeateMF, ioa s osiaiooeasiaion on peofoomonggaeageiheoapyioihehypeoeopodemoamodeemote.Aiihesameiome, h/khy mice were fed MF combined with no/nal salina gavega as a blank control-The expeNmental peN-od was28days.Theiesishowed ihaiiheTC eee?ofmoteon iheposoioeetonioo?gooup batk ionooma?
tondoioon on ihe28ih dayofiheiesipeoood.Compaoed woih beank toniooegooup,expeoomeniaegooup 40%millet TC and TG,LDL-C levels in test7days had no significant d/ferenco(5〉0.05);TC, HDL・C and LDL-C levels of60%millet group showed no significant d/ferenco on the14th day(5>
0.05).TC,TGand LDLCCeeeeeson80%mo e igeoup showed nosognofotanido f eeenteon day28(5〉
0-05):The results showed when the pypoNion of millet in the MF of mice was40%,the treatrnent time ofaioeeasiaion foehypeeeopodemoamotewasshoeiened feom28daysio7days.
Key words:millet;hyperlipidemia;mice;atorvestatin
中图分类号:TS210.1文献标志码:A文章编号:1008-9578(2021)05-0128-05
高血脂是指血浆中脂类物质超过正常水平的一类病症。总胆固醇!TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C"、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的高低是衡量血脂水平的4项重要指标。研究表明,食品中的膳食纤维[1-2]%不饱和脂肪酸⑶、黄酮[4-5]、多酚[6]等物质能够有效调节血脂水平。
小米作为我国传统饮食中的重要组分,具有较
收稿日期:2019-04-11
基金项目:河北省科技厅农业关键共性技术攻关专项(16227105D)
作者简介:陈新宇(1988—),男,硕士,研究方向为食品加工与安全。
通信作者:兰凤英(1965—),女,教授,硕士生导师,研究方向为营养保健食品开发。
高的研究价值。小米中含有大量的膳食纤维和不饱和脂肪酸,这2种物质均具有降血脂作用。研究表明,含10%小米糠膳食纤维的饲料[7]或干预剂量为0.5g/kg-bw的小米谷糠油[8]能够有效降低高血脂小鼠血脂指标。本试验通过在饲料中添加不同比例的小米,研究其对高血脂小鼠的辅助降血脂功效。
1材料与方法
1-1材料与试剂
1.1.1试验动物
体重在27~35y的SPF级雄性KM小鼠,辽宁长生生物技术股份有限公司
1.1.2饲料配方
维持饲料,北京科澳协力饲料有限公司;高脂模型饲料是在小鼠维持饲料中以维持饲料量为基准,添加20%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠配制而成;各不同小米比例的特殊组分饲料的配制,将小米按比例替换小鼠维持饲料。
1.1.3药晶及试剂
小米(冀张谷5号),蔚县喜福农产品商贸有限公司;甘油三酯(triglyce/de,TG)%总胆固醇(total-choleste/l,TC)%低密度脂蛋白胆固醇(Vw-densityfi-pop/teincholeste/l,LDL-P)%高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipop/teincholeste/f,HDL-P)试剂盒,江苏英诺华医疗技术有限公司;所有试剂均为分析纯;阿托伐他汀,广东百科制药有限公司。
1-2仪器与设备
DS-161V自动生化分析仪,江苏英诺华医疗技术有限公司&GA30笼独立送风隔离笼具,苏州市冯氏实验动物设备有限公司;Mbisar10k离心机,湖南
恒诺仪器设备有限公司;TD50001A型电子天平,天津天马衡基仪器有限公司;DK-98-#电热恒温水浴
锅,天津市泰斯特仪器有限公司;SYD-S3050切片机,浙江省金华市科迪仪器设备有限公司;HD-530全自动摊片烤片机,湖北慧达仪器有限公司)
2试验方法
2.1试验分组
取KM小鼠50只,随机分成5组,每组10只,即正常对照组、阳性对照组、40%小米试验组、60%/J、米
试验组、80%/J、米试验组。小鼠经适应性喂养7d,然后正常对照组饲喂维持饲料,其他组均饲喂高脂饲料建立高血脂模型。小鼠造模成功后,正常对照组和阳性对照组饲喂维持饲料,3种比例剂量小米试验组分别饲喂40%、60%、80%/J、米饲料。阳性对照组和3种比例剂量小米试验组每日按5mg/kg-d剂量灌胃阿托伐他汀,正常对照组同比例剂量灌胃生理盐水。各组小鼠连续饲喂28d,试验期间小鼠自由饮水和进食[9],每周称重记录各组小鼠体重,及时调整灌胃剂量。分别在试验期第
7、14、21、28d,对各组小鼠不禁食眼眶取血,室温静置30min后,以4000—m b离心10mb分离血清,
待测。试验第28d各组小鼠取血后,处死小鼠,解剖取出肝脏,取肝小叶部分组织制作病理切片。
2.2指标测定
血脂指标测定:血清分离后,按TC、TG、HDL超、LDL-P试剂盒说明书的方法测定血清中的TC、TG、
HDL乙、LDL超含量。
肝脏系数计算:小鼠取血前称重,并在小鼠解剖后称取肝脏重量。根据下式计算肝脏指数:肝脏指数=肝脏质量/小鼠体重p100%)
肝脏组织切片观察:取肝小叶部分组织经10%甲醛溶液固定后,用流水冲洗24h,经脱水、透明、浸蜡
后将组织包埋于蜡块中,切成5~8p m组织玻片,附贴于载玻片上,经HE染后封固进行组织病理状态观察'10(。
2.3数据处理
应用IBM SPSS Statistics22软件进行数据分析,均采用均数土标准差(L±)表示,组间比较采用单因素方差分析方法,P<0.05为差异有统计学意义。
3结果与分析
3-1小米对小鼠血脂TC水平的影响
总胆固醇包含了血液中各类脂蛋白的总和,高胆固醇水平的主要危害是易引起动脉粥样硬化和冠心病。在各国的血脂防治指南中,一■般将TC水平作为靶点。本试验研究了不同比例小米对高血脂小鼠血脂TC水平的影响。结果如表1所示:
40%、60%、80%/J、米试验组和阳性对照组小鼠血脂TC水平随时间变化总体呈现下降趋势。其中阳
性对照组在第28d恢复正常TC水平(P>0.05), 40%/J、米试验组在第7d恢复正常TC水平(P>
0.05),60%/J、米试验组在第14d恢复正常TC水平(P>0.05),80%/J、米试验组在第28d恢复正常
TC水平(P>0.05)。与维持饲料条件下小鼠TC水平28d恢复正常比较,40%和60%比例的小米有
效的缩短了阿托伐他汀的时间,其中40%比例
的小米作用更明显。这说明在阿托伐他汀条件下,40%和60%比例的小米能够对高血脂小鼠起到有效的辅助降TC水平的作用,40%比例小米的作用最佳。
3.2小米对小鼠血脂TG水平的影响
在临床上所测定的TG是指血液中各类脂蛋白中所含TG的总和。TG水平的异常可以通过影响LDL或HDL的结构,从而直接致动脉粥样硬化,其水平的升高也会导致冠心病和急性胰腺炎发生风险增加。本试验研究了不同小米对条件下高血脂小鼠TG水平的影响。结果如表2所示,40%小米试验组除第14d夕卜,小鼠TG水平均低于空白对照组,并且自21d起,其与空白对照组比较差异极显著(5<0.01);60%/J、米试验组小鼠TG水平在试验全过程中均低与空白对照组,且自第14d 起,差异极显著(5<0.01);80%/J、米试验组第28d TG水平极显著高于空白对照组,差异极显著(5< 0.01)。血液中TG水平受饮食条件和时间因素的影响较大,检测值可能有较大的差异。试验中并不能说明小米对小鼠血脂TG水平的影响和作用。
/(mmol/L)
表1小米对小鼠血脂TC水平的影响
组别第0d第7d第14d第21d第28d 空白159±0.10177±0.13 1.5±0.20 1.54±0.0( 1.58±0.14阳性对照组 2.73±0.13A 2.29±0.18' 2.0(±0.091-2±0.05'157±0.12 40%/]、米试验组 2.31±0.10'B191±0.12b173±0.10B 1.59±0.09 1.48±0.09 60%/]、米试验组 2.74±0.11' 2.10±0.10' 1.4(±0.04B1-0±0.14c 1.58±0.12 80%/]、米试验组 2.88±0.15A 2.78±0.13a 2.33±0.11AB191±0.11A161±0.10
注:“V”表示与空白对照组有显著差异(5<0.05);“A”表示与空白对照组相比差异极显著(5<0.01);“b”表示与阳性对照组有显著差异(5 <0.05);“B”表示与阳性对照组极显著性差异(5<0.01)。下同。
/(mmol/L)
表2小米对小鼠血脂TG水平的影响
别第0d第7d第14d第21d第28d 空白 1.16±0.09109±0.10 1.03±0.08 1.05±0.0( 1.04±0.06阳0.90±0.12c101±0.090.91±0.09'0-7±0.06'1-13±0.17c 40%/]、米试验组0.99±0.190.93±0.21104±0.11A0.90±0.11A0.94±0.11A 60%/]、米试验组0.9(±0.10107±0.120-4±0.05Ab0-0±0.10A100±0.14' 80%/]、米试验组0.99±0.1(0.99±0.1(1-10±0.09ab1-13±0-2117±0.09'
3.3小米对小鼠血脂HDL-C水平的影响
HDL能够将血管壁内胆固醇转运至肝脏进行分解代谢,其能通过抗感染、抗氧化和保护血管内皮功能发挥其抗动脉粥样硬化作用。一般情况下只能通过测定血液中HDL颗粒所含胆固醇的量来间接了解血液中HDL的含量。血液中HDL含有的胆固醇含量会影响总胆固醇的水平,但一般不作为的靶点。
表3是小米对小鼠血脂HDL-C水平的影响,40%、60%、80%/J、米试验组和阳性对照组HDL-C 水平在试验第1周内出现剧烈下降后,保持小幅度波动。在试验中前期(21d前),各比例小米组小鼠HDL-C水平均显著高于普通小鼠水平。其中阳性对照组、40%和60%/J、米试验组在第28d恢复正常水平。这说明40%和60%比例的小米对小鼠血脂HDL-C水平没有影响,但80%比例的小米影响了阿伐他汀HDLCC水的,延长了其药效的发挥)
3.4小米对小鼠血脂LDL-C水平的影响
LDL中胆固醇含量约占50%左右,一般通过测定血液中LDL-C的水平来反映血液LDL的总量。LDL-C升高是动脉粥样硬化发生的主要因素,因此采用LDL-C作为对冠心病及其他动脉粥样硬化性疾病的危险性评估因素。在各国血脂异常的管理指南中,均将LDL-C作为了干预的靶点。
试验研究了小米对小鼠血脂LDL-C水平的影响。结果如表4所示,40%、60%、80%比例小米试验组和阳
性对照组小鼠LDL-C水平在试验第7d 内恢复正常水平,且后续过程中没有再出现明显差异性。这表明小米对小鼠血脂LDL-C水平的恢复
没有明显影响。
3.5小米对小鼠肝脏组织病理状态的影响
够直观的展:脏组织的病变状态,研了各的HE染效果。5所:正常①小
叶结构清晰完整,列紧密且形态正常。阳②叶结构不清晰,肝变大且死,静近的I胞列絮乱,形态不完整,肿胀。与阳-照组比较,40%、60%和80%比例小米试验组对肝细的脂肪变性出现不同程度的改善,的肪空泡都有减少,40%力、米试验组③的肝细胞结构与正常①,列整齐,肝小叶结构完整。从状态分析,40%比米
的结构与正常状态,60%、80%比米和阳结构仍存在肝细胞列絮乱和结构不清晰的现象,说40%比例小米具有最佳的恢复效果。在, 40%比米的恢复短,其恢复正常血脂水平后,维持在各,有再,40%比米在正常水,肝脏的再生恢复可能是恢复的之一。
表3小米对小鼠血脂HDL-C水平的影响
/
(mmol/L)别第0d第7d第14d第21d第28d 空白对照组0.83±0.080.86±0.070.53±0.080.84±0.050.84±0.08阳性对照组 1.67±0.11' 1.01±0.150.97±0.07' 1.12±0.04'0.98±0.08 40%小米试验组 1.39±0.07'B 1.14±0.08'b0.98±0.08' 1.02±0.06'0.96±0.07 60%小米试验组 1.66±0.10' 1.20±0.08'0.88±0.04' 1.07±0.08'0.93±0.07 80%米 1.73±0.09 1.66±0.35c 1.23±0.07'b 1.15±0.08' 1.09±0.07'
表4小米对小鼠血脂LDL-C水平的影响
/(mmol/L)别第0d第7d第14d第21d第28d 空白0.32±0.040.77±0.050.71±0.110.63±0.050.75±0.07阳0.70±0.05'0.80±0.120.97±0.070.69±0.030.72±0.06 40%米0.60±0.00'b0.81±0.070.64±0.050.54±0.050.69±0.05 60%米0.71±0.03'0.88±0.060.51±0.030.73±0.090.71±0.06 80%米0.74±0.05'0.85±0.100.91±0.060.76±0.070.67±0.05
(a)正常对照组(b)阳性对照组
(c)40%小米试验组(d)60%小米试验组(e)80%小米试验组
图5小鼠肝脏组织HE染(400x)
4结论
在目前医疗水,高是W 的,过程中需食来有效控制水平的升高。该,力、米能够起到有效地辅助阿托伐他汀疗高的效果,高的恢复以大大缩短。在过程中,在饮食组分中添加适量比例的小米,能够有效缩短的周,减机体的副的。
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(下转第136页
)
2.2.4油茶花醇提物的总还原力
由图4可知:在0.01〜0.08mg/mL质量浓度范围内,油花醇提物的质量浓度的增大不断升高,这化活性也随之增加,但是
C和TBHQ的)不过从图中变化趋势可见,随质量浓度逐渐增至0-8mg/mL,油茶花醇提物的与C和TBHQ的还差距逐。
3结论
油茶花醇提物中含有多糖%黄酮、多酚%蛋白质等生物活性成分,量在油茶花醇提占比53%右,多量最为丰富。与素C和TBHQ对比,虽然油茶花醇提物对DPPH-和-OH的以及 不C和TB-HQ,但是亚铁离子的螯合却远它们。这说明在混入亚铁离子而产品品质劣变的食品和化妆品中,油花醇提为一种亚铁离子螯合有比较大的优势,从而为油茶花在护肤0>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>00>0( (131页)
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