影响新冠病毒核酸检测准确性的因素分析
摘要:核酸检测结果的准确性在极大程度上影响着后续工作展开。而要想确保检测结果的准确性,就必须做好从样本的采集到送至检测中心(实验室)检测的所有工作。基于此,本文在查阅相关参考资料的基础上,结合自身工作实际,对影响检测结果准确性的因素进行简单的分析。旨在通过本文的分析可以在一定程度上提升样本检测结果准确度。
关键词:新冠病毒;核酸检测;结果准确度;影响因素
新型冠状病毒,因其潜伏期较长,且离开人体后,在纸币、玻璃等表面也可存活近一个月,生命力顽强,故传染性极强,传播范围广,从2020年春季发展至今,早已遍布全世界,成为了世界人民共同关注的话题。遭受感染的人通常会出现较为明显的呼吸道症状,诸如咳嗽气喘、呼吸困难等症状,身体持续性发热,随着病情的不断发展,可伴发肺炎、严重急性呼吸综合征、多器官衰竭等疾病,致死率较高,即便是轻症患者治愈后也有可能再度感染发作,且易对患者身体造成不可逆转的损伤,严重影响着患者生活质量以及生命安全。
一、新型冠状病毒核酸检测作用原理
由于工作学习所需,人口流动在所难免,新型冠状病毒带来的影响迟迟未曾断绝,时至今日仍有部分地区零散人员感染的情况。新型冠状病毒主要以接触性传播为主,故新冠患者所经地区都需要进行相关的新冠病毒排查,以阻断新冠病毒持续传播。核酸检测便是目前用以诊断新型冠状病毒最为常用的一种方式。新型冠状病毒有其特异性,其仅含有核糖核酸(RNA),故易与其它病原体加以区分。核酸检测多以荧光定量PCR(聚合酶链式反应)仪检测新冠病毒特异序列循环数,以此判断新冠病毒核酸浓度。若能在患者样本中检测到新型冠状病毒特异核酸序列,且荧光定量PCR仪显示循环数越小,则核酸浓度越高,患者即可能感染新型冠状病毒。总之,这种检测方式是在对样本特定的核酸序列扩增的基础上,通过检测核酸数量的方式来进行检测结果确定目的。为了确保检测结果的准确性、提升工作效率,在重视和肯定核酸检测在诊断中的价值的同时,还要从更加客观、可靠的角度去考虑检测方式的合理性,以及标本采集、保存、运输以及核酸提取、扩增体系、人员操作等方面的准确性,只有做好各方面的工作,才可以使得从根本上保证核酸检测结果的准确性。
二、新冠病毒核酸检测准确性影响因素分析
1.标本采集运输过程规范化是否符合规范
通过查阅相关参考资料,以及结合自身工作实际发现,目前鼻咽拭子标本检测阳性高于口咽拭子,下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液标本阳性高于上呼吸道的口、鼻咽拭子采集的标本;但是值得注意的是,虽然下呼吸道的痰、肺泡灌洗液标本检测结果的准确度高,但是采集难度大,再加之在采集的过程中,该操作极易使得患者喷溅,因此一般情况在采集的过程中并不建议使用这种方法,除非对于气管切开、呼吸机抢救患者。因此在样本的采集过程中,为了提升检测结果的准确性,目前常见的样本采集方式是对患者进行多部位的标本采集,通过多部位的采集结果进行合并检测,通过这样更加合理和科学化的采集方式提升核酸检测结果的准确性。
此外,由于样本的采集、保存以及核酸提取等方式都在极大程度上依赖于操作者的操作专业度。因此要想提升核酸检测结果的准确性,在完成样本采集后,相关的工作人员还应该按照要求和规范对这些样本进行操作,使得这些待检测样本完好无损的送到检测中心,同时为了避免检测结果受到试剂、耗材等外源性或细胞破坏后所释放的内源性RNA酶降解的影响,一旦样本被送至实验室,就应该在最短的时间内进行检测,从而在一定程度上确保检测结果的准确度。
2.病毒存在量是否满足检测要求
目前,绝大多数新冠肺炎确诊患者的发病都是从感染、无症状、轻症确诊再到痊愈的过程,很少有患者会出现重症的现象。因此这就对检测过程中,病毒的存在量是否达线有了确定的要求。之所以这样认为,是因为不同患者由于其表现特点和身体素质本身的原因,以及样本采集过程中,病毒量获得的原因,会导致病毒检测结果出现失误,从而无法有针对性的对患者采取措施,最终造成病毒在环境中持续传染的目的。
为了提高核酸检测结果的准确性,在样本采集的过程中,这就要求我们护理人员加强自身的专业素养,通过专业化判断,对临床高度疑似患者进行连续多次的核酸样本采集和检测,最终获得准确的结果,在最大程度上提升核酸检测结果的准确性,尤其是在寒冷的冬季以及高发地区和病毒大面积流行期间。
3.样本检测环节是否满足标准化要求
核酸检测结果阳性参考值阴性在样本的检测环节,应该确保样本检测环节的标准化。只有做到了各个环节的规范化和标准化,才可以从根本上保证核酸检测结果的准确性。详细而言,在样本检测环节。目前常见的核酸提取方式是手工提取和核酸全自动提取仪提取两种方式。显然,第一种提取方式无法做到标准化,而第二种方式由于没有人为因素的干扰而容易实现操作的规范化和标准化,从而
在最大限度内减少了检测环节对检测结果准确性的影响,因此这种方法常用在检测环节的样本提取中;再加之这种方式可以获得对核酸扩容影响极大的病毒数量和质量,因此为了提升检测结果的准确性,核酸全自动提取仪提取法是一种极其值得推崇的方式;此外,样本检测试剂的质量对检测结果的准确性也极其重要,因此对于那些临床高度疑似病例,或检测结果难以确定的病例,建议至少用两种试剂进行检测、验证,以最终提升结果的准确性。
三、新型冠状病毒核酸检测结果
新型冠状病毒核酸检测结果通常会在12h内给出相应的检测报告,而对于发热门诊或是急诊患者,多数会在6h内即可给出检测报告。但检测结果也可能存在一定的错判情况,即假阳性(未被感染而核酸检测结果呈阳性)与假阴性(被感染而核酸检测结果呈阴性),检测结果与临床结果显示不符。假阳性多与实验室遭受核酸污染,或是实验室检测过程中样本之间出现交叉污染所致;而假阴性多是因采集时机以及采集部位影响(如疾病潜伏期或轻症期采集口咽部(不同部位病毒量会有所差异)样本,若人体内此时口咽部病毒量尚未达到可检验的程度(而实际已经感染),故难以检测),或是检测试剂敏感性不足,患者样本病毒未达到检测下限,再或者是相关检测人员个人专业素养不足,检测能力较差,加之采集不规范,样
本数据不典型,均有可能造成检测结果呈假阴性。故为提高检测结果准确性,多以复检形式尽量避免检测结果偶然性。对于初次核酸检验呈阳性的疑似病例,会重新采集患者样本并以不同厂家生产的两个试剂盒进行平行试验,或进行血清抗体检测。若二次核酸检测(或血清抗体检测)呈阴性,则延长医学观察期限,在此期间增加核酸检测(或抗体检测)频次,检测样本会在-20℃环境中留存7天,疑似患者无异常状况后进行高压灭菌消毒处理;而若二次核酸检测(或血清抗体检测)呈阳性,需将阳性样本或者备份重采样本送至疾控中心,并对患者做好相应的隔离防治工作。
总之,新冠病毒作为全球公共卫生事件,疫情的控制不仅需要全球人民共同努力,更需要相关的医务工作者做好本职工作、提升专业素养,通过不断的提升自己的能力以在最大限度内保证样本检测结果的准确性。只有做好了检测工作,才可以使得后续工作得以更好的展开。
参考文献:
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[3]秦芳.浅析新冠病毒核酸检测准确性的影响因素[J].时代教育,2020(21).

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