2020年第01
期猪瘟一直是对养殖场户最棘手的难题之一,而对精液带毒这种源头性危害的防范和控制还处在盲区位置。而此次检测开展,一是为了摸清大连市的精液带毒情况,二是结合实际到问题的关键点,三是唤醒养殖场户对精液检测的重视。
1材料与方法
本疫控中心到大连市有公猪的21家养殖厂,采精精液样本750份,其中15
倍稀释精液300份。
猪瘟病毒(HCV)核酸检测试剂盒(批号:20180919P ):北京世纪元亨动物防疫技术有限公司;核酸提取试剂盒(产品批号20180503):上海拜诺生物科技有限公司。
核酸提取仪(型号King Fisher Flex):美国Thermo,;高速冷冻离心机(型号3K-15):德国SIGMA;PCR 仪(型号Q5):美国Thermo
Fisher。1.4.1
将样品在-70℃与37℃间快速反复冻融3次,期间注
意离心管的密封,保持样品不外溢,以13000r/min 高速冷冻离心
3min 静置备用。1.4.2
按核酸提取试剂盒中说明书进行提取操作。配制试剂加入sample 板中,取1.4.1中上清液加入sample 板中,将板依序放入核酸提取仪,依程序提取核酸,取出第四板。1.4.3将第四块sample 板中提取的核酸按猪瘟病毒(HCV )核酸检测试剂盒中说明书进行PCR 检测。
1.4.4
确定实验阴阳性符合曲线和CT 值标定后记录实验结果数据。样本曲线显现正常标准,同时Ct 值大于等于38,为
阳性样本,样本无曲线或CT 值小于38,为阴性样本。2
结果与分析
750份精液样本的检测结果:450份精液原液中,阳性样本7份,阳性率为1.6%;在300份15倍稀释精液中,无阳性样本。(详见表1
)
对21家养殖厂的750份样品检测,结合流调结果分析,阳性公猪场4家,无明显地域特点,4个公猪场存栏和公猪数量,皆在此次所有养殖厂的中位数和平均数以下。品种皆为杜洛克,杜洛克占总体样本的47.7%。疫苗种类上细胞苗和脾淋苗都有分布无明显特点,免疫方式阳性场皆为春秋免疫,相较于阴性场免疫上还有欠缺,猪瘟作为强制免疫项目,在上次春防中的免疫合格率为91.8%,因此要改善原有的公猪猪瘟免疫程序。在精液流向上3家自用,1家有向周边出售情况。精液自用养殖厂占样本总数的77%。3
讨论与小结
核酸检测结果阳性参考值阴性在以往的养殖模式中,养殖户和疫控中心普遍把重心放在了养殖环节,如诊疗免疫、饲养环境、饲料优化等方面,而面对传染病的无力感,一直困扰各方,归因为异地调运的传染病原传播,但若从本区的精液质量上着手,建立起相应的精液商品化标准、精液监测标准,以小范围的精液监测和大范围的精液商品化买卖,来补充本地区的养殖量来源,将会有效降低外来动物调入,降低本地区的动物疫病风险。
大连地区公猪精液携带猪瘟病毒情况分析
王承功,胡永倩,苍真伟
(大连市现代农业生产发展服务中心,辽宁大连116037)
摘
要:猪瘟是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、发热、接触性传染传染病。具有高度传染性和致死性。对养殖业构成严重威胁,而精液传播是猪瘟的传播途径之一,容易被忽视,也未引起大连市养猪行业的重视,摸清大连地区公猪精液带毒现状,开展了精液采样和分子生物学检测,针对大连的21家公猪养殖企业的精液带毒情况进行了具体分析。
DOI:10援3969/J.ISSN援1671-6027援2020援01.109
表1750份样品检测结果
细胞灭活苗和以及细胞弱毒苗,还可以使用高免血清来预防猪流行性腹泻。
参考文献
[1]周宏专.猪流行性腹泻研究概况[J].动物医学进展,2018,(7):
102-107.
[2]张振国.猪流行性腹泻的流行现状及防控[J].兽医导刊,2019,(11):
22.
养猪
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