病毒核酸检测可疑或阳性结果处
置流程
1.目的
规范病毒核酸检测实验室对新冠核酸可疑或阳性结果复检及报告处置流程，确保检测结果的准确、及时。
2.适用范围
适用病毒核酸检测可疑或阳性结果的复测或复核处置。
3.职责
3.1检测人员：熟悉本实验室开展的病毒检测项目的样本采集、保存、运输、检测、结果报告、上送等技术要求，并按操作规程做好样本的接收、登记、处理、检测、保存和运送工作。
3.2复核人员：负责检测结果的分析、核实，加强检测过程中的质量监督、监控。
3.3实验室负责人：加强实验室检测质量控制
3.1检测人员：熟悉本实验室开展的病毒检测项目的样本采集、保存、运输、检测、结果报告、上送等技术要求，并按操作规程做好样本的接收、登记、处理、检测、保存和运送工作。
3.2复核人员：负责检测结果的分析、核实，加强检测过程中的质量监督、监控。核酸检测结果一直没出来怎么回事
3.3签发人员或实验室负责人：加强实验室检测质量控制和生
物安全管理，确保实验室检测人员按照规范进行工作，组织开展结果分析和样本复采、复检、上送，及时报告结果。
4.操作程序
4.1处置流程启动条件
当实验室检测人员在检测过程中发现有样本新冠病毒核酸orflab/N双靶标基因强阳性、弱阳性、灰区或单靶基因阳性，立即启动该处置流程。
4.2处置步骤
4.2.1首先应立即分析本次实验结果成立与否当以下条件均符合时，本次实验室结果成立
①试剂盒本身的阴性对照和阳性对照扩增结果图与Ct值均应符合试剂盒说明书的要求;
②批次同步检测的弱阳性质控有典型S扩增并且Ct值在控，阴性质控对照无扩增;
③样本的人源内参靶标有正常扩增(如样本新冠双靶基因强阳性扩增，部分试剂盒的人源内参可能存在弱扩增或无扩增的现象)。
当以上对照或质控异常时，本次实验结果不可信。
4.2.2正确判读Ct值
应根据扩增曲线与读数Ct值相结合进行判读，扩增曲线应为明显S型曲线，当扩增曲线起峰的位点的Ct值与仪器生成读数的Ct值基本一致时，可按照该Ct值读取结果当扩增曲线起
峰的位点的Ct值与仪器生成读数的CT值偏差较大时，需将该靶标基线位置整至至阴性对照之上或持平，在扩增曲线刚起峰的拐点位置读取Ct值。
4.2.3排查是否污染
当发现样本的新冠病毒核酸检测结果阳性或疑似阳性时，首先要分析排查是否污染，考量样本人来源
、标本类型、扩增曲线、Ct值，加样和加模板过程中与阳性对照的相对位置，当批次、当天或近期有没操作强阳性样本或强阳对照情况，扩增过程中及实验结束后有没发生PCR反应产物管裂开、爆管溢岀等因素，经实验室经验丰富的检测人员或主管或负责人综合分析判断。无污染：当样本新冠orflab/N双靶基因结果呈典型的S型扩增曲线,Ct值低于阳性对照(扩增曲线在阳性对照之前)时，如近期无操作过强阳性标本或对照、无PCR反应产物溢出等异常情况，且样本加样及加模板位置均离阳性对照较远，操作过程符合规范要求，交叉污染的可能性较低，同时如标本来源于高风险人或密接者，标本为鼻咽拭子，此类阳性结果发生污染的几率很小，基本可排除污染的可能性。可能污染：当样本新冠ORFlab/N双靶基因结果呈弱阳性扩增曲线或单靶基因阳性或处于灰区,Ct值等于或大于阳性对照(扩增曲线在阳性对照之后)，且样本加样及加模板位置均离阳性对照较近，加上检测人员熟练程度不高，操作不够规范，存在交叉污染的可能，如近期实验室人员曾操作过强阳性标本或对照、
PCR反应管产物溢出等异常情况，存在环节气溶胶污染的可能，而标本来源于低风险人，此类样本的阳性结果发生污染的可能性较高
4.2.4样本复采
对于可疑阳性或阳性结果，均需高度重视，立即由经验丰富、技术熟练的采样人员重新采集符合要求的样本，旋紧管盖，三层包装好，用生物安全转运箱立即送回实验室
①需同时采集鼻咽拭子、咽拭子样本式各两份，并送阳春市疾控中心及阳春市妇幼保健院平行检测，用于核酸复查工作;
②必须首要采集鼻咽拭子，使用专用的、细软杄的植绒拭子，确保拭子到达鼻咽部位，旋转拭子并停留一定的时间，把拭子放入病毒保存管，在拭子折点处折断，弃去尾部，手接触部位避免污染，旋紧管盖。
③采集咽拭子时，可分别用两根拭子擦拭咽后壁、两腭弓及扁桃体，来回涂抹次数及停留的时间可适当增加，把拭子放入病毒保存管，在拭子折点处折断，弃去尾部，手接触部位避免污染，旋紧管盖。
4.2.4样本复测和报告
对于可疑或阳性结果的标本，实验室需安排技术和意识过硬的检测人员重新提取原样和新样本的核酸，用2种以上质量可靠的核酸检测试剂进行复测，灵敏度小于500拷贝/ML新冠荧光PCR检测试剂，通过人员比对、试剂比对、仪器比对等形
式加强质量控制。检测前处理时，检测人员需对严格核对复采样本信息，做好三级防护、在二级生物安全柜中充分振荡病毒保存管，再双人在生物安全柜中开盖、取样、加样，规范和小心操作，尽最大可能避免样本交叉污染。扩增检测时，至少使用双试剂、平行样测试当重新采集的样本和原样复测结果依然
新冠双靶标基因阳性、弱阳性、灰区、或单靶基因阳性，经实验室项目负责人或主管或实验室科主任分析审核无误后，向单位相关科室报告。并立即把原样本、重新采集的(鼻咽、口咽、）
4.2.5样本上送市CDC
各医疗卫生机构应立即通过院感或医务科与阳春市CDC联系、报告个案情况，并立即把重新采集的(鼻咽、口咽)标本和原样本上送阳春市CDC实验室每份样本需用独立包装袋封装，按A类感染物质三层包装安全运输。
5病毒实验室检测结果的判断依据
5.1根据《病毒肺炎防控方案(第七版)》之附件6实验室检测技术指南，实验室确认阳性病例需满足以下两个条件中的一个
(1)同一份标本中病毒2个靶标(0RF1ab、N)实时荧光RT-PCR 检测结果均为阳性。如果出现单个靶标阳性的检测结果，则需要重新采样，重新检测。如果仍然为单靶标阳性，判定为阳性。
(2)两种标本实时荧光RT-PCR同时出现单靶标阳性，或同种类

版权声明：本站内容均来自互联网，仅供演示用，请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系QQ:729038198，我们将在24小时内删除。