病毒核酸检测流程
病毒核酸实验室检测步骤
具体操作如下：
1. 病毒采样：取病⼈唾液或者⿐咽拭⼦于病毒采样管保存
2.  核酸提取：提取病⼈唾液或者⿐咽拭⼦样本⾥的遗传物质，如果病⼈携带病毒，则样本⾥就会有该病毒的遗传物质RNA，使⽤硅胶柱离⼼、磁性硅胶颗粒分离⽅法以及⾃动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防⽌RNA降解。DNA应置于-20℃保
存，RNA和需长期保存的DNA应置于-70℃或液氮保存。
3.逆转录合成cDNA：进⾏提取液中RNA的逆转录，把RNA逆转录成cDNA
  逆转录cDNA合成反应需使⽤逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量⽆RNA/DNA酶的超纯⽔以及RNA模板。在扩增仪或⽔浴箱中，在规定的温度和时间下进⾏逆转录反应。建议使⽤商品化RT-PCR⼀步法试剂进⾏第⼀轮扩增反应。逆转录cDNA合成反应需使⽤逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量⽆
RNA/DNA酶的超纯⽔以及RNA模板。在扩增仪或⽔浴箱中，在规定的温度和时间下进⾏逆转录反应。使⽤商品化RT-PCR⼀步法试剂进⾏第⼀轮扩增反应。
3. PCR扩增反应（使⽤⼆次扩增的套式PCR扩增⽅法）:⽤病毒cDNA的特异性引物进⾏PCR扩增
PCR反应需使⽤引物、dNTPs、DNA聚合酶（如Taq酶等）、缓冲液、和适量⽆RNA/DNA 酶超纯⽔、以及模板（DNA或cDNA）。在扩增仪中，按照设定的程序进⾏扩增。使⽤⼆次扩增的套式PCR扩增⽅法。
核酸检测结果多久出5. 结果分析判定：
若有扩增出病毒的DNA条带，则判定病⼈体内有该病毒
若没有扩增出DNA条带，则判定病所取样本⽆该病毒
实验注意事项：
①　每⼀次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的⽚段、阴性对照没有扩增出任何⽚段、双份平⾏样品结果⼀致的情况下实验才成⽴，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。
②　核酸检测阳性：发现核酸阳性反应，应该重复采集样品进⾏复测，复测结果呈核酸阳性反应则判定为核酸阳性，复测结果为核酸阴性反应则判为不确定结果，需进⼀步随访检测。
③　核酸检测阴性：只可报告本次实验结果阴性。

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