育龄妇女钙吸收与维生素D受体基因多态性
大鼠肝线体SOD 、GPS 2Px 活性(P <0105),更高剂量的V E ,抗氧化能力未见显著提高。相反V E2、V E3组肝线粒体SOD 、GSH 2Px 活性都较V E1组显著下降(P <0105),MDA 水平显著上升(P <0105),见表2。
表1 大鼠肝线粒体N a +
2K +
2ATP 酶、C a 2+
2Mg 2+
2ATP
酶活性(珔x ±s ,n =10)
分 组Na +2K +2ATP 酶(U )
Ca 2+2Mg 2+2ATP 酶(U )
对照组
1118±01281115±0126V E1组1149±0130a 1137±0130a V E2组1120±0127b 1113±0115b V E3组
1126±0129b
1109±0120b
注:与对照组比较,a P <0105;与V E1组比较,b P <0105
表2 大鼠肝线粒体SOD 、G SH 2Px 活性及MDA 含量
(珔x ±s ,n =10)
分 组SOD [U/(mg ?prot )]GSH 2Px [U/(mg ?prot )]
MDA [nmol/(mg ?prot )]
对照组
35.67±6.2726.93±5.70 4.40±1.19VE1组42.58±6.45
a
33.73±8.79
a
3.33±1.06a VE2组36.93±5.31b 26.98±6.11b
4.39±1.31b VE3组
35.80±5.41b
27.09±8.08b
4.60±0.99b
注:与对照组比较,a P <0.05;与V E1组比较,b P <0.05
基因多态性
3 讨 论
V E 是线粒体非常重要的保护因素。本研究结果显示,
适量补充V E 可显著提高肝线粒体A TP 酶活性,但高剂量补充的V E 未见显著提高肝线粒体A TP 酶活性,可能与大剂量
V E 的原氧化剂性质〔4〕
有关。A TP 酶是细胞膜的标志酶,必
然也会受到自由基的攻击。SOD 、GSH 2Px 是体内2种十分重要的抗氧化酶,是机体抗氧化防御系统的重要成员。本研究结果显示,适量补充V E 可增加肝线粒体SOD 、GSH 2Px 活性,降低线粒体MDA 含量,以有效地消除或抑制自由基的破坏作用,提高A TP 酶活性。但当V E 浓度增高至需要量的27倍(V E2组)、100倍(V E3组)时,SOD 、GSH 2Px 活性及MDA 含量与对照组相比未见进一步改善。提示适量补充维生素至关重要。
参考文献
〔1〕 葛可佑.中国营养科学全书[M ].北京:人民卫生出版社,2004:
188-198.〔2〕 徐静,郭长江.维生素E 在线粒体中的含量、分布及其作用[J ].
国外医学卫生学分册,2004,31(2):92-95.〔3〕 Vaghy PL ,Johnson JD ,Matlib MA ,et al.Selective inhibition of
Na 2+induced Ca 2+release from heart mitochondria by diltiazem and certain other Ca 2+antagonisr drugs[J ].J Biol Chem ,1982,257(11):6000-6002.〔4〕 Blasiak J ,G loc E ,Wozniak K ,et al.G entoxicity of idarubicin and its
modulation by vitamins C and E and amifostime[J ].Chem Biol In 2teract ,2002,140(1):1-18.
收稿日期:2005212226(文涛编辑 赵淑艳校对)
3基金项目:国家自然科学基金(39930150);达能营养与宣传教育基金(2001)
作者单位:中国疾病预防控制中心营养食品所微量元素室,北京100050
作者简介:黄振武(1968-),男,湖北武汉人,副研究员,博士,主要从事微量元素营养的研究。 通讯作者:杨晓光
文章编号:100120580(2006)0921058202 中图分类号:R 15311;Q 579113 文献标识码:A
【专题报道之二】
育龄妇女钙吸收与维生素D 受体基因多态性3
黄振武,董杰,朴建华,田园,李卫东,许洁,杨晓光
摘 要:目的 在我国城市居民代表性膳食条件下,探讨育龄妇女膳食钙吸收与维生素D 受体(VDR )基因BsmI 酶切多态性间的关系。方法 从300名18~23岁女大学生中筛选40名受试对象,并通过特定引物对VDR 基因扩增产物,以限制性内切酶BsmI 酶切电泳条带分布分型。3d 代表性膳食适应后,开始为期12d 的代谢实验。研究对象所摄取的食品和饮品为城市代表性膳食,称重(包括饮水)并采集备份样品分析测定;采集研究对象的粪便和尿液。测定并计算出每位研究对象膳食钙的吸收率。结果 不同VDR 基因BsmI 酶切型别的育龄妇女膳食钙吸收率不同,即Bb <="" 基因bb="">
关键词:VDR 基因;育龄妇女;钙;代表性膳食
R elationship betw een absorption of dietary calcium and Bsm I polymorphism of V DR gene in childbearing w omen HUA N G Zhenw u ,DON G Jie ,PIA O Jianhua ,et al.Institute of N ut rition and Food S af ety ,Chinese Center f or Disease Cont rol and Prevention (Beijing 100050,China )
Abstract :Objective To examine the relationship between the absorption of dietary calcium and Vitamin D 3receptor (VDR )gene Bsm I RFL Ps in childbearing women.Methods Forty subjects were selected from three hundred young famale students aged 18~23in 2001.After identifying the VDR gene FokI RFL Ps ,the women were given the representative diets during the 3-day adaptation period and the 12-day metaboism period.The copy food and drinking for measurement of un 2trients and also the complete feces each day were collected.R esults As expected ,the significant difference of the absorption of diet calcium between VDR Bsm Igene RFL Ps (bb <="" in="" low="" more="" observed="" of="" our="" p="" paid="" should="" the="" to="" was="" with="" women="">
K ey w ords :VDR gene ;childbearing women ;calcium ;representative diet
机体内活性维生素D3与其维生素D受体(VDR)结合,从而影响肠、骨和肾中钙的转运。VDR基因的多态性与腰椎等骨密度存在相关关系〔1〕。补充维生素D3对骨密度(BMD)的影响与VDR基因型有一定的关系,补充维生素D3之前股骨颈BMD在BB、Bb,bb型之间并无差异,而补充维生素D3后,BB和Bb型BMD增加值显著高于bb型。已有报道,绝经妇女VDR基因BsmI酶切多态性和钙吸收的关系受膳食钙摄取量的影响〔2〕。本文对育龄妇女钙吸收与VDR基因BsmI 酶切多态性的关系进行了研究。
1 对象与方法
111 对象 2001年从某军医大学18~23岁的300名女学生中筛选研究对象40名,每名受试者必须具备以下条件:自愿参加,身体健康,近期无接触药物、射线等,无胃肠道疾病,自身铁、锌和钙的营养状况正常,没有补充营养素。
112 代表性膳食食谱设计 根据全国营养调查、中国总膳食、新近营养调查资料为依据,并结合现场市场供应时令蔬菜情况,设计了3d为1周期的育龄妇女食谱。
113 维生素D3受体基因BsmI酶切多态性 根据文献〔3〕,通过PCR扩增白细胞基因组DNA中VDR基因第8内含子目的片段。VDR的扩增产物长度为800bp。产物经BsmI酶切并电泳,紫外灯下观察结果。BB型(仅有800bp1条带者);Bb型(出现800,650和150bp3条带者);bb型(出现650和150bp2条区带者)。本研究中,各型别分布为9名Bb型和29名bb型,没有BB型。
114 现场人体代谢实验 采用集中食宿,受试者不能食用实验提供食物以外的任何食物(包括饮料)。先给实验对象3d 实验膳食适应。然后以3d为1个食谱周期,食用实验膳食直至实验结束。(1)膳食:将分为主食、动物食物和植物食物3类收集。主食按需自由摄入。其他食物定量供应,使每名受试对象大致相当。每种食物和饮品实际摄入加以称重,食物和饮品留取备份样品。食物样品用钛刀头打碎机制备均匀样品后-20℃保存。准确称量记录每个受试对象的饮用水。
(2)粪便:自粪便出现红染料(卡红)起完全收集每个受试对象的全部粪便至第12d服用红染料后在粪便中出现为止,共计为自第4~11d中9d膳食所产生的全部粪便。粪便每24h收集一次,用不锈钢食品打碎机制备均匀样品后-20℃保存。粪便收集是否完整,采用稀土元素Yb(镱)示踪。稀土元素镱(Yb)(美国Sigma公司)。本次实验稀土元素镱的回收率为019730±010564。
(3)尿:自第3d起按每24h收集每个受试对象的全部尿液至第14d。准确测量每次收集的尿液体积,混匀后留取部分尿液于-20℃保存。
115 膳食成分以及排泄物中元素测定 称量后样品加到酸洗过的玻璃烧杯中,同时称取3份猪肝样品作为质量控制。在每个烧杯中加入10ml现配的混合酸,盖上挥发皿,室温静置过夜。将样品在电热板上以温火消化40min后加大火力,直到样品溶液清亮。取下样品,冷却至室温,用大约10ml三蒸水冲洗挥发皿和烧杯壁,再放到电热板上赶酸,直至剩余约1ml液体取下冷却。将液体转入有刻度的离心管中,洗烧杯3~4次,并入离心管,定容至10ml。在原子吸收分光光度仪上测定钙、锌和铁的含量。其他食物成分均按照国家标准测定:热能G B13432-92;蛋白质G B/T5009.5-2003;脂肪5009.6-2003;铁5009.90-2003;锌5009.14-2003;钙5009.92-23;植酸G B/T5009.154-2003。
116 统计分析 采用SPSS11.0软件进行分析。显著性界限为P<0105。2 结 果
211 实验膳食的代表性 给予受试对象实验膳食后,经过实际称重、取样、测定和计算得出以下营养素的日均实际摄取量分别为:热能8903155kJ,蛋白质7113g,脂肪84154g,铁1419mg,锌1016mg,钙76715mg(为膳食和饮品总来源);除了铁膳食日均摄取量较低外,日均膳食主要营
养素实际摄取量与我国成年女性膳食日推荐值接近。说明设计的实验膳食具有良好的代表性。
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