LightCycler96荧光定量PCR仪操作规程
1. 开机前请注意确保室温在20-25℃。
2. 请选用与罗氏原装耗材高度一致的96孔板或8联管。
3. 在操作过程中,切忌戴有粉末的乳胶手套或裸手接触光学透性封板膜或管盖。
4. 先打开仪器背面的电源开关,Initialization表示仪器开始初始化,直到仪器出现Ready即为可用状态。Standby状态表示加热模块盖关闭,可以通过点击Heat lid激活Start运行实验。
5. 配制反应液,加样封膜完毕,在板式离心机中1500×g(3000rpm)离心两分钟,排除气泡。
6. 数据可以直接储存在仪器或者U盘,仪器最多可以储存50个实验数据,仪器数据可以和U盘同步。电脑和仪器成功连接后也可以通过Instrument Manager共享数据。
7. LC96 背后有两个USB接口,上面用于连接U盘,下面用于连Barcode,请不要交换使用。
8. 实验完成后可以用U盘备份,或者以附件的形式发到指定邮箱。关闭电脑及总电源,实验人员在离开PCR扩增区时带走用完的反应板。
维护SOP
LightCycler 96是一台免维护的仪器。做任何维护工作前,须确认仪器电源已关闭。
预防性维护:
1. 检查LightCycler 96主机两侧与背后空间,确保无任何阻碍空气流通的物品,包括书本、纸张或窗帘等;
2. 若需清洁主机表面或触摸屏,用不起毛的软布蘸少量灭菌水擦拭即可。切勿直接将去污剂喷洒在仪器和触摸屏上。
清洁性维护:
若有需要,可用性质温和的商品化清洁剂或70%的乙醇溶液对LightCycler 96主机表面、热循环96孔模块进行清洁。
清洁96孔热循环模块:
1. 打开抽屉,关闭仪器,
2. 用移液器移取125μl 70%乙醇溶液或异丙醇至所有孔内;
3. 15分钟后,使用移液器对孔内溶液进行多次吹洗;
4. 移除孔内的液体,并使96孔模块孔内自然风干;注意操作时不要让清洗液腐蚀热循环模块的涂层。
售后服务:
1. 故障报修:仪器开机自检不通过,点击LC96仪器触摸屏下方Generate Error生成错误报告,将其发给罗氏相关工程师,或致电800-820-8864或者400-820-8864。
2. 技术咨询:对软件的使用功能或者相关参数设置有任何问题,请致电800-820-0577,或者email至asc.support@roche,或者联系当地销售工程师及应用支持。
LightCycler96 快速操作指南
1. 配置反应体系
2. 设置实验程序
a) 在LightCycler96应用软件或者LightCycler96仪器软件创建实验程序
b) 打开Run Editor 设置温度包括升降温和循环数
c) 选择 detection format 采集模式和sample volume 样品体积
d) 保存实验
3. 开始运行实验
a) 如果在LightCycler96应用软件中设置实验,请将实验文件转移到LightCycler96仪器
i. 如果仪器和电脑连接,可以通过Instrument Manager 发送文件到仪器
ii. 如果仪器没有和网络连接,使用USB 转移
b) 放置96孔板到仪器中
c) 在Overview 界面,选择实验
d) 在global 界面右面选择 Start 开始按钮
e) 在Raw data 界面监控实验进度
4. 实验结束后转移到应用软件分析
5. 编辑样品信息
a) 打开Sample Editor中的plate view
b) 电脑软件editor使用Clear Wells 功能剔除没有样品的孔位
c) 选择做实验的孔位
d) 在Reaction properties 界面,编辑样品信息
e) 保存实验
6. 分析数据
a) 在Analysis 界面增加分析类型
b) 打开<analysis>分析设置对话框, 设置分析参数
c) 如果需要可以排除样品
d) 选择需要显示的结果
e) 导出数据
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