③全菌抗原的ELISAS
a、新鲜培养的细菌用蒸馏水或PBS悬浮，并调整细菌浓度至1×108
个/ml。必须指出，对于人畜共患病病原体需注意安全操作，最好是灭活处理。
b、每孔中加100ul 5%戊二醛溶液（0.1mol/L NaHCO3 95ml+25%戊二醛溶液5ml），37℃作用2小时，蒸馏水洗涤3次；加上述细菌悬液50ul/孔；37-56℃烘干；每孔加200ul封闭液4℃过夜或37℃ 2小时封闭。
c、步骤b也可采用先每孔加50ul细菌悬液，37℃-56℃烘干，然后
用-20℃预冷的无水甲醇室温作用15分钟，蒸馏水洗涤3次；每孔加37度
200ul封闭液4℃过夜或37℃ 2小时封闭。
d、洗涤液洗3次；此时包被板可在-20℃或4℃保存备用。
e、以下步骤同上法。
戊二醛醛化（25%）ELISA的板子，37度2小时，去离子水水洗；然后加用包被缓冲液稀释菌液（大概到十的五次方每孔左右，具体要做下方阵滴定），包被过夜；pbst洗三次，加一抗，37度2小时；PBST洗三
次，加二抗，37度2小时；PBST洗三次，显，底物可以是TMB，也可以用OPD，个人感觉TMB方便些。

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