网络出版时间：２０２１－５－２８１０：１９　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２１０５２７．１４５８．０２８．ｈｔｍｌ
杨桃根ＤＭＤＤ调控ＲＯＳ介导的自噬通路减轻
糖尿病大鼠心肌损伤
马　静１，吴娅妮２，黄德伦１，周艳平１，侯柳婷１，李亚坤１，钟　静１，韦晓洁１
（１．广西中医药大学基础医学院，广西南宁　５３０２９９；２．广西医科大学药学院，广西南宁　５３００２１）
收稿日期：２０２１－０２－１８，修回日期：２０２１－０３－２８
基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２００４１８６）；广西自然科
学基金资助项目（Ｎｏ２０１８ＧＸＮＳＦＡＡ２９４１０３，２０２０ＧＸＮＳＦＡＡ２９７１８１）；广西一流学科建设开放课题（Ｎｏ２０１９ＸＫ０８０）；广西中医药大学引进博士科研启动基金项目（
Ｎｏ２０１８ＢＳ０１０）；广西壮瑶药重点实验室（桂科基字［２０１４］３２号，ＮｏＧＸＺＹＫＦ２０２０Ａ ０７）；大学生创新创业训练计划项目（Ｎｏ２０２０１０６００２１４，２０２０１０６００１０３）；广西中医药大学“岐黄工程”高层次人才团队培育项目（Ｎｏ２０２１００１
）作者简介：马　静（１９８０－），女，博士生，研究方向：中药抗代谢性疾
病机制研究，Ｅ ｍａｉｌ：７７０１２３９０２＠ｑｑ．ｃｏｍ；
韦晓洁（
１９８５－），女，博士，副教授，研究方向：中药抗糖尿病机制研究，通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：１１６１９０８８８＠ｑｑ．ｃｏｍ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２１．０６．０１５
文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２１）０６－０８２３－０５中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ２８４ １；Ｒ３２２ １１；Ｒ３２９ ２５；Ｒ３３１ ３１；Ｒ５４２ ２；Ｒ５８７ ２
摘要：目的　探讨杨桃根ＤＭＤＤ对糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＤＭ）大鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法　ＳＤ大鼠利用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素诱导ＤＭ模型，ＤＭＤＤ连续
灌胃２１ｄ。检测大鼠空腹血糖（ＦＢＧ）；超声心动图检测左室舒张末期压（ＬＶＥＤＰ）、左心室压峰值（ＬＶＳＰ）、左心室内压最大上升速率（＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左心室内压最大下降速率（－ｄｐ／ｄｔｍａｘ）；ＨＥ染观察心肌结构变化；ＴＵＮＥＬ染观察心肌细胞凋亡；试剂盒检测心肌组织中活性氧（ＲＯＳ）、丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测Ｂｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３、Ａｔｇ５表达，以及ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ通路激活情况。结果　相较于Ｄ
Ｍ组，ＤＭＤＤ组心肌组织损伤有效改善，心肌细胞凋亡指数减少，ＦＢＧ、ＬＶＥＤＰ、ＲＯＳ、ＭＤＡ、Ｂｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３Ⅱ／Ｉ、Ａｔｇ５明显降低，同时ＬＶＳＰ、＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ、ＳＯＤ、ｐ ＰＩ３Ｋ／ＰＩ３Ｋ、ｐ Ａｋｔ／Ａｋｔ、ｐ ｍＴＯＲ／ｍＴＯＲ明显增高（Ｐ＜０ ０５），并呈剂量依赖性。结论　杨桃根ＤＭＤＤ可通过调控Ｒ
ＯＳ介导的ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ自噬通路，抑制心肌细胞凋亡，从而减轻ＤＭ大鼠心肌损伤。
关键词：糖尿病；心肌损伤；杨桃根ＤＭＤＤ；ＲＯＳ；自噬；ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ通路
开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：
  糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＤＭ）是全球危害性最大的慢性疾病之一，而我国年龄标准化的Ｄ
Ｍ发病率已高达１０％［１］
。糖尿病心肌病（ｄｉａｂｅｔｉｃｃａｒｄｉｏ
ｍｙｏｐａｔｈｙ，ＤＣＭ）是ＤＭ常见的、严重的并发症之一，
也是导致Ｄ
Ｍ患者死亡的主要原因［２］
。长期高糖刺激可造成心肌细胞肥大、凋亡，引起心肌纤维化，导致心室收缩及舒张功能不全，最终形成心力衰
竭［
３］
。由此可见，高糖所致的心肌细胞凋亡是诱发ＤＣＭ的核心病理变化。ＤＣＭ心肌细胞凋亡的发生机制复杂，目前认为与高糖引起的内质网应激、活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）聚集及自噬紊乱有
关［
４］。杨桃（ＡｖｅｒｒｈｏａｃａｒａｍｂｏｌａＬ．）为酢浆草科五敛子属植物，在我国广泛分布于广西、广东、福建等
地［
５］
。杨桃根茎是广西民间常用中药材。《中华本草》中记载，杨桃根具有行气活血、祛风止痛、涩精止带之功效。本课题组前期证实，杨桃根总提取物可改善ＤＭ大鼠糖脂代谢，抑制高糖诱发的氧化应
激反应［６］
。近期，我们从杨桃根中分离出一种单体
成分，即２ 十二烷基 ６ 甲氧基 ２，５ 二烯 １，４ 环己二酮（
ＤＭＤＤ），并初步证实该成分能减轻高糖所致的心肌细胞损伤，但其机制尚未完全明确。本研究采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素诱导建立ＤＭ大鼠模型，观察杨桃根ＤＭＤＤ对ＤＭ大鼠心脏功能、心肌细胞凋亡、
ＲＯＳ 自噬通路的影响，探讨杨桃根ＤＭＤＤ对ＤＭ大鼠心肌损伤的保护作用及机制。１　材料与方法
１．１　实验动物　ＳＰＦ级成年ＳＤ大鼠共５０只，♂，体质量（１８０±２０）ｇ，由广西医科大学实验动物中心提供，许可证号：ＳＣＸＫ桂２０１４ ０００２。
１．２　实验试剂　杨桃根ＤＭＤＤ由本课题组自行制备；高糖高脂饲料购于北京博爱港生物技术有限公司；链脲佐菌素购于Ｓｉｇｍａ公司；ＲＯＳ、丙二醛（ｍａ ｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；抗Ｂｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３、Ａｔｇ５、ｐ ＰＩ３Ｋ、ＰＩ３Ｋ、ｐ Ａｋｔ、
·３
２８·中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２１Ｊｕｎ；３７（６）：８２３－７
Ａｋｔ、ｐ ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ＧＡＰＤＨ抗体购于Ａｂｃａｍ公司；ＴＵＮＥＬ试剂盒购于上海碧云天生物技术有限公司。
１．３　分组与造模　大鼠随机分为Ｃｏｎｔｒｏｌ组、ＤＭ
组、ＤＭＤＤ组（１２ ５、２５ ０、５０ ０ｍｇ·ｋｇ－１
），每组１０
只。经适应性喂养１周后，ＤＭ组、ＤＭＤＤ组给予高糖高脂饲料饲养４周，之后腹腔注射链脲佐菌素
（１２０ｍｇ·ｋｇ－１
）１次，４周后随机血糖值≥１６ ７ｍｍｏｌ·Ｌ－１即判定２型糖尿病大鼠造模成功，本研
究造模成功率为７
５％（３０／４０），失败模型予以替补；Ｃｏｎｔｒｏｌ组仅给予普通饲料及灌胃等量生理盐水。ＤＭＤＤ组于造模成功后分别灌胃不同浓度ＤＭＤＤ，连续灌胃给药２１ｄ，１次／ｄ；Ｃｏｎｔｒｏｌ组、ＤＭ组仅灌胃等量生理盐水。末次给药后，采集大鼠血样及心脏组织供后续试验。
１．４　血糖测定　经尾尖采血，用血糖测定仪检测大鼠空腹血糖（ｆａｓｔｉｎｇｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅ，ＦＢＧ）。
１．５　左心室功能评价　１０％水合氯醛（３ｍＬ·
ｋｇ－１）腹腔注射麻醉大鼠，使用Ｖｅｖｏ２１００型小动物
彩超声诊断仪测定左室舒张末期压（ｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕ ｌａｒｅｎｄ ｄｉａｓｔｏｌｉｃｐｒｅｓｓｕｒｅ，ＬＶＥＤＰ）、左心室压峰值（ｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｓｙｓｔｏｌｉｃｐｒｅｓｓｕｒｅ，ＬＶＳＰ）、左心室内压最大上升速率（ｍａｘｉｍｕｍｕｐｓｔｒｏｋｅｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆｌｅｆｔｖｅｎ ｔｒｉｃｕｌａｒｐｒｅｓｓｕｒｅ，＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左心室内压最大下降速率（ｍａｘｉｍｕｍｄｅｓｃｅｎｔｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｐｒｅｓｓｕｒｅ，－ｄｐ／ｄｔｍａｘ
）。１．６　心肌形态变化　取大鼠心肌组织，４％多聚甲醛固定，随后脱水、透明、浸蜡、包埋、切片，ＨＥ染后于光镜下观察心肌组织病理学形态变化。１．７　心肌细胞凋亡　心肌组织经固定、脱水、石蜡包埋、切片后，参照ＴＵＮＥＬ试剂盒说明书检测细胞凋亡，凋亡细胞核染成棕黄，光镜下随机选５个视野，统计凋亡细胞数目，凋亡指数／％＝（凋亡细胞数／总细胞数）×１００％。
１．８　氧化应激指标检测　取心肌组织加入４℃
ＰＢＳ
研磨制备１０％组织匀浆，３０００ｒ·ｍｉｎ－１
离心１０ｍｉｎ取上清液，根据试剂盒说明书进行操作，ＳＯＤ采用羟胺法检测，ＭＤＡ采用ＴＢＡ法检测，ＲＯＳ采用化学荧光法检测。
１．９　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测　取５０ｍｇ心肌组织加入５００μＬ预冷ＲＩＰＡ裂解液，匀浆后离心取上清，ＢＣＡ法检测蛋白浓度，２０μｇ蛋白样品上样，行ＳＤＳ ＰＡＧＥ电泳，转膜至ＰＶＤＦ膜，５％脱脂奶粉封闭，一抗（Ｂｅｃｌｉｎ １１∶５００、ＬＣ３１∶１０００、Ａｔｇ５１∶１０００、ＰＩ３Ｋ１∶１０００、ｐ ＰＩ３Ｋ１∶１０００、Ａｋｔ１∶１０００、ｐ Ａｋｔ１∶１０００、ｍＴＯＲ１∶１０００、ｐ ｍＴＯＲ１∶１０００、ＧＡＰＤＨ１∶２０００）４℃孵育过夜，洗膜后加入二抗（１∶５０００）室温孵育１ｈ，洗膜、ＥＣＬ显、曝光，Ｉｍ ａｇｅＪ
软件处理图像。１．１０　统计学方法　ＳＰＳＳ２６ ０分析数据，计量资料
以珋ｘ±ｓ表示，多组间比较行单因素方差分析，两两比较采用ＬＳＤ ｔ检验。２　结果
２．１　ＤＭＤＤ对ＦＢＧ和心功能指标的影响　相较于Ｃｏｎｔｒｏｌ组，ＤＭ组ＦＢＧ、ＬＶＥＤＰ明显增高，同时ＬＶＳＰ、＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ明显降低（Ｐ＜０ ０５）；相较于ＤＭ组，ＤＭＤＤ组ＦＢＧ、ＬＶＥＤＰ明显降低，同时ＬＶＳＰ、＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ明显增高（Ｐ＜０ ０５
），并呈剂量依赖性，见Ｔａｂ１。２．２　ＤＭＤＤ对心肌组织结构的影响　ＨＥ染可见Ｃｏｎｔｒｏｌ组大鼠心肌细胞形态结构完整，排列整齐、紧密；ＤＭ组大鼠心肌细胞呈不规则排列，细胞间质增宽，并伴有细胞破碎、坏死，部分心肌纤维断裂；ＤＭＤＤ组大鼠心肌细胞排列稍紊乱，破碎、坏死
细胞数量明显减少，纤维断裂减少（Ｆｉｇ１）。２．３　ＤＭＤＤ对心肌凋亡的影响　ＴＵＮＥＬ染可见，相较于Ｃｏｎｔｒｏｌ组，ＤＭ组心肌细胞凋亡指数明显增高（Ｐ＜０ ０５）；相较于ＤＭ组，ＤＭＤＤ组心肌细胞凋亡指数明显降低（Ｐ＜０ ０５），且呈明显剂量依赖性（Ｆｉｇ２）。
Ｔａｂ１　ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＦＢＧａｎｄｃａｒｄｉａｃｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｄｅｘｅｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
ＧｒｏｕｐＦＢＧ／ｍｍｏｌ·Ｌ－１
ＬＶＳＰ／ｍｍＨｇＬＶＥＤＰ／ｍｍＨｇ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ／ｍｍＨｇ·ｓ－１
－ｄｐ／ｄｔｍａｘ／
ｍｍＨｇ·ｓ－１
Ｃｏｎｔｒｏｌ５．６５±１．２１１２０．７２±７．１９
９．４９±２．２３
２９２５．１０±８４．０６
２５６８．２４±１２７．１１
ＤＭ
２７．２８±３．７６ ７６．７９±５．６１
１８．６０±３．８４
１２２８．５９±２１３．２１
１１３４．６２±２０５．１９
１２．５ｍｇ·ｋｇ－１ＤＭＤＤ２４．１３±２．２１ ＃８２．４９±４．２１ ＃１６．８５±３．６５ ＃１７３８．１１±１４８．０５ ＃１４０７．１８±２９１．４５ ＃２５．０ｍｇ·ｋｇ－１ＤＭＤＤ２１．３９±２．８４ ＃９０．１１±５．０７ ＃１３．６４±２．４１ ＃１８５７．６９±１３７．２２ ＃１５２９．６３±１７７．２５ ＃５０．０ｍｇ·ｋｇ－１ＤＭＤＤ
１８．６２±１．９５
＃９５．５２±６．１８
＃１２．０５±２．３９
＃２１５５．１２±２２４．３６
＃１７５２．２７±１８６．０８
＃  Ｐ＜０ ０５ｖｓｃｏｎｔｒｏｌ；＃
Ｐ＜０ ０５ｖｓＤＭ
·
４２８·中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２１Ｊｕｎ；３７（６）
Ｆｉｇ１　Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ（ＨＥ×２００
）
Ｆｉｇ２　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｍｙｏｃａｒｄｉａｌｃｅｌｌｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ（×２００，珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０
）
Ｆｉｇ３　ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＲＯＳ，ＳＯＤａｎｄＭＤＡｌｅｖｅｌｓｉｎｍｙｏｃａｒｄｉａｌｔｉｓｓｕｅｓｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
  Ｐ＜０ ０５ｖｓＣｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；＃
Ｐ＜０ ０５ｖｓＤＭｇｒｏｕｐ
２．４　ＤＭＤＤ对心肌ＲＯＳ、ＳＯＤ及ＭＤＡ水平的影响　相较于Ｃｏｎｔｒｏｌ组，ＤＭ组ＳＯＤ水平明显降低，同时ＲＯＳ、ＭＤＡ水平明显增高（Ｐ＜０ ０５）；相较于ＤＭ组，ＤＭＤＤ组ＳＯＤ水平明显增高，同时ＲＯＳ、ＭＤＡ水平明显降低（Ｐ＜０ ０５），且呈明显剂量依赖性（Ｆｉｇ３）。
２．５　ＤＭＤＤ对心肌Ｂｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３、Ａｔｇ５表达的影响　相较于Ｃｏｎｔｒｏｌ组，ＤＭ组Ｂｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３Ⅱ／Ⅰ、Ａｔｇ５表达明显增高（Ｐ＜０ ０５）；相较于ＤＭ组，ＤＭ ＤＤ组Ｂ
ｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３Ⅱ／Ｉ、Ａｔｇ５表达明显降低（Ｐ＜０ ０５），且呈明显剂量依赖性（Ｆｉｇ４）。
２．６　ＤＭＤＤ对心肌ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ通路的影响　相较于Ｃｏｎｔｒｏｌ组，ＤＭ组ｐ ＰＩ３Ｋ／ＰＩ３Ｋ、ｐ Ａｋｔ／Ａｋｔ、ｐ ｍＴＯＲ／ｍＴＯＲ明显降低（Ｐ＜０ ０５）；相较于ＤＭ组，ＤＭＤＤ组ｐ ＰＩ３Ｋ／ＰＩ３Ｋ、ｐ Ａｋｔ／Ａｋｔ、ｐ ｍＴＯＲ／ｍＴＯＲ明显增高（Ｐ＜０ ０５），且呈明显剂量依赖性（Ｆｉｇ５）。３　讨论
  持续高糖诱导的心肌细胞凋亡是引发ＤＣＭ的
主要原因，由于凋亡心肌细胞无法再生，逐渐被胶原纤维等取代，故而导致心肌纤维化及心室重构。因此，抑制心肌细胞凋亡对于改善ＤＭ心肌损伤具有
积极意义［７］
。本研究采用高糖高脂饮食联合腹腔
注射链脲佐菌素建立ＤＭ大鼠模型，ＨＥ染显示ＤＭ组大鼠心肌组织损伤明显；心脏彩超可见ＬＶ ＥＤＰ明显增高，同时ＬＶＳＰ、＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ明显降低；ＴＵＮＥＬ染显示心肌细胞凋亡明显。上述
变化与文献［８］中对于ＤＭ心肌损伤模型的报道一
致，提示造模成功。而相较于ＤＭ组，ＤＭＤＤ组大鼠心肌组织损伤明显减轻，左心室功能明显改善，同时心肌细胞凋亡指数明显降低。这表明ＤＭＤＤ对于ＤＭ心肌损伤具有明确的保护效应。
自噬是真核细胞的重要代谢途径，泛指蛋白质和受损细胞器经溶酶体清除、降解的一系列过
程［９］。生理条件下，细胞自噬活性持续处于低水平状态，有助于维持细胞的存活与能量平衡［
１０］
。然而，某些条件下会导致自噬过度激活，造成细胞程序性死亡。目前认为，自噬可在一定程度上调控心肌
·
５２８·中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２１Ｊｕｎ；３７（６）
Ｆｉｇ４　ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＢｅｃｌｉｎ １，ＬＣ３ａｎｄＡｔｇ５ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｍｙｏｃａｒｄｉａｌｔｉｓｓｕｅｓｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
Ｐ＜０ ０５ｖｓＣｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃
Ｐ＜０ ０１ｖｓＤＭｇｒｏｕ
ｐ
Ｆｉｇ５　ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＰＩ３Ｋ，Ａｋｔ，ａｎｄｍＴＯＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｉｎｍｙｏｃａｒｄｉａｌｔｉｓｓｕｅｓｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ（
珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）  Ｐ＜０ ０５ｖｓＣｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃
Ｐ＜０ ０１ｖｓＤＭｇｒｏｕｐ
细胞增殖与凋亡，并在ＤＣＭ进展过程中发挥至关重
要的作用［１１］
。本研究显示，ＤＭ组大鼠不仅存在心
功能障碍，还伴有心肌自噬过度激活，表现在自噬标志物Ｂｅｃｌｉｎ １、ＬＣ３Ⅱ／Ｉ、Ａｔｇ５表达较Ｃｏｎｔｒｏｌ组明显
增高，与朱小艳等［１２］报道一致。而ＤＭＤＤ组大鼠
上述自噬标志物表达较Ｄ
Ｍ组明显降低，提示ＤＭ ＤＤ可有效抑制ＤＭ大鼠心肌细胞过度自噬。
高糖状态下，心肌组织中ＲＯＳ产生增加，加之氧自由基清除能力减弱，势必造成ＲＯＳ大量蓄积，
最终造成心肌细胞ＤＮＡ及脂质的过氧化损伤［１３］。
本研究结果显示，ＤＭＤＤ组ＳＯＤ水平较ＤＭ组明显增高，同时ＲＯＳ、ＭＤＡ水平较ＤＭ组明显降低。表明ＤＭＤＤ有助于清除ＲＯＳ，并调控抗氧化物／氧化物平衡，从而改善糖尿病所致心肌氧化应激损伤。近年研究发现，
ＲＯＳ可作为一种胞内信号分子参与细胞自噬的调控［１４］。证据表明，ＲＯＳ可通过调控
ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ、ＡＭＰＫ、ＰＩＫ３Ｃ３等通路诱导自噬
小体形成，从而引发细胞自噬［１５］
。其中ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／
ｍＴＯＲ通路是研究得最为广泛的路径之一。当细胞ＲＯＳ水平发生变化时，可激活ＰＩ３Ｋ激酶，促使Ａｋｔ磷酸化，并调控下游ｍＴＯＲ活化，进而影响自噬体
形成和成熟［１６－１７］。本研究发现，ＤＭＤＤ组ｐ ＰＩ３Ｋ／
ＰＩ３Ｋ、ｐ Ａｋｔ／Ａｋｔ、ｐ ｍＴＯＲ／ｍＴＯＲ较ＤＭ组明显增高（Ｐ＜０ ０５），说明ＤＭＤＤ可激活ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ通路，这也是其调控心肌细胞自噬的主要机制之一。
综上所述，杨桃根ＤＭＤＤ可通过调控ＲＯＳ介导的ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ自噬通路，抑制心肌细胞凋亡，从而减轻ＤＭ大鼠心肌损伤。参考文献：
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［Ｊ］．ＮａｔＰｒｏｄＲｅｓＤｅｖ，２０１９，３１（１）：８１－６．·
６２８·中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２１Ｊｕｎ；３７（６）
［６］　徐小惠，范氏泰和，韦晓洁，等．杨桃根总提取物对糖尿病小鼠肾功能及其抗氧化应激作用的研究［Ｊ］．中国药理学通报，２０１７，３３（１）：９５－９．
［６］　ＸｕＸＨ，ＰｈａｍＴＨ，ＷｅｉＸＪ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆａｖｅｒ ｒｈｏａｃａｒａｍｂｏｌａＬ．ｒｏｏｔｏｎｒｅｎａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｍｉｃｅａｎｄｉｔｓａｎｔｉ ｏｘｉｄａｔｉｖｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌＢｕｌｌ，２０１７，３３（１）：９５－９．
［７］　ＱｉＢＣ，ＨｅＬＪ，ＺｈａｏＹ，ｅｔａｌ．Ａｋａｐ１ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｅｘａｃｅｒｂａｔｅｓｄｉａ ｂｅｔｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙｉｎｍｉｃｅｂｙＮＤＵＦＳ１ ｍｅｄｉａｔｅｄｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，２０２０，６３（５）：１０７２
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ＡｖｅｒｒｈｏａＣａｒａｍｂｏｌａＬ．ＲｏｏｔｓＤＭＤＤａｌｌｅｖｉａｔｅｓｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｊｕｒｙｉｎｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｍｉｃｅｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＲＯＳ ｍｅｄｉａｔｅｄａｕｔｏｐｈａｇｙｐａｔｈｗａｙ
ＭＡＪｉｎｇ１，ＷＵＹａ ｎｉ２，ＨＵＡＮＧＤｅ ｌｕｎ１，ＺＨＯＵＹａｎ ｐｉｎｇ１，ＨＯＵＬｉｕ ｔｉｎｇ１，ＬＩＹａ ｋｕｎ１，
ＺＨＯＮＧＪｉｎｇ１，ＷＥＩＸｉａｏ ｊｉｅ１
（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌ，ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３０２９９，Ｃｈｉｎａ；
２．ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＧｕａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓ
ｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｉｍ　Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆ
ＡｖｅｒｒｈｏａＣａｒａｍｂｏｌａＬ．ＲｏｏｔｓＤＭＤＤａｌｌｅｖｉａｔｉｎｇｍｙｏ ｃａｒｄｉａｌｉｎｊｕｒｙｉｎｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ（ＤＭ）ｍｉｃｅａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＳＤｍｉｃｅｗｅｒｅｇｉｖｅｎｈｉｇｈ ｇｌｕ ｃｏｓｅ ｈｉｇｈ ｆａｔｄｉｅｔｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎｔｏｉｎ ｄｕｃｅＤＭｍｏｄｅｌ，ａｎｄｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｗｉｔｈＤＭＤＤ．Ｔｈｅｆａｓｔｉｎｇｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅ（ＦＢＧ）ｗａｓｒｅｃｏｒｄｅｄ．Ｔｈｅｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｅｎｄ ｄｉａｓｔｏｌｉｃｐｒｅｓｓｕｒｅ（ＬＶＥＤＰ），ｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｓｙｓｔｏｌｉｃｐｒｅｓｓｕｒｅ（ＬＶＳＰ），ｍａｘｉｍｕｍｕｐ ｓｔｒｏｋｅｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｐｒｅｓｓｕｒｅ（＋ｄｐ／ｄｔ
ｍａｘ
）ａｎｄｍａｘｉｍｕｍｄｅｓｃｅｎｔｖｅｌｏｃｉｔｙｏｆｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｐｒｅｓ
ｓｕｒｅ（－ｄｐ／ｄｔ
ｍａｘ
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ｍａｘ
，－ｄｐ／ｄｔ
ｍａｘ
，ＳＯＤ，ｐ ＰＩ３Ｋ／ＰＩ３Ｋ，ｐ Ａｋｔ／Ａｋｔａｎｄｐ ｍＴＯＲ／ｍＴＯＲｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０ ０５），ａｎｄｓｈｏｗｅｄａｄｏｓｅ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　ＡｖｅｒｒｈｏａＣａ ｒａｍｂｏｌａＬ．ＲｏｏｔｓＤＭＤＤｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅａｐ ｏｐｔｏｓｉｓｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＲＯＳ ｍｅｄｉａｔｅｄＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲａｕｔｏｐｈａｇｙｐａｔｈｗａｙ，ｔｈｕｓｒｅｄｕｃｉｎｇｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｊｕｒｙｉｎＤＭｍｉｃｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ；ｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｊｕｒｙ；ＡｖｅｒｒｈｏａＣａｒａｍｂｏｌａＬ．ＲｏｏｔｓＤＭＤＤ；ＲＯＳ；ａｕｔｏｐｈ ａｇｙ；ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲｐａｔｈｗａｙ
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中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２１Ｊｕｎ；３７（６）

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