Countstar细胞计数仪操作手册
计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序
一、启动Cedex XS 系统
1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝光表示仪器已打开;
2. 打开Cedex XS 控制软件:
打开配套电脑,进入Windows操作系统;
双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;
3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
把样品板支架拉出;
点击Cedex XS 控制中心中的HWM,打开硬件管理对话框;
点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;
调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定
1. 样品制备
用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;
使用0.2%台盼蓝染(一般为10μl1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;
将细胞悬液充分混匀;
用移液取细胞悬液加入样品板,每槽10μl;可以一次测定八槽,也可测定单槽。
2. 进样:样品板有八个槽,一次可测定四个样品槽。
拉出样品板支架;
加有样品方向朝里,将样品板放上支架;
将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置:
1. 打开测定界面:Cedex XS 控制中心点击MEASURE,进入测定界面;
2. 设置样品参数:
在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;
输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;
软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;
点击MI×键,出现进样体积对话框;
输入参数:样品量(Sample V olume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent V olume);
系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)
3. reactor软件设置测定与分析参数:
在分析参数栏选择需要的精度水平(Precision):精度水平表示单次测定样品数,最多8;
选择细胞类型,默认的细胞类型有:标准大小细胞直径约12-14μm;可识别对象;小细胞直径约8μm;
系统自动添加系统名和测定时间。
四、开始测定
点击START MEASUREMENT;
测定多个样品时,在弹出对话框后将样品板支架推进一格,点击确定自动开始测定程序;
重复上一步骤测定其他样品;
若测定样品多于四个,可将支架抽出后样品板调转方向重新插入进行上述测定程序;
全部测定结束后关闭对话框。
五、计数结果
1. 在测定界面获得结果
测定程序完成后,结果在测定界面的数据栏(Result Data)显示,数据栏有两个表格:第一个表格显示总细胞数,第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。
两个表中分别列出以下参数:
Viable Cell Conc.: 活细胞浓度[×105/mL]
Total Cell Conc.: 总细胞浓度[×105/mL]
Viability (%): 细胞总数中活细胞的百分比
Total Cell Count: 测定总细胞数
Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度(1表示细胞形状均一)Avg
Diameter: 测定活细胞平均直径[μm]
Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值
Dead Cell Conc.: 死细胞浓度[×105/mL]
Viable Cell Count: 测定活细胞数
Dead Cell Count: 测定死细胞数

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