实验氨基酸分析仪的实验步骤:
1、开机篇
(1)打开电脑主机电源,以windows的系统进入。打开仪器主机电源。
(2)打开电脑上相匹配的软件EZ Chrom,右击L-8900,再点击open。
(3)到达软件界面后,选connect,界面上的灯全亮了表示连接成功。打开左上角的OPTION,点击泵1中的Purge,将B1至B4的Buffer设置为25%,再点击Start,打开泵1的阀门。点击泵2中的Purge,泵2的Buffer从B1至B3设置为33%,点击Start。打开泵2的阀门。检查泵2的导管中是否有气泡出来,没有则先关泵2再关泵1。
(4)点击L-8900,将泵1流速设置为0.2ml/min,打开泵1 ;设泵2的流速为0.15ml/min,同时设置R1∶R2∶R3=0∶0∶1OO,打开泵2。观察泵1的压强是否有变化,如果没有变化,则分别增加流速直至压强有变化,此时泵1流速为哦0.4ml/min,泵2流速为0.35ml/min。
(5)点击Sample Wash 进行自动进样清洗,再点击Pump Wash 进行对泵的清洗。点击Colu
m Oven(柱温),将其温度设置为57℃。点击Reactor Healer(反应器升温),设置为135℃,等Reactor(反应柱)到达100℃时改变泵2的Buffer的比例,改为R1∶R2∶R3=50∶50∶0。
(6)关闭泵2,关闭泵1。
2、采样篇
(1)点击界面上左上角的File,点击method,再点击open,打开PH.。打开后点击File,点击method,再点击save。
(2)组建序列:点击File,点击Sequence(序列),再点击Sequence Wizard(序列向导),到了一个框界面,点击For Acquisition ,进行下一步,点击Simple ID(样品名字),选取Date And Time。设置保存路径。点击Data(数据名称),选Simple ID。设置未知样个数为2个,重复进样数为1次,点击下一步。设置未知样从编号192开始,标样从编号191开始,设置体积为20ul,点击下一步。设置标准样个数为1个,重复进样一次,体积为20ul,点击下一步,完成。
(3)点击表格的第一行,插入一行,用来将柱延伸。点击Run Type(运行类型),在其框中选清除所有数据一栏;点击Reps,重复数设置为1;点击Vial(位置)设置为3;点击Volume(体积)设置为0;点击Method点击PH.4.6X60-2622(RG).met,进行保存;点击Control,点Sequence run(序列运行),点击Start,到135℃时将会自动运行。
3、数据处理篇
(1)右击L-8900,打开Open offline(离线分析)。
(2)点击File,再method,点open,打开PH.。reactor软件
(3)点击File,再Data,点open,标准数据打开。右击界面空白处,点击Annotations,其中的Area可调节你所要的数据以及美化图面;点击Method,再点击Peaks/Groups,检测保留时间与出峰时间是否对得上,在其中的点击Integration Events(积分事件),可在框内通过设置峰宽、静止、入门的手段来美化图面,便于分析。
(4)进行保存工作。
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