病理科免疫组化在临床上的应用及其意义
免疫组化技术是以免疫学的抗原抗体反应为其理论基础发展起来的一门方法学，在生物学领域尤其是在医学的基础和临床研究中发挥重要的作用，对疾病尤其是肿瘤的诊断、鉴别诊断及发病机制的研究提供了强有力的手段。免疫组化技术是20世纪70年代初Sterb Berger在酶标法的基础上发明的，80年代在外国开始应用于临床研究和诊断，90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例的诊断和鉴别诊断。随着新技术的不断发展，抗体种类从研发开始的十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研的各个领域，我国在临床病理诊断上可用抗体293种。由于抗体较昂贵，所以各院根据活检量和病种不同选择不同的抗体，这些抗体对大部分疑难病例的诊断起到重要的辅助作用。对病人的预后及指导具有重要的意义。
一、目前常用的抗体分四大类
1．上皮性标记物：CK high（AE3）， CK low ，CK—pan，CK19,CK7, CK20，EMA，CEA，-CA15-3，SCLC ， E－Caldeherin, CA125， Tg（甲状腺球蛋白） ，TTF-1
AFP.这些抗体阳性，表明肿瘤组织起源于上皮组织，如果是恶性肿瘤，就是癌
2．间叶组织标记物:SMA ，Desmin,Vimentin， Lysozyme， AACT , CD68 MyoD1，CD117，
免疫组化技术是以免疫学的抗原抗体反应为其理论基础发展起来的一门方法学，在生物学领域尤其是在医学的基础和临床研究中发挥重要的作用，对疾病尤其是肿瘤的诊断、鉴别诊断及发病机制的研究提供了强有力的手段。免疫组化技术是20世纪70年代初Sterb Berger在酶标法的基础上发明的，80年代在外国开始应用于临床研究和诊断，90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例的诊断和鉴别诊断。随着新技术的不断发展，抗体种类从研发开始的十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研的各个领域，我国在临床病理诊断上可用抗体293种。由于抗体较昂贵，所以各院根据活检量和病种不同选择不同的抗体，这些抗体对大部分疑难病例的诊断起到重要的辅助作用。对病人的预后及指导具有重要的意义。
一、目前常用的抗体分四大类
1．上皮性标记物：CK high（AE3）， CK low ，CK—pan，CK19,CK7, CK20，EMA，CEA，-CA15-3，SCLC ， E－Caldeherin, CA125， Tg（甲状腺球蛋白） ，TTF-1
AFP.这些抗体阳性，表明肿瘤组织起源于上皮组织，如果是恶性肿瘤，就是癌
2．间叶组织标记物:SMA ，Desmin,Vimentin， Lysozyme， AACT , CD68 MyoD1，CD117，
这些抗体阳性，表明肿瘤组织起源于间叶组织，如果是恶性肿瘤，就是肉瘤。
3．神经及神经内分泌标记物：CgA ，Synaptophysin，NSE，S—100：NF （神经纤维丝蛋白），GFAP，CD99，CD56.
4淋巴细胞标志物：
T cell标记物： CD3, CD45RO , CD43， CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB ， CD56 .
B cell标记物：CD-20 ，CD79a ,CD23， CD10 ， Kappa ,Lambda CD21 CD38 ,CyclinD1 ,Bcl—2。
其它:LCA，CD15,CD30，MPO ，CD34，TdT，这些抗体用于淋巴瘤33个亚型的诊断和鉴别诊断。
二、 目前开展的系列检查和意义
1。乳腺癌五项（ER、PR、C-erbB-2（Her—2）、Ki-67、P53）
ER、PR阳性，90％的病人对三苯氧胺类药物疗效好。 C-erbB-2阳性（2+－3+)可服用抗Her—2基因药物.如果ER和PR均阴性，C－erbB－2强阳性预示预后不好。
Ki—67是细胞生长指数,代表细胞周期中除G0期以外的细胞生长速度。Ki—67值越高表明肿
3．神经及神经内分泌标记物：CgA ，Synaptophysin，NSE，S—100：NF （神经纤维丝蛋白），GFAP，CD99，CD56.
4淋巴细胞标志物：
T cell标记物： CD3, CD45RO , CD43， CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB ， CD56 .
B cell标记物：CD-20 ，CD79a ,CD23， CD10 ， Kappa ,Lambda CD21 CD38 ,CyclinD1 ,Bcl—2。
其它:LCA，CD15,CD30，MPO ，CD34，TdT，这些抗体用于淋巴瘤33个亚型的诊断和鉴别诊断。
二、 目前开展的系列检查和意义
1。乳腺癌五项（ER、PR、C-erbB-2（Her—2）、Ki-67、P53）
ER、PR阳性，90％的病人对三苯氧胺类药物疗效好。 C-erbB-2阳性（2+－3+)可服用抗Her—2基因药物.如果ER和PR均阴性，C－erbB－2强阳性预示预后不好。
Ki—67是细胞生长指数,代表细胞周期中除G0期以外的细胞生长速度。Ki—67值越高表明肿
瘤细胞生长越快，预后越不好。P53是广谱致癌基因，在许多肿瘤中都有表达，表达值越高预后越不好。据报道,国际上目前有抗P53基因阳性的药物用于肿瘤。
2.垂体腺瘤功能六项检查
LH( 促黄体生成素），FSH（卵泡刺激素），ACTH（促肾上腺皮质激素 ），TSH（ 促甲状腺素），PRL（泌乳素 )GH（生长激素 ) .根据某一种抗体阳性表达进行术后药物。
3.恶性肿瘤的Ki-67和P53常规检查
目前的研究表明,大部肿瘤的复发、转移取决于Ki-67值和P53值,而与肿瘤的组织的分型关系不是十分密切,如中分化腺癌，如果Ki—67和P53值超过50%，预后不佳,相反，如肿瘤的组织分型为低分化腺癌，而Ki—67和P53值较低，预后也会较中分化或高分化癌的预后稍好.
4。GIST(胃肠道间质瘤)和EGIST（胃肠道外间质瘤）的诊断
GIST是90年代新发现的肿瘤，过去均诊断为平滑肌瘤或平滑肌肉瘤，现在经过一组免疫组化可将其诊断,GIST的生物学形为一般无良性，因为小于2cm的GIST偶而也有转移。其良恶性程度取决于肿瘤的大小和核分裂像，国际确定GIST侵袭行为危险性的推荐方案如下：
vim命令的作用是危险程度 大小 核分裂数
很低 <2cm <5/50HPF
2.垂体腺瘤功能六项检查
LH( 促黄体生成素），FSH（卵泡刺激素），ACTH（促肾上腺皮质激素 ），TSH（ 促甲状腺素），PRL（泌乳素 )GH（生长激素 ) .根据某一种抗体阳性表达进行术后药物。
3.恶性肿瘤的Ki-67和P53常规检查
目前的研究表明,大部肿瘤的复发、转移取决于Ki-67值和P53值,而与肿瘤的组织的分型关系不是十分密切,如中分化腺癌，如果Ki—67和P53值超过50%，预后不佳,相反，如肿瘤的组织分型为低分化腺癌，而Ki—67和P53值较低，预后也会较中分化或高分化癌的预后稍好.
4。GIST(胃肠道间质瘤)和EGIST（胃肠道外间质瘤）的诊断
GIST是90年代新发现的肿瘤，过去均诊断为平滑肌瘤或平滑肌肉瘤，现在经过一组免疫组化可将其诊断,GIST的生物学形为一般无良性，因为小于2cm的GIST偶而也有转移。其良恶性程度取决于肿瘤的大小和核分裂像，国际确定GIST侵袭行为危险性的推荐方案如下：
vim命令的作用是危险程度 大小 核分裂数
很低 <2cm <5/50HPF
低 2-5cm 〈5/50HPF
中等 <5cm5—10cm 6-10/50HPF<5/50HPF
高 >5cm>10cm不计 >5/50HPF不计〉10/50HPF
GIST的免疫组化结果为：CD117（+）、CD34（±）、S-100（±)Actin（±）、Desmin(-)。CD117阳性可用格林卫,且效果较好。
5。淋巴瘤的WHO分型
淋巴瘤WHO最新分型有33个亚型,每个亚型的预后和方案均有所不同，而淋巴瘤的诊断和分型又是极其困难的,是病理中的难中之难，“没有一个病理学家不在淋巴瘤上犯错误”这是我国一位病理名家说得话，美国的淋巴瘤误诊率为33%,所以诊断淋巴瘤的免疫组化方案必须“双份套餐式”的，即每一种组织的标记物必须用2种以上的抗体，如我们诊断B细胞淋巴瘤，必须有CD20和CD79a阳性正面证实，同时还需要用CD3阴性反面来证实,因此诊断淋巴瘤需8-10种左右的抗体，才能准确地反应出淋巴瘤各种亚型的信息.
三、免疫组化在肿瘤靶向中的作用
1。目前肿瘤的靶向已经引起人们的重视,许多靶向药物逐渐应用于临床。第一个靶
中等 <5cm5—10cm 6-10/50HPF<5/50HPF
高 >5cm>10cm不计 >5/50HPF不计〉10/50HPF
GIST的免疫组化结果为：CD117（+）、CD34（±）、S-100（±)Actin（±）、Desmin(-)。CD117阳性可用格林卫,且效果较好。
5。淋巴瘤的WHO分型
淋巴瘤WHO最新分型有33个亚型,每个亚型的预后和方案均有所不同，而淋巴瘤的诊断和分型又是极其困难的,是病理中的难中之难，“没有一个病理学家不在淋巴瘤上犯错误”这是我国一位病理名家说得话，美国的淋巴瘤误诊率为33%,所以诊断淋巴瘤的免疫组化方案必须“双份套餐式”的，即每一种组织的标记物必须用2种以上的抗体，如我们诊断B细胞淋巴瘤，必须有CD20和CD79a阳性正面证实，同时还需要用CD3阴性反面来证实,因此诊断淋巴瘤需8-10种左右的抗体，才能准确地反应出淋巴瘤各种亚型的信息.
三、免疫组化在肿瘤靶向中的作用
1。目前肿瘤的靶向已经引起人们的重视,许多靶向药物逐渐应用于临床。第一个靶
向的药物是淋巴瘤的抗CD20嵌和性抗体是Rituxan。抗肿瘤单抗偶联物Zevalin（Ibritumomab tiuxetan）用于Rituxan无效或复发的低度恶性B细胞瘤.
2。抗血管内皮生长因子（VEGF）重组人源化单抗Avastin(Bevacizumab)有抗肿瘤内新生血管形成作用,最近被批准为转移性结直肠癌的一线药物。
3。抗表皮生长因子受体（EGFR）嵌合性单抗Erbitux(Cetuximab）用于标准化疗无效,且EGFR阳性的转移性结直肠癌。
4。抗C－kit(CD117)的药物格林卫对大部分GIST有明显的疗效。
5．Herceptin是一种人源化单抗用于Her-2高表达的乳腺癌和其它实体瘤如卵巢癌、前列腺癌和非小细胞肺癌。
因为有了这些靶向药物的,因此在病理上检测这些靶基因的表达对于指导临床用药非常有意义。
2。抗血管内皮生长因子（VEGF）重组人源化单抗Avastin(Bevacizumab)有抗肿瘤内新生血管形成作用,最近被批准为转移性结直肠癌的一线药物。
3。抗表皮生长因子受体（EGFR）嵌合性单抗Erbitux(Cetuximab）用于标准化疗无效,且EGFR阳性的转移性结直肠癌。
4。抗C－kit(CD117)的药物格林卫对大部分GIST有明显的疗效。
5．Herceptin是一种人源化单抗用于Her-2高表达的乳腺癌和其它实体瘤如卵巢癌、前列腺癌和非小细胞肺癌。
因为有了这些靶向药物的,因此在病理上检测这些靶基因的表达对于指导临床用药非常有意义。
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