大鼠骨髓内皮祖细胞SPIO标记及检测
作者:崔碧 李健丁 张瑞平
来源:《中国医药导报》2011年第09期
[摘要] 目的:研究大鼠骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCS)的分离、培养、SPIO标记,SPIO对EPCS的标记效果及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响,为进一步的实验研究奠定基础。方法:SD大鼠体重120~150 g,采用梯度密度离心法和贴壁法获取大鼠EPCS,采用25 μg/ml SPIO对其标记,比较标记和未标记的EPCS。普鲁士蓝染观察铁标记率,台盼蓝检测细胞活力,MTT法检测细胞增殖力,Calcein-AM/PI染检测细胞活性及细胞膜完整性,AO/PI染检测细胞凋亡率。结果:分离培养EPCS 7~10 d,细胞集落相互连接,呈典型的铺路石样外观。普鲁士兰染显示SPIO(25 μg/ml,24 h)对细胞的标记率接近94%;比较SPIO标记及未标记的EPCS,细胞活力分别为(94.34±0.25)%和(95.33±0.31)%;MTT法检测两组间相比差异无统计意学义(P>0.05);Calcein-AM/PI染检测细胞的活性和膜完整性,存活率分别为96%和97%;AO/PI染两组细胞的凋亡率均为5%。结论:采用梯度离心法从骨髓中分离单个核细胞,经诱导培养可实现内皮祖细胞的
proliferation分离培养。25 μg/ml浓度的SPIO细胞标记率高,对细胞毒性小,且不影响EPCS的活力、增殖及凋亡。
[关键词] 内皮祖细胞;骨髓;超顺磁性氧化铁颗粒;标记
[中图分类号] R73-351[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2011)03(c)-033-04
Rat bone endothelial progenitor cells labeled with superparamagnetic iron oxide particles and the detection
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