核酸检测结果为什么要等这么久?
为什么做一次核酸检测需要这么久?
现阶段,整个核酸检测流程大致分为:核酸检测标本采集;标本收集及转运;实验室检测;报告结果等四个阶段。
一、核酸检测标本采集
当采样护士说:“啊~~~出声的一刻开始”整个核酸检测流程就开始了。标本采集要求一人一手消毒或更换手套。采集标准要求:咽拭子划过 咽后壁 2-3秒以及 双侧扁桃体 ,这也是为什么很多人都会感到恶心,具体恶心程度请参照喝酒催吐。
二、标本收集及转运
因为核酸检测场地对于环境要求比较严格,常为独立实验室。所以一般设立采样点的地方和做检测的地方不在同一地址,所以样本转运人员定时对各个采样点的标本统一送到核酸检测实验室。所以我们到医院采集的标本并不是马上就能到达实验室进行检测。
三、实验室检测
当标本送达实验室后,检测流程开始,也是整个核酸检测流程中最耗费时间的环节。
检测环境要求: 负10 —负15pa,恒温恒湿,实验室内无核酸污染。
检测人员要求:穿着二级防护。(就是我们常说的:大白)
标本到达实验室后,对样本表面消毒,进行样本录入,然后编号,保证人员、标本、样本号的一致性和唯一性。
1、扩增体系配制
核酸检测反应需要反应环境,将试剂按照说明书的比例混合,并按照每份20μL的量准确分装至八连管的每个孔位中。(一般每次分装一整版进行上机检测,96份)
八连管大致长这样
工作人员在加样
2、样本核酸提取
吸取将待检测样本200μL准确的加入96孔板,上机器进行提取核酸。
96孔板大致长这样,每孔加入一份样品
新冠病毒是由蛋白质外壳和RNA组成,提取核酸的目的是破坏蛋白质外壳,暴露其中的RNA,分离蛋白质外壳与RNA,并对分离的RNA进行纯化和浓缩。
各类提取仪
3、核酸转移
提取完核酸后,96孔板中,每个孔内约有15μL的样本,吸取其中的5μL样本到分装好体系的八连管中,设好阴性、阳性、质控、空白孔位,盖好管盖,离心后保证无气泡。
待扩增管中含有:20μL体系+5μL核酸样本
4、扩增
核酸检测中的主要环节,由PCR仪完成,通过聚合酶链式反应,使样本中微量的核酸片段呈指数增长复制。通过样本中是否有隶属于新冠病毒的:开放读码框1ab(Open Reading Frame, ORF1ab) 和 核壳蛋白(nucleocapsid protein,N)基因来确定样本中是否有新冠病毒。
扩增仪
四、报告结果
对扩增结果进行分析,判断是否有阳性或需要复查的标本,并进行结果的上报。
其中:提取核酸:23-36分钟。扩增:70-90分钟。其他项目时间取决于操作者的手速。
整个流程视标本量而定,一般都需要4个小时左右的时间。 这里也说一下检验科检测标本的来源也是有先后顺序的,首先检测发热门诊,急诊患者的标本,然后是普通就诊患者的标本,一般最后检测社区筛查的标本。
PS:不同品牌试剂和仪器,效率和时间也不一样。
例如:
核酸提取仪中:某96通量核酸提取仪约23分钟提取96份样本;另一32通量核酸提取仪约15分钟提取32份样本。
扩增仪中:某试剂一次扩增时间约为1小时08分钟;另一试剂一次扩增时间约为1小时28分钟。
总的来说,加快核酸检测报告的出具时间只有增加工作人员,增加设备,核定好检测量,避免标本积压。
但就目前部分省、市的核酸检测实验室配备以及所需核酸检测的人来说,大部分核酸实验室基本处于满负荷运行的状态,所以才会出现核酸检测结果滞后的问题。
附核酸实验室检测流程图核酸检测结果阳性参考值阴性
写在最后:每个人都希望能够尽早的拿到核酸检测结果,但受限于各种原因导致不能在期望的时间内收到结果,还希望大家能够对医务人员多多包容,因为他们已经在很努力的出结果了,戴着N95口罩在负压实验室环境中工作,就连呼吸都是一件很难受的事情。
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