新型冠状病毒抗原检测胶体金法与核酸检测实时荧光RT-PCR方法比较分析
【摘要】目的：分析新型冠状病毒抗原检测胶体金法与核酸检测实时荧光RT-PCR方法比较。方法：选取新冠阳性和新冠阴性的咽拭子各100份，时间为2022年11月-2022年12月。分别采用胶体金法和RT-PCR法检测。对比两种方法的检测结果。结果：核酸检测阳性的100例样本中，胶体金法检出阳性99例、阴性1例；核酸检测阴性的100例样本中，胶体金法检出阳性0例、阴性100例。以核酸检测结果为金标准，胶体金法抗原检测阳性符合率为99.00%、阴性符合率为100.00%、总符合率为99.50%。结论：在新型冠状病毒检测过程中，可采取抗原检测胶体金法，能够达到较高的准确率。
【关键词】新型冠状病毒；抗原检测；胶体金法；核酸检测；实时荧光RT-PCR法
近几年，新型冠状病毒肺炎在全世界范围内广泛流行，对公众卫生健康造成了严重的威胁。为了更好的控制和预防，需要对新冠病毒进行快速、准确的检测。目前最常用的方法是核酸检测实时荧光RT-PCR法，但要求有专业的仪器、试剂、人员、实验室等，检测结果获取时间较长[1]。而抗原检测胶体金法主要是对新冠病毒中的蛋白进行检测，对实验仪器和条件没有要求，可在几分钟内快速得出结果。基于此，本文选取新冠阳性和新冠阴性的咽拭子各100份，时间
为2022年11月-2022年12月，分析了新型冠状病毒抗原检测胶体金法与核酸检测实时荧光RT-PCR方法比较。
1资料与方法
1.1一般资料
选取采集时放在病毒保存液里面灭活后的新冠阳性和新冠阴性的咽拭子各100份，时间为2022年11月-2022年12月。所有标本均来自于新冠肺炎监测系统，储存和运输均严格按照标准执行。
1.2方法
先对标本进行RNA提取操作。根据相关技术标准指南规定严格操作，将样本按照使用说明书用上海之江核酸提取试剂盒进行核酸提取。
对样本进行RT-PCR核酸检测。使用新型冠状病毒专用核酸检测试剂盒，利用荧光PCR法，对病毒中的特定基因片段进行检测。按照要求配置反应体系，使用RNA5微升、反应液20微
升，设置阳性对照和阴性对照以及质控。使用实时荧光定量PCR检测仪，反应条件为：45摄氏度10分钟，1个循环；95摄氏度1分钟，1个循环；95℃15秒，58℃30秒，45个循环，对荧光信号进行收集。如果阳性对照和阴性对照结果均为正常，且Ct值在40以下，证明结果为阳性。
对样本进行胶体金法抗原检测，使用新型冠状病毒专用抗原检测试剂盒进行检测。取样本80微升，加入保存液，混合均匀后，在检测孔内滴入4滴。在15分钟内，观察质控线和检测线。在出现质控线后，说明试验结果成立，如果质控线和检测线同时出现，证明结果为阳性。
1.3评价指标
对比两种方法的检测结果。以核酸检测结果作为金标准，判断胶体金法检测的阳性符合率、阴性符合率、总符合率。
1.4统计学处理
数据应用SPSS20.0软件处理，以数或率、均数±标准差的方式，分别表示计数、计量资料，
并且使用x2、t分别检验，以P＜0.05，代表有显著差异。
2结果
2.1两种方法检测结果的比较
核酸检测阳性的100例样本中，胶体金法检出阳性99例、阴性1例；核酸检测阴性的100例样本中，胶体金法检出阳性0例、阴性100例。以核酸检测结果为金标准，胶体金法抗原检测阳性符合率为99.00%、阴性符合率为100.00%、总符合率为99.50%。
表1 两种方法检测结果的比较
咽拭子
核酸检测
合计
阳性
阴性
胶体金法
阳性
99
0
99
阴性
1
100
101
合计
100
100
200
3讨论
根据新冠肺炎病毒的防控标准，在确诊新冠病例的过程中，应当同时满足新冠疑似病例、核酸检测阳性的标准，或者是病毒基因检测和已知新冠病毒同源性很高，或是没有接种新冠疫苗，但新冠特异性IgG、IgM抗体为阳性。当前明确新冠病毒感染最准确的方法就是核酸检测，该方法主要是对新冠病毒遗传物质RNA进行检测，当出现阳性检测结果，基本可以直接确诊，在检测的灵敏度、特异度方面，比其它方法更高。在核酸检测中，主要使用实时荧光RT-PCR法，该方法也是当前新冠肺炎确诊的金标准[2]。不过，这种方法在实际应用中也有一定的不足，例如在前期样本处理到得出检测结果之间，至少需要4至6个小时，并且可能存在假阴性。如果标本的采集、存储、运输不当，使用的标本类型不同，或在不排毒时期、不同厂家试剂等因素的影响下，核酸检测都可能会出现假阴性的结果，导致漏诊的发生。
在其它检测方法上，抗体检测主要是检测患者体内免疫系统应对新冠病毒感染而产生的抗体，但是需要血清学检测方法。而在全员核酸检测中，大规模筛查方法下，血清学实验并不合适。而抗原检测胶体金法主要是对样本新冠病毒中一种蛋白进行检测，利用双抗体夹心法，通过固相免疫层析的方式进行检测。待检样本抗原和标记物垫上的抗体相结合，形成胶
体金标记抗体-抗原复合物[3]。当其持续扩散到检测线（T线）和质控线（C线），说明反应过程完成。当T线和C线同时出现变红，则说明检测结果为阳性，很可能代表新冠病毒确诊。有研究显示，新冠病毒抗原检测胶体金法的敏感度、特异度都能达到95%以上，同时不会和其它呼吸道病原产生交叉反应，所以可作为核酸检测补充方法进行早期筛查，应用价值较高。
综上所述，在新型冠状病毒检测过程中，可采取抗原检测胶体金法，能够达到较高的准确率。
【参考文献】
[1]郭晓波,蔺京,来春艳,等.新型冠状病毒与实时荧光RT-PCR核酸检测[J].陕西医学杂志,2020,14(3):306-308.
[2]蔡伟,吴啸天,薛建江.1例临床表现不典型COVID-19患者新型冠状病毒特异性抗体检测的临床意义[J].国际检验医学杂志,2020,41(20):2554-2556.
[3]曾希鹏,谢朝梅,邓海斌,等.胶体金法与荧光免疫层析法检测新型冠状病毒特异性IgM和IgG
的比较分析[J].实用预防医学,2021,37(26):151-153.核酸检测结果阳性参考值阴性

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