1、分子生物学：是在分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动以及规律的一门新兴学科，核酸和蛋白质为主要研究对象，分子生物、分子免疫、神经生物是三大前沿学科。
主要研究内容：a 核酸的分子生物学；b 蛋白质的分子生物学；c 细胞信号传导的分子生物学。
2、分子生物学在医学上的应用体现在：a 人体发育调控和人体功能调控的研究；b 基因与疾病；c 生物工程和生物制药；d 预防医学（疫苗的研究和环境监测与净化）；e 分子生物学促进中医药研究（中医基础理论的研究、中药研究的作用）。
3、一些基本概念：
a 基因：贮存RNA序列信息和有功能的蛋白质多肽链序列信息，以及表达这些信息所必须的全部核苷酸序列，是DNA、RNA中贮存遗传信息的单位
b 基因组：细胞或生物体中一套完整的遗传物质。
c 内含子：不携带遗传信息，被剪切掉不保留在成熟mRNA分子的DNA序列
d 外显子：结构基因中携带遗传信息，被保留在成熟mRNA分子的DNA序列
e 单顺反子：一条mRNA携带一个基因的遗传信息，可以表达出一种蛋白质。
f 多顺反子：一条mRNA携带多个基因的遗传信息，可转录出多种功能不同蛋白质。
4、病毒基因组的结构特征：a 核酸种类和结构可以不同；b 大小差异较大；c 分子数不同；d 为单倍体，且基因不重复；e 基本都是编码序列；f 基因连续性不同；g 相关基因丛集成一个功能单位或转录单位；h 有些病毒都存在基因重叠现象。
5、原核生物基因组的结构特征：a 基因组通常由单一环状双链DNA分子组成；b 只有一个复制起点；c 基因组所含基因数较多，形成操纵分子结构；d 编码序列一般不重叠；e 基因是连续的，无内含子，转录后不需剪切；f 编码序列约占基因组的50%；g 非编码序列主要是一些调控序列；h 多拷贝基因很少；I 基因组中存在转座子；j 在DNA分子中存在各种特异序列。
6、真核生物基因组的结构特征：a 真核生物有完整的细胞核，核DNA和组蛋白、非组单板及RNA形成染体结构；b 每一种真核生物都有一定的染体数目，配子为单倍体外，体细
胞一般为双倍体；c 真核生物基因组有多个复制起点；d 真核基因的转录产物为单顺反子mRNA；e 真核生物基因组含大量重复序列；f 真核生物基因组的90%以上为非编码序列；g 真核生物因是断裂基因；h 存在各种基因家族；i 真核生物也存在转座子；j 基因组DNA为线性分子，其末端特殊序列成为端粒。
7、DNA多态性：同一物种不同个体之间的基因产物大多一致，但不同个体之间存在遗传差异，这种遗传差异可以孟德尔遗传方式遗传，这种差异称为DNA多态性。
    研究功能基因组学的常用技术：a 生物信息学；b 比较基因组学；c 结构基因组学；d 网 基因组学；e 整体生物学；f  DNA芯片；g 基因剔除；h 药物基因组学。
dna多态性8、蛋白质组：指一个基因、一个细胞或组织或一种生物体所表达的全部蛋白质。
  蛋白质组学：在整体水平上研究细胞内全部蛋白质的组成及其活动规律的学科。
9、酵母双杂交系统的组成：a 报告基因转录调控区；b 报告基因；c 一对可相互作用的杂交反式作用因子。
10、二维凝胶电泳的组成：由等电聚焦凝胶电泳IEF和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳组成。
机理：根据蛋白质的等电点不同而电泳至不同的PI点上而分离蛋白质→IEF。
SDS→根据蛋白质的大小不同而将蛋白质分开，分子越小，电泳越快。
11、蛋白质电泳的原理：蛋白质分子在溶解中由于其末端氨基，？ 基及侧链的    基因而称为带点颗粒，并可在电场内移动，其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷，不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的PH值、所带的静电荷昂同，被它们在电场中迁移率各异，从而达到分离的目的。
12、Westen的步骤：a 蛋白质样品的制备；b SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳；c 蛋白质的电转移；d 靶蛋白的免疫学检测。
13、阮病毒：一种不同于其它致病微生物，可引起一组人和动物神经退行性病变的病原体。（复制方式：自我复制）  引起人类的疾病有：纹状体脊髓变性病（CJD）、脑软化症（GSS）、死性家族性失眠（FFI）。
【14、什么是半保留复制？DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶作用下，按碱基互补的原则合成与其互补的新链，以组成新的DNA分子。这样新形成的两个DNA
分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。其中一股单链是从亲代完整地接受过来的，另一股单链完全是新合成的，故称为半保留复制。
15、何谓端粒？有何生理功能？端粒：指真核生物染体线性DNA分子末端的结构。生理功能：维持染体的稳定性；维持DNA复制的完整性。
16、端粒酶的组成：端粒酶、端粒酶协同蛋白、端粒酶逆转录酶。功能：合成端粒DNA。
17、逆转录：是以RNA为模板，以dNTP为原料，在逆转录的催化下合成DNA的过程。
逆转录的过程：RNA模板——（逆转录酶）——DNA-RNA杂化双链——（RNA酶）——单链DNA——（逆转录酶）——双链DNA。
意义：a 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论；b 补充完善了遗传的中心法则；c 基因工程获得目的基因；d 逆转录现象说明：至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。
18、DNA损伤的修复方式：光修复、切除修复（是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-polI和连接酶完成）、重组修复、SOS修复。
19、复制与逆转录的异同：
   
复制
转录
模板
两股链均复制
模板链转录（不对称转录）
原料
dNTP
NTP
酶
DNA聚合酶
RNA聚合酶（RNA-ployA）
产物
子代双链DNA（半保留复制）
mRNA、tRNA、rRNA
配对
A-T    G-C
A-U    T-A    G-C
20、mRNA的加工过程： 首、尾的修饰：a 加帽（可能是真核核糖体小亚基识别与结合位点，从而参与蛋白质合成的启动；可能阻止5’外切核酸酶对mRNA的降解，增加mRNA的稳定性）；b 加尾（参与mRNA向细胞质基质转运；阻止3’外切核酸酶对mRNA的降解，增加mRNA的稳定性）。】
14、简述乳糖操纵子的调节机制：a 阻遏蛋白的负性调节在没有乳糖存在时Lac操纵子处于遏制状态；b CAP的正性调节；c 协调调节：Lac阻遏蛋白负性调节与CAP正性调节两种机制协调合作。
15、顺式作用原件：是基因周围能与特异转录因子结合而影响转录的DNA序列、它包括启动子、增强子、沉寂子。
反式作用因子：指与DNA调控序列相互作用的蛋白质因子（调控蛋白）。
16、转录因子的分类、结构和功能：
A 分类：基本转录因子    特异转录因子
B 结构：DNA结合域：锌指  亮氨酸拉链    螺旋——环——螺旋。
        转录激活域：酸性激活域  谷氨酸胺富含域  脯氨酸富含域
        二聚体结构域
C 功能：a 具有三个功能结构域  b 能识别并结合顺式作用元件  c 对基因表达有正性调节和负性调节。
17、抑制基因的表达主要技术：反义核酸技术    核酸域脱氧核酸  小干扰RNA  微干扰RNA
18、反义核酸：是根据碱基互补原理设计的针对特靶序列的互补DNA或RNA片段，通过与特定靶序列结合，从而一直特定基因表达。
核酸：是一类具有催化作用的RNA分子，能够特异性地把剪切底物RNA或突变的RNA。
小RNA干扰：利用特定的小分子单链RNA与一条mRNA的互补区发生碱基配对从而阻遏这条mRNA的表达，把这条小分子的RNA成为小干扰RNA。
微RNA：是一组短小，一般为20~24个核苷酸组成，本身不具有开放阅读框架（没有mRNA作用，不能翻译），具有高度保守性、时序性和组织特异性的小分子RNA。
19、以肾上腺素为例叙述G蛋白受体接到的信号转导过程。
    肾上腺素与质膜上的受体结合后，通过激动型G蛋白AC激活，AC催化ATP生成cAMP，后
者能进一步激活PKA，PKA一方面使无活性的磷酸化酶激酶α，后者能催化磷酸化酶b修饰带上磷酸根成为有活性的磷酸化酶b。磷酸化酶激酶α经磷蛋白磷酸化酶去磷酸又转变成无活性的磷酸化酶b，磷蛋白磷酸酶的活性也受PKA的调节，磷酸化和脱磷酸化成对立统一关系，同时PKA也可使有活性的糖原合成酶的特定丝或苏氨酸残基磷酸化而失去活性。
20、概念：
受体：存在于靶细胞膜上货细胞内能特异识别结合信号分子、进而引起靶细胞生物学效应的物质。
信息物质：携带生物信息、调节细胞生命活动的化学物质。
第二信息：在细胞内传递信息的小分子化学物质（环核苷酸、脂类衍生物、无机物、糖类衍生物）
G蛋白：能与GTP或GDP结合的蛋白质称为GTP结合蛋白（G蛋白）
接头蛋白：在信号传导途径中引起连续作用的蛋白质。
21、受体的种类：
环状受体：配体依赖性离子通道，在神经冲动的快速传递中起作用。
G蛋白偶联受体（蛇形受体）：结构由一条多肽链组成。N-端位于细胞外区，C- 位于细胞内区，跨膜区由7个α螺旋结构组成。
单个跨膜α螺旋受体：结构：单体或寡聚体。  功能：与细胞生长及有丝分裂的调控有关。
具有鸟苷酸环化酶活性的受体：具有鸟苷酸环化酶活性的受体结构
22、受体作用的特点：a 高度的亲和力；b 高度的特异性；c 可透性；d 可饱和性；e 特定的作用方式。
23、列举G蛋白偶联受体介导的细胞信号转导途径：
a CAMP-蛋白激酶A途径
b 钙离子依赖性信息转导途径：信息转导途径的组成（激素、生长因子、神经递质）
24、癌基因：细胞内控制细胞生长和分化的基因，它的结构异常或表达异常可以引起细胞癌变。（分为病毒癌基因和细胞癌基因）。
抑癌基因：存在于正常细胞的一类可以抑制细胞过渡生长增殖从而抑制肿瘤的形成。
25、癌基因的活化机制：a 点突变；b 原癌基因扩增；c 获得启动子和增强子；d 基因错位或重排；e 基因偶联；f 甲基化程度降低。
26、P53蛋白主要功能：a 抑制细胞增殖、可阻断细胞进入S期。b 诱导细胞凋亡；c 与病毒癌蛋白结合，使其失去活性；d 促进DNA损伤的修复。
27、Rb蛋白功能：调节细胞周期，阻止细胞进入S期，停滞于GOGI控制细胞生长。
28、提取的核酸样品的完整性和纯度直接关系最后结果。鉴定技术：分光光度技术，凝胶电泳技术。
29、DNA纯度鉴定的方法分为：紫外分光光度法、荧光光度法。
30、为什么测定A260/A280 的比值判断是否有蛋白质污染？
因为核酸和蛋白质的吸光度有差别，核酸在A260下吸光最强，蛋白质在A280的条件下吸光最强。分别对核酸样本进行A260和A280的紫光照射下测得两种条件下的比值，当A260/A280 的比值为1.8时为纯DNA。当A260/A280的比值为2.0时为纯RNA，这样可以判断是否有蛋白质污染。

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