·论著·中国当代医药2019年7月第26卷第21期
子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)简称内异症，是育龄女性的常见病和多发病，严重干扰女性的生活和健康[1]。研究显示,EMT 可能和二恶英暴露有关[2-10]，但其具体机制不明,
过改变解毒代谢酶的表达参与EMT的发病[11]。
英的解毒代谢酶主要包括细胞素P450酶系和谷胱
GSTP1基因rs1695英危险因素间的交互作用在子宫内膜异位症
发病中的作用
刘娟陈灿明徐杨
江苏省扬州市妇幼保健院妇产科，江苏扬州225000
[摘要]目的探讨GSTP1基因rs1695位点多态性与暴露二恶英危险因素间的交互作用在子宫内膜异位症(EMT)发病中的作用。方法选择2016年12月~2019年1月因盆腔包块来扬州市妇幼保健院住院手术的患者，将手术病理确诊为EMT的25例患者作为病例组，将25例非EMT患者作为对照组。采用自制问卷进行环境流行病学调查，分析二恶英暴露与EMT的相关性。采用定量PCR为基础的高分辨率熔解曲线(HRM)法检测基因多态性，采用单纯病例研究方法将基因多态性与暴露二恶英的危险因素进行基因-环境交互作用分析。结果病例组中经常烧饭烧菜人数所占比例高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；但病例组中食用鸭蛋和鹌鹑蛋人数所占比例低于对照组(P<0.05)。经常烧饭烧菜与GSTP1313A/G基因突变型两者间具有协同交互作用(OR=3.44,95% CI=1.14~52.54)，与其他基因多态性间无交互作用。经常食用鸭蛋和鹌鹑蛋与各基因多态性均无交互作用。结论经常烧饭烧菜与GSTP1313A/G基因突变型对EMT发生存在正向交互作用。
[关键词]子宫内膜异位症；危险因素;GSTP1基因多态性；基因环境交互作用
[中图分类号]R711.71[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2019)7(c)-0004-05 Effect of interaction between GSTP1gene polymorphism and risk factors exposed dioxin in the pathogenesis of endometriosis
LIU Juan CHEN Can-ming XU Yang
Department of Obstetrics and Gynecology,Maternal and Child Health Hospital of Yangzhou City in Jiangsu Province, Yangzhou225000,China
[Abstract]Objective To explore the effect of interaction between GSTP1gene polymorphism and risk factors exposed dioxin in endometriosis pathogenesis.Methods From December2016to January2019,patients hospitalized for pelvic mass in Maternal and Child Health Hospital of Yangzhou City were selected,25patients diagnosed as EMT by opera⁃tion and pathology were selected as the case group,and25non-EMT patients were selected as the control group.The correlation between dioxin exposure and EMT was analyzed by self-designed environmental epidemiological investiga⁃tion questionnaire.High resolution melting(HRM)curve based on quantitative PCR was used to detect gene polymor⁃phism.The interactions between gene polymorphism and risk factors were analyzed based on the simple-case-study method.Results The number of people who cook regularly in the case group were significantly higher than that in the control group,with significant difference(P<0.05).However,the proportion of duck eggs and quail eggs eaten in the case group was lower than that in the control group(P<0.05).A synergistic interaction was detected between mutated GSTP1313A/G gene and cook regularly(OR=3.44,95%CI:1.14-52.54),while no interaction was found between cook⁃ing regularly and other gene polymorphisms.There were no interaction between eating duck and quail eggs regularly an
d gene polymorphisms.Conclusion The positive interaction between mutated GSTP1313A/G gene and cooking regularly may play a critic role in the pathogenesis of endometriosis.
[Key words]Endometriosis;Risk factors;GSTP1gene polymorphism;Gene-environment interaction
[基金项目]江苏省卫生计生委科研课题(Z201524)；江苏省
扬州市重点研发计划-社会发展项目(YZ2015053)
中国当代医药2019年7月第26卷第21期·论著·
甘肽转硫酶系(GST)，其基因多态性改变可能会增加机体对环境致病因素的敏感性，引发疾病[12-13]。GST中研究较多的是GSTM1、GSTT1和GSTP1，目前,GST基因多态性与EMT的关系仍存在争议[14]。此外,EMT病情复杂，单独环境暴露或遗传易感性均不能全面解释疾病的发生，现有研究多侧重于从遗传易感性角度入手[15]，忽略了疾病致病中基因-环境交互作用的复杂性。因此，本研究将探讨GSTP1基因rs1695位点多态
英的环境危险因素在EMT致病中的交互作用，旨在为EMT的预防和个体化提供理论依据。
1资料与方法
1.1一般资料
采用病例-对照研究，选取2016年12月~2019年1月在扬州市妇幼保健院经手术病理证实的25例卵巢EMT患者作为病例组，年龄23~53岁，平均(38.46±8.74)岁。选取同期因盆腔包块在扬州市妇幼保健院经手术病理证实为非EMT的25例患者作为对照组，年龄16~74岁，平均(39.96±18.68)岁。两组入组对象必须符合一般情况的均衡性，按1∶1比例配对。病例组纳入标准:①手术病理确诊为EMT;②临床病例资料完整。排除标准:①存在交流沟通障碍或精神疾病患者;②哺乳期;③拒绝参加临床调查者;④存在血缘或亲属关系。根据1997年美国生育学会(AFS)提出的“修正子宫内异位症分期法”对EMT进行分期[16]。两组的年龄、职业、生育史等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有参与研究的对象被告知研究目的并签署知情同意书。本研究方案经医院医学伦理委员会审查并通过。
1.2研究方法
1.2.1问卷调查
英暴露途径(呼吸暴露和食物暴露)制订结构式调查表，对病例组和对照组进行问卷调查。调查内容包括
临床资料(如姓名、年龄、月经史、有无痛经、孕产史、手术诊断、病理结果等)、吸烟饮酒、饮水饮食、居住环境(如居住所得附近有无废物处理中心，有无焚烧工厂发电厂等)、X线接触史、染发史、职业史、居室装潢史、家中是否经常使用的排油烟设备以及鱼、虾、乳制品摄入频次等。问卷中膳食摄入频率分为“经常吃”“偶尔吃”“从不吃”。至少1次/周为“经常吃”,1次/月归为“偶尔吃”，从来不吃定义为“从不吃”。
1.2.2GSTP1基因多态性检测抽取两组静脉血2ml，置于有乙二胺四乙酸二钠(EDTA)抗凝的5ml试管，用盐析法提取DNA，采用定量PCR为基础的高分辨率熔解曲线(high resolution melt,HRM)法检测GSTP1基因单核苷酸位点。
1.3统计学方法
采用SPSS18.0统计学软件进行数据处理，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，两组间比较采用t检验。病例组和对照组基因多态位点基因型频率分别行
Hardy-Weinberg平衡检验,P>0.05表示所选样本已达遗传平衡。计数资料以率表示，采用χ2检验或Fisher 确切概率法分析组间各基因型频率分布的差异，计算优势比(odds ratio,OR)及95%置信区间(95%confi⁃dence interval,95%CI)。用单纯病例研究方法，采用非条件Logistic多元回归模型中交互作用的相乘模型分析基因-环境之间的交互作用，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1暴露二恶英的环境危险因素在病例组和对照组中的分布
研究对象中近乎一半人数为职员(48.0%)，其他职业还包括教师、农民、服务人员、医护人员、个体、学生、退休和无业。两组的年龄、职业、生育和规律月经方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)。病例组中大部分患者为中重型,EMT分期Ⅲ~Ⅳ期为19例，占76.0%。病例组中经常烧饭烧菜人数所占比例高于对照组(72%vs.40%,P<0.05)。此外，病例组中经常食用鸭蛋和鹌鹑蛋人数所占比例低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组其余指标比较，差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。
2.2两组GSTP1基因型频率的比较
GSTP1基因rs1695位点的基因频率分布在病例组和对照组均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律，纳入样本符合人代表性。病例组和对照组中, GSTP1313A/G以基因型AA最常见,GG最少见，两组基因型分布的比较，差异无统计学意义(P>0.05)(表2)。
2.3恶英暴露的环境危险因素和GSTP1基因多态性在EMT发病中的交互作用
GSTP1313A/G基因突变型与经常烧饭烧菜两者间具有协同交互作用，与经常食用鸭蛋和鹌鹑蛋无交互作用(表3)。
3讨论
3.1暴露二恶英的环境危险因素与EMT
英是在废弃物焚烧、化工生产等过程中随废气和残渣排放的微量或痕量有机污染物，来源广泛。
英污染源如汽车尾气、燃烧废气等遍布在空气、土壤和水中，然后再污染动物、食物，这些被污染的动物、食物进入人体。人
英的方式95%是源于污染的膳食通过消
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两组暴露二恶
病例组对照组OR 值95%CI
P 值2525
15(60.0)15(60.0)Referent --
8(32.010(40.0)1.250.39~4.040.712(8.0)0(0.0)---10(40.0)10(40.0)
---
组别例数GSTP1313A/G(rs1695)基因型
AA
AG
GG
AG+GG 表2两组GSTP1基因型频率的比较[n (%)]
“-”表示无意义
经常烧饭烧菜经常食用鸭蛋经常食用鹌鹑蛋
302227
202823
3.440.850.60
1.14~5
2.540.45~10.050.59~26.97
0.0220.7260.782环境危险因素多态性的作用
GSTP1313A/G 基因型
AA AG+GG OR 值95%CI P 值
表3基因-环境在EMT 发病中的交互作用
化道吸收；其次是通过呼吸道和皮肤接触。本研究问
英的途径，涵盖了可能
英的危险因素，并比较这些危险因素在病例组和对照组中分布的差异，结果显示，经常烧饭烧菜的人数在EMT 病例组中所占比例显著高于对照组(72%vs .40%),
EMT
，其原因可能
英类样化合物有关,
英排放量的95%。英容易在乳汁、动物脂肪、
肉类以及海产品鱼虾体内蓄积，英通过这些食物链进入体内发挥毒性，产生疾病。本研究对膳食暴露情况进行评估，发现两组病例在奶制品以及鱼虾肉类等膳食摄入方面均无显著差异，与Porpora 等[17]的报道一致，分析其原因可能有以下两点:①研究对象居住地区环境污染不严重，膳食未被污染
，或其含量可能未超过安全水平，英污染方面的研究报道;②样本量小，导致统计学未发现显著差异。此外，本研究意外发现，和对照组相比,EMT 患者食用鸭蛋和鹌鹑蛋的人数明显减少，其具体原因不明，这些问题的阐明需要通过增加样本量进一步验证。3.2GSTP1基因多态性与EMT 的关系
GSTP1属于人类谷胱甘肽S-转移酶超基因家族
(GSTs)，和CYP1A1同属于解毒代谢酶。解毒代谢酶根据功能分为Ⅰ相代谢酶和Ⅱ相代谢酶。CYP1A1属
于Ⅰ相代谢酶，其主要功能是激活活化环境毒物并结合形成亲电子中间产物，呈现毒性。GSTP1属于Ⅱ
相代谢酶，其主要功能是将Ⅰ相代谢酶活化的毒物解毒，转化为无毒物质排出。正常情况下，外来毒物进入体内，被人体内Ⅱ相代谢酶代谢解毒，降低环境毒素,
但如果代谢酶的某个基因位点多态性，可能会造成酶活性降低或丧失，成为某种环境毒素诱发疾病的潜在病因，从而使机体对疾病的易感性增加。本研究结果显示,GSTP1313A/G 基因多态性在对照组和病例组分布无统计学差异，与疾病发生风险无关，与其他学者报道一致[11]。
3.3基因环境交互作用和EMT 的关系
关于EMT 的基因-环境交互作用国内未见报道。
意大利学者研究发现GSTP1基因多态性本身并不增
加EMT 疾病的发生风险，但对于血液中含有中高水平多氯联苯的人而言,GSTP1野生型基因(Ile/Ile)会显著增强其发生EMT 的风险[18]。
，经常烧饭烧菜可能是EMT 英的危险因素之一，将经常烧饭烧菜这一环境危险因素与GSTP1基因rs1695位点进行交互分析，发现GSTP1313A/G 突变基因型与经常烧饭烧菜(OR =3.44,95%CI =1.14~52.
54)呈正向交互作用，提示两者在EMT 的发病中可能起着协同作用，即如果两者同时存在时，发生
EMT 的概率将明显增加。
EMT 疾病复杂，其发病受多基因以及环境因素
交互作用影响。本研究样本量小
，所得结果需要通过扩大样本量进一步验证，英致EMT 发病机制的探索有重要价值，可以为未来更多研究提供参考。
[参考文献]
[1]李雷，冷金花.子宫内膜异位症相关生活质量的研究进展[J].中华医学杂志,2017,97(45):3593-3596.
[2]Smarr MM,Kannan K.Endocrine disrupting chemicals and endometriosis[J].Fertil Steril,2016,106(4):959-966.[3]Porpora MG,Ingelido AM,di Domenico A,et al .Increased levels of polychlorobiphenyls in Italian women with en⁃dometriosis[J].Chemosphere,2006,63(8):1361-1367.[4]D
e Felip E,Porpora MG,di Domenico A,et al .Dioxin -like compounds and endometriosis:a study on Italian and Bel⁃gian women of reproductive age[J].Toxicol Lett,2004,150(2):203-209.
[5]Caroline S,Hoffman MSPH,Chanley M.Endometriosis a⁃mong women exposed to polybrominated biphenyls [J].Ann Epidemiol,2007,17(7):503-510.
[6]Rier SE,Martin DC,Bowman RE,et al .Endometriosis in rhe⁃sus monkeys (Macaca mulatta)following chronic exposure to 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin[J].Fundam Appl Tox⁃icol,1993,21(4):433-441.[7]刘娟，任慕兰.环境激素二恶英与子宫内膜异位症[J].中国妇幼健康研究,2008,19(5):484-486.
(下转第23页)
(上接第7页)
[8]Wen X,Xiong Y,Qu X,et al.The risk of endometriosis after exposure to endocrine-disrupting chemicals:a meta-analysis of30epidemiology studies[J].Gynecol Endocrinol,2019,23: 1-6.
[9]陈苏，周子寒，阳晓敏，等.环境内分泌干扰物暴露与子宫内膜异位症[J].现代预防医学,2018,45(22):4058-4061.
[10]Huang Q,Chen Y,Chen Q,et al.Dioxin-like rather than non-dioxin-like PCBs promote the development of en⁃dometriosis through stimulation of endocrine-inflammation interactions[J].Arch Toxicol,2017,91(4):1915-1924.
[11]托娅，杨菁，陈秀娟，等.CYPl9A1、GSTM1、GSTT1和GSTP1
基因多态性与子宫内膜异位症患者发病的相关研究[J].
中华医学杂志,2019,99(7):515-519. [12]Guan L,Fan P,Liu X,et al.Association study between GSTT1 and GSTM1polymorphisms and risk of preeclampsia in Chinese population[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2016,204:31-35.
[13]Barbosa AM,de Souza SR,Frare AB,et al.Association of CYP1A1(cytochrome P450)MspI polymorphism in women with endometriosis[J].Genet Mol Res,2016,15(3):102-105[14]Hassani M,Saliminejad K,Heidarizadeh M,et al.Associa⁃tion study of Glutathione S-Transferase polymorphisms and risk of endometriosis in an Iranian population[J].Int J Re⁃prod Biomed(Yazd),2016,14(4):241-246. [15]曹现岭.子宫内膜异位症的遗传学发病机制研究进展[J].
国际生殖健康/计划生育杂志,2019,38(1):67-70,82.
[16]王媚.ASRM修正子宫内膜异位症分期法指导子宫内膜
异位症术后应用GnRH-a的临床研究[J].医学信息,2017, 30(16):50-51.
[17]Porpora MG,Medda E,Abballe A,et al.Endometriosis and organochlorinated environmental pollutants:a case-control study on Italian women of reproductive age[J].Environ Health Perspect,2009,117(7):1070-1075.
[18]Vichi S,Medda E,Ingelido AM,et al.Glutathione trans⁃ferase polymorphisms and risk of endometriosis associated with polychlorinated biphenyls exposure in Italian women: a gene-environment interaction[J].Fertil Steril,2012,97(5): 1143-1151,e1-e3.
(收稿日期:2019-06-14本文编辑：祁海文)
[参考文献]
[1]龚文玲，詹志来，江维克，等.天麻本草再考证[J].中国现代中药,2018,20(3):355.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社,2015:54.
[3]王锐，熊汝琴.4中天麻变型多糖的提取及含量测定[J].天津农业科学,2017,23(2):12.
[4]李燕，谢淼，邵明莎，等.近10年来天麻的药理作用及化学成分研究进展[J].中华中医药学刊,2017,35(12):2987.
[5]祝洪艳，张荻，周立梅，等.天麻苷元药理作用研究进展[J].上海中医药杂志,2018,52(2):114.
[6]赵颖，王忠刚，朱芳.超微粉碎技术的应用研究[J].广东饲料,2018,27(2):34.
[7]赵国巍，梁新丽，廖正根，等.超微粉碎技术对中药粉体性质的影响[J].世界中医药,2015,10(3):315. [8]高娜.超微粉碎技术在中药领域的应用研究[J].甘肃科技, 2015,31(22):104.
[9]陈良华.中药有效成分提取技术现状[J].中国民族民间医药,2014,15(3):14-16.[10]杨芝芳，邓薇，胡明勋，等.天麻杂交品种的性状显微特
征比较研究[J].中药与临床,2016,7(2):5. [11]宋忠兴，赵鹏，唐志书，等.4种中药微细粉体显微特征
及细胞破壁率的测定[J].中国现代中药,2017,19(2): 246.
[12]马福敏，刘玉玲.复合破壁方法对蜂花粉破壁率及其主
要功能性成分的影响[J].食品与发酵工业,2016,42(5): 184.
[13]宋忠兴，赵鹏，唐志书，等.4种中药微细粉体显微特征及
细胞破壁率的测定[J].中国现代中药,2017,19(2):246-249.
[14]吴传万，杜小凤，杨文飞，等.苦瓜破壁超微粉碎工艺优
化研究[J].中国农学通报,2014,30(3):265-270. [15]杜枚倩，邓红，冯伟勋，等.铁皮石斛破壁率与其多糖溶
出量的相关性研究[J].广东药科大学学报,2018,34(2): 137-141.
[16]李娟，麻晓雪，李顺祥，等.铁皮石斛超微粉碎破壁工艺
的优化[J].中国实验方剂学杂志,2014,20(7):30-33.
(收稿日期:2018-12-18本文编辑：祁海文)

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