・论善・ＪＭｅｄＲｅｓ，Ｄｅｃ２００７，Ｖ０１．３６Ｎｏ．１２
特种蛋白金标检测仪测定Ｃ一反应蛋白的评价
邵美娟倪莉郑雅琴
摘要目的对特种蛋白金标检测仪测定Ｃ一反应蛋白（ＣＲＰ）的结果进行评价及探讨其影响闪素。方法用特种蛋白金标检测仪检测血清ＣＲＰ，与ｌｍｍａｇｅ特定蛋白分析仪测定结果进行比较，并分析了该仪器的精密度、准确度和一些影响因素。结果该仪器测定血清ＣＲＰ线性范围可达１６０ｍｇ／Ｌ，批内、批间精密度分别为５．４％和６．８％，与Ｉｍｍａｇｅ特定蛋白分析仪测定结果比较，两者相关性好（ｒ＝０．９９７）。血细胞比容在０．３５～０．４５范围，全血与血清ＣＲＰ结果元差异（ｔ＝１．８２０，Ｐ＞０．０５）。结论
特种蛋白金标检测仪具有灵敏、准确、快速等特点，非常适合临床ＣＲＰ的监测。
关键词ｃ一反应蛋白胶体金双抗体夹心法免疫比浊法
ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｔｈｅＲｅｓｕｌｔｓｏｆＣ—ｒｅａｃｔｉｏｎＰｒｏｔｅｉｎＴｅｓｔｅｄｂｙＳｐｅｃｉｆｉｃＰｒｏｔｅｉｎＧｏｌｄＭｅａｓｕｒｉｎｇＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔ．ＳｈａｏＭｅＱｕａｎ，ＮｉＬｉ，ＺｈｅｎｇＹａｑｉｎ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄ
ｉｃｉｎｅ，ＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＷｅｎｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ３２５０２７，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ０ｂｊｅｃｔｉｖｅＥｖａｌｕａｔｉｏｎｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＣ—ｒｅａｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ（ＣＲＰ）ｔｅｓｔｅｄｂｙｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎｇｏｌｄｍｅａｓｕｒｉｎｇｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｎｄｓｔｕｄｙｔｈｅｉｒａｆｆｅｃｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＳｅｒｕｍＣＲＰｔｅｓｔｅｄｂｙｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎｇｏｌｄｍｅａｓｕｒｉｎｇｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，ｗｈｉｃｈｗａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｔｅｓｔｅｄｂｙＩｍｍａｇｅｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎａｎａｌｙｚｅｒ．ａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｔｈｅｐｒｅｃｉｓｉｏｎ、ａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｓｏｍｅｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆｓｅｌａ．１ｍＣＲＰｔｅｓｔｅｄｂｙｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎｇｏｌｄｍｅａｓｕｒｉｎｇｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｗａｓ１６０ｍｇ／Ｌ，ｔｈｅｖａｒｙｉｎｇｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓａｍｏｎｇｔｈｅｓａｍｅｂａｔｃｈａｎｄｄｉｆｆｅｒ—ｅｎｔｂａｔｃｈｅｓｗｅｒｅ５．４％ａｎｄ６．８％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｒｅｗａｓｇｏｏｄｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｔｅｓｔｅｄｂｙｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎｇｏｌｄｍｅａｓｕｒｉｎｇｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｎｄｌｍｍａｇｅｐｒｏｔｅｉｎａｎａｌｙｚｅｒ（ｒ＝０．９９７）．ＴｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅＣＲＰｏｆｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄａｎｄｓｅｒｕｍＣＲＰｉｆｔｈｅｈａｍａｔｏｃｒｉｔｗａｓ０
．３５～０．４５（ｔ＝１．８２０，尸＞０．０５）．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＳｐｅｃｉａｌｐｒｏｔｅｉｎｇｏｌｄｍｅａｓｕｒｉｎｇｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｈａｄｈｉｇｈｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｇｏｏｄａｃｃｕｒａｔｉｏｎａｎｄｓｐｅｅｄｉｎｅｓｓ，ｗｈｉｃｈｗａｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌＬＡＢｔｏｔｅｓｔＣＲＰ．
ＫｅｙｗｏｒｄｓＣ—ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ；Ｃｏｌｌｏｉｄａｌｇｏｌｄｄｏｕｂｌｅ—ａｎｔｉｂｏｄｙｓａｎｄｗｉｃｈ；ｌｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔ。ｙ
Ｃ一反应蛋白（ＣＲＰ）是一种经典的急性时相反应蛋白，在感染、炎症疾病、组织损伤、恶性肿瘤、手术创伤等情况下，几小时内迅速增多，病变好转时又迅速降至正常，并不受放疗、化疗、皮质激素影响。本文对特种蛋白金标检测仪与Ｉｍｍａｇｅ特定蛋白分析仪检测ＣＲＰ的结果进行了分析，同时探讨了使用特种蛋白金标检测仪检测ＣＲＰ时应注意的问题。报道如下。
材料与方法
１．仪器与试剂：欧洲挪威耐科明公司生产的ＮｙｃｏＣａｒｄＲｅａｄｅｒＩＩ多功能全定量金标检测仪及其配套试剂，采用胶体金双抗体夹心法检测ＣＲＰ；美国ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ公司的Ｉｍ—ｍａｇｅ特定蛋白分析仪及其配套试剂，采用免疫比浊法检测ＣＲＰ：ＳＹＳＭＥＸＫＸ２１血球计数仪。
２．标本来源：呼吸道感染、血液病、恶性肿瘤、败血症等住院患儿。
３．方法：（１）取同一瓶质控血清在特种蛋白金标检测仪进行批内、批间重复性试验。（２）收集上述患儿血清和全血共６８份，血清标本分别用特种蛋白金标检测仪和ｌｍｍａｇｅ特定
作者单位：３２５０２７温州医学院附属第二医院检验科・４０・蛋白分析仪检测血清ＣＲＰ，全血标本用特种蛋白金标检测仪检测全血ＣＲＰ，同时用ＳＹＳＭＥＸＫＸ２１血球计数仪测定血细胞比容。（３）取一高值ＣＲＰ血清标本（２２０ｍｇ／ｌ，）用不同倍数稀释后，在特种蛋白金标检测仪重复测定２次，取均值，然后进行实测值与理论值回归分析。（４）取３份全血标本在室温２０℃条件下，待反应完会后，分别在即刻（０ｍｉｎ）、２ｒａｉｎ、３ｍｉｎ、５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、２０ｒａｉｎ、２５ｒａｉｎ、３０ｒａｉｎ测定ＣＲＰ浓度。（５）取３份全血标本，在宰温２０℃条件下，取５“ｌ全血至缓冲液中混匀，分别放置Ｏｍｉｎ、５ｍｉｎ、ｌＯｍｉｎ、２０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、６０ｒａｉｎ、１２０ｍｉｎ后再检测全血ＣＲＰ浓度。
结果
１．精密度：同一瓶质控血清在特种蛋白金标检测仪上检测ＣＲＰ，其批内、批间精密度分别为５．４％和６．８％。
２．方法学比较：取６８份标本，分别用特种蛋白金标检测仪和Ｉｍｍａｇｅ特定蛋白分析仪检测血清ＣＲＰ，对两种方法测得结果进行配对ｔ检验，结果显示两种方法差异有统计学意义（ｔ＝３．２１９，Ｐ＜０．０１），但相关性好（ｒ＝０．９９７）。
３．线性范围：用检测仪对９个不同浓度的标本分
　万方数据
医学研究杂志２００７年１２月第３６卷第１２期
・论薯・男Ⅱ测定两次，取均值，结果见图１，提示全血ＣＲＰ浓度
在１６０ｍｇ／Ｌ范同内线性良好。
理论值（・ｈｇ／Ｌ｛
圈１ＣＲＰ测定线性围
４．血细胞比客对全血ＣＲＰ测定结果的影响：用特种蛋白金标检测仪对上述６８例病人分别测定全血ＣＲＰ和血清ＣＲＰ，所得结果根据血细胞比容分为３组（１组血细胞比容＜３５％，Ⅱ组血细胞比容
３５％一４５％。Ⅲ组血细胞比容＞４５％），每组分别对同一病人的全血和血清测定结果进行配对￡检验，结果见袁ｌ。
表１显示，血细胞比容＜３５％，全血与血清ＣＲＰ测定结果有显著性差异，全血ＣＡＰ测定结果明显高于血清（汪５０２３，Ｐ＜０ｏ¨。血细胞比窖在３５％～４５％时，全血与血清ＣＲＰ测定结果无显著性差异（￡＝１．８２０，Ｐ＞０．０５）。血细胞比弈＞４５％，仝血与血清ＣＲＰ测定结果有显著性差异，垒血ＣＲＰ测定结果明显低于血清（ｋ３６２１，Ｐ＜０．０１）。
裹ｌ３组病人全孟抽血清ｃＲＰ铡定结果比较（ｍ∥Ｌ
５不同反应时间对测定结果的影响：在室温２０％条件下，取３份垒血标本检测，待反应完全后，分别在即刻０ｍｉｎ、２ｒａｉｎ、３ｍｉｔｔ、５ｒａｉｎ、１０ｒａｉｎ、１５ｍｉｎ、２０ｒａｉｎ、２Ｓｔａｉｎ、３０ｒａｉｎ测定ＣＲＰ裱度。结果见图２。由图２可见。全血标本在反应完全后５ｍｉｎ内测得ＣＲＰ浓度基本稳定在同一水平上，随着测定时间的延长，结果逐渐升高，但在１５ｍＪｎ后叉开始下降。
６．全血标本加入缓冲液后，保存时闻对检测结果
囤２不同反应时间对ＣＲＰ结果的影响
的影响：取３份垒血标本，在室温２０℃条件下，分别取５Ｉ＾ｌ全血至缓冲液中混匀，放置（Ｉｍｉｎ、５ｒａｉｎ、１０ｒａｉｎ、２０ｒａｉｎ、３０ｒａｉｎ、６０ｍｈｉ、１２０ｍｉｎ检测ＣｌｉＰ浓度，结果ＪＩ也图３。由图３可见，全血标本在测定过程中ＣＲＰ浪厦基本稳定同一水平上，随着测定时闻的延长，结果无明显变化。
围３不同反应时闻对ＣＲＰ鳍果的影响
讨论
ＣＲＰ作为一种敏感的急性时相蛋白，近年来颇受临床关注“４１。ＣＲＰ是炎症过程中出现在血液中的一种非特异性的反应蛋白，当炎症发生及组织损伤时，ＣＲＰ浓度显著上升，并随病程变化。ＣＲＰ检禊ｆ可以作为细菌性感染和病毒性感染的鉴别诊断”１，ＣＲＰ的监测及动态分析，可指导抗生索应用，评估其疗效、指导疗程，有效缩短抗生素疗程，降低抗生索耐药发生率”’７。因此，ＣＲＰ监测具有重要意义，临床期盼有快速、定量、单独的测定方法及满足早期诊断和及时判断疗效的需要。
本研究显示，特种蛋白金标检测仪检测ＣＲＰ精密度好，结果可靠，与ｈｎｍａｇｅ特定蛋白分析仪比鞍相关性好。血细胞比容对全血ＣＲＰ结果有影响，对于血细胞比容超出０３５—０。４５，建议测定血清ＣＲＰ。另外，不同的反应时间，其测定结果有所不同，反应时间在５ｒａｉｎ内结果稳定，随着反应时问的延长，结果有
・４１－
毫喜掣蘑林
　万方数据
・论善・ＪＭｅｄＲｅｓ，Ｄｅｃ２００７，Ｖ０１．３６Ｎｏ．１２
逐渐升高的趋势，但在１５ｍｉｎ后又开始下降，故建议在
反应５ｍｉｎ内要上机检测。我们还发现，标本加入缓冲
液后保存１２０ｍｉｎ内结果稳定，说明可以批量检测来提
高工作效率。总之，特种蛋白金标检测仪具有快速、简
便等优点，总过程仅需２ｒａｉｎ，就可得到即时数据，以做
出对病人的及时判断。该仪器体积小，携带方便，仪器
运行稳定，适合于床边检测。可手指全血采样直接应
用，极为方便，也适合儿童患者ＣＲＰ的监测。
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（收稿：２００７—０５—１６）
基因扩增和３种表型筛查法检测耐甲氧
西林葡萄球菌的应用评价
杨锦红周义正朱敏敏李向阳
摘要目的比较４种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌（ＭＲＳ）的阳性检出率、灵敏度和特异度，以便临床检测ＭＲＳ时选择。方法用Ｖｉｔｅｋ一３２全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和ｍｅｃＡ基因检测法分别检测１７５株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄葡萄球菌（ＭＲＳＡ）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（ＭＲＣＮＳ），经行×列表资料的，检验比较阳性检出率，并以ｍｅｃＡ基因检测法为“金标准”计算其他３种方法的灵敏度和特异度。结果４种方法检出ＭＲＳＡ的阳性率无差别（ｚ２＝１．６４０，Ｐ＞０．０５），但检测ＭＲＣＮＳ的阳性率有差别（疋２＝９．４７８，Ｊｐ＜０．０５），其中Ｖｉｔｅｋ一３２全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出ＭＲＣＮＳ的阳性率高于ｍｅｃＡ基因检测法；３种表型检测法检测ＭＲＳＡ的灵敏度和特异度分别为１００％、９６．３％、９６．３％和８８．２％、１００％、１００％，检测ＭＲＣＮＳ的灵敏度均为１００％，特异度分别为５０％、４６．Ｉ％和６５．４％。结论最终判定ＭＲＳ时，要考虑到ｍｅｃＡ基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素，并区别对待ｍｅｃＡ基因介导的ＭＲＳ和非ｍｅｃＡ基因介
导的ＭＲＳ。
关键词耐甲氧西林葡萄球菌ｍｅｃＡ基因Ｖｉｔｅｋ一３２全自动细菌鉴定仪法苯唑西林琼脂稀释法头孢西丁纸片扩散法
ＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｅｃＡＧｅｎｅａｎｄＲｅｓｉｓｔａｎｃｅＰｈｅｎｏｔｙｐｅｉｎｔｈｅＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＭｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ—ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳｔｒａｉｎｓｏｆＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ．ＹａｎｇＪｉｎｈｏｎｇ，ＺｈｏｕＹｉｚｈｅｎｇ，ＺｈｕＭｉｎｍｉｎ，ＬｉＸｉａｎｇｙａｎｇ．２ｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＷｅｎｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ３２５０２７，Ｃｈｉｎａ
ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＩｎｏｒｄｅｒｔｏｃｈｏｏｓｅａｓｕｉｔａｂｌｅｍｅｔｈｏｄｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇＭＲＳ，ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆＶｉｔｅｋ一３２ａｕｔｏｍｉｅｒｏｂａｅｔｅｒｉａｉｎｄｅｎｔｉｔｙｓｙｓｔｅｍ，ｏｘａｃｉｌｌｉｎａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔ，ｅｅｆｏｘｉｔｉｎｄｉｓｋｄｉｆｆｕｓｉｏｎｔｅｓｔａｎｄＰＣＲｆｏｒｍｅｃＡｇｅｎｅａｒｅｅｖａｌｕａｔｅｄ．ＭｅｔｈｏｄｓＭＲＳＡａｎｄＭＲＣＮＳａｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｔｈｅｆｏｕｒｍｅ
ｔｈｏｄｓｍｅｔｉｏｎｅｄａｂｏｖｅｉｎ１７５ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ．ｔｈｅｎｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｐｏｓｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｂｙＣｈｉ—－ｓｑｕａｒｅｔｅｓｔａｎｄｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｔｈｅｏｔｈｅｒｔｈｒｅｅｍｅｔｈｏｄｓｂａｓｅｄｏｎＰＣＲｆｏｒｍｅｅＡｇｅｎｅａｓａｇｏｌｄｓｔａｎｄ・－ａｒｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｆｏｕｒｍｅｔｈｏｄｓｈａｖｅｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇＭＲＳＡ，ｂｕｔｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＶｉｔｅｋ一３２ａｕｔｏｍｉ－ｃｒｏｂａｃｔｅｒｉａｉｎｄｅｎｔｉｔｙｓｙｓｔｅｍａｎｄｏｘａｃｉｌｌｉｎａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔｉｓｂｅｔｔｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＰＣＲｆｏｒｍｅｃＡｇｅｎｅｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇＭＲＣＮＳ．ＳｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆＶｉｔｅｋ一３２ａｕｔｏｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉａｉｎｄｅｎｔｉｔｙｓｙｓｔｅｍ，ｏｘａｃｉｌｌｉｎａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔａｎｄｃｅｆｏｘｉｔｉｎｄｉｓｋｄｉｆｆｕｓｉｏｎｔｅｓｔｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇＭＲＳＡａｒｅ１００％、９６．３％、９６．３％ａｎｄ８８．２％、１００％、１００％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｄｅｔｅｃｔｉｎｇ
ＭＲＣＮＳａｒｅａｌｌ１００％，ｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆ作者单位：３２５０２７温州医学院附属第二医院检验科
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