第11卷 第12期 2009 年 12 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 11 No. 12 Dec .，2009
正常内皮细胞具有抗凝血、抗炎症和抑制血管
增生的功能，也能通过生成一氧化氮（NO）、前列环素和其他血管舒张物质促进血管舒张。许多疾病中，内皮细胞功能障碍是造成血栓形成，炎症和血管舒张功能丧失的共同病理基础。NO 生物利用率降低和活性氧（ROS）过量生成是导致内皮功能紊乱的一个重要因素。许多研究表明，内皮型一氧化氮合酶脱偶联(eNOS uncoupling)是导致NO 水平下降和氧自由基水平升高的重要机制，其中ROS 水平升高又是造成eNOS 脱偶联的主要原因。近年来，对ROS 的病理学作用有了更加深入的认识，ROS 生成和发挥作用都依赖于ROS 相关酶的表达和激活，生理条
件下，正常细胞含有大量的抗氧化物质防御ROS 的
毒性、减少ROS 的效应。ROS 在细胞内产生的位置和抗氧化酶的分布高度区域化，因此，细胞的还原－氧化状态是不均一的。例如，大部分ROS 的产生发生在细胞核、线粒体或者细胞膜上，ROS 对细胞的其他结构影响较小。抗氧化剂以非特异性方式对细胞内总体的还原－氧化平衡的变化进行干预。虽然这些方法的效果还存在争议。但是通过抑制ROS 合成特异性关键酶减少特定区域内的具体的ROS 可以减少氧化应激、逆转eNOS 脱偶联、进而改善血管内皮功能，为防治心血管疾病开辟新的途径。
内皮型一氧化氮合酶脱偶联与氧化应激
张洪平1，唐 宁1, 卞 卡1,2,3
（1.上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心，上海 201203；2.上海教委一氧化氮和炎症医学E-研究院，上海 201203；
3.美国德克萨斯大学休斯顿医学院综合生物及药理学系，德克萨斯大学分子医学研究所，美国 休斯顿 TX77030）摘 要：内皮细胞功能障碍是造成许多心脑血管疾病的共同病理基础。NO 利用率降低和活性氧（ROS）过量生成是导致内皮功能紊乱的一个重要因素。内皮型一氧化氮合酶脱偶联( eNOS uncoupling)是导致NO 水平下降和氧自由基水平升高的重要机制，其中ROS 水平升高又是造成eNOS 脱偶联的主要原因。随着对ROS 病理生理作用认识的不断深入，发现ROS 的生物学作用具有两面性，一方面ROS 与蛋白质、脂质、核酸等生物大分子反应，引发一些病理过程，另一方面ROS 通过不同的信
号途径对一些生理过程进行调控。该现象主要是由ROS 分布的区域化造成。通过抑制ROS 合成特异性关键酶减少特定区域内的具体的ROS 减少氧化应激、逆转eNOS 脱偶联、进而改善血管内皮功能，为防治心脑血管疾病提开辟新的途径。
关键词：一氧化氮；信号途径；氧化应激
中图分类号：R2-03 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2009) 12- 0036- 05收稿日期：2009-06-19基金项目：国家科技部“十一五”支撑计划资助项目（2006BAI11B08-03）；上海市科委基础研究重点项目（08430711300, 08DZ1972104）； 上海市教委高校一氧化氮与炎症医学E-研究院计划项目（E-04010）作者简介：张洪平（1978-），男，山东聊城人，博士研究生，研究方向：心血管药理学与炎症医学。通讯作者：卞卡（1958-），男，浙江杭州人，教授，博士生导师，博士，研究方向：心脑血管药理学与炎症医学。E-mail：Kabian3@gmail。
Endothelial Nitric Oxide Synthase Uncoupling And Oxidative Stress
ZHANG Hong-ping 1, TANG Ning
1, BIAN Ka 1, 2, 3
（1. Murad Research Institute for Modernized Chinese Medicine, Shanghai University of Traditional C
hinese Medicine, Shanghai 201203, China; 2. E-Institute of Shanghai Universities, Division of Nitric Oxide and Inflammatory Medicine, Shanghai 201203, China; 3. Department of Integrative Biology and Pharmacology,
Institute of Molecular Medicine, University of Texas Medical School, Houston TX77030, USA）
Abstract：
Endothelial dysfunction is the common pathological base for a number of cardiovascular diseases. Reduction of NO bioavailability and excessive generation of reactive oxygen species (ROS) are key factors which cause endothelial dysfunction. Endothelial nitric oxide synthase uncoupling (eNOS- uncoupling) is an important mechanism underlying the pathological phenomenon of reduced NO production and enhanced free radicals generation. Higher level of ROS is the major cause of eNOS-uncoupling which exerts influence on protein structure, co-factor as well as the substrate of eNOS. Furthermore, the dual effects of ROS also attract the attention: on the one hand, ROS react with biological macromolecules such as proteins, lipids, nucleic acids, which results a number of pathological consequences. On the other hand, ROS is necessary for certain physiological signaling. The compartmental effects of ROS should be responsible for above phenomenon. Inhibition of ROS in
specific region may open up novel pathway for the prevention and treatment of cardiovascular diseases through the means of blocking key ROS synthesis enzymes; preventing and reversing eNOS uncoupling, and improving endothelial function.
Key words：nitric oxide; signaling pathway; oxidative stress
11卷辽宁中医药大学学报
内皮功能障碍是许多心脑血管疾病的共同病理基础，eNOS脱偶联和氧化应激是导致内皮功能紊乱根本原因。氧化应激产生的大量的ROS通过跟NO、L-精氨酸（L-Arg）转运蛋白、eNOS的关键辅助因子四氢生物喋呤（BH4）和eNOS本身反应造成eNOS脱偶联。此外ROS还通过激活不同的激酶对eNOS进行磷酸化修饰改变蛋白质结构调节eNOS活性。在心血管系统中，膜结合的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶、黄嘌呤氧化酶（XO）和脱偶联eNOS是不同病理条件下ROS的主要来源。1 eNOS脱偶联及其产生机制
NO是一种气体分子，由一氧化氮合酶（NOS）催化合成，NOS的催化作用包括黄素调节从该酶结合NADPH的C末端传递到结合血红素的N末端的电子转移，在此区域分子氧（O2）被还原并结合到L-Arg的胍基上，生成NO和L-胍氨酸（L-Cit）。NOS存在3种不同的亚型，分别是NOS1（nNOS）、NOS2（iNOS）和NOS3（eNOS）。eNOS是一种同源二聚体，其亚基是由羧末端结合NADPH，黄素单核苷
酸（FMN），黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）的还原酶区和氨基末端结合血红素，BH4，O2，L-Arg氧化酶区及中间钙调蛋白结合序列构成。正常生理条件下，血管内皮细胞中的NO主要源于eNOS，发挥调节血压、抑制凝血、抗血管增殖和抗白细胞黏附等作用。在诸如高血压、动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、糖尿病及长期吸烟等病理情况下,eNOS出现功能障碍，其不再生成NO而是产生超氧阴离子（O2-），造成NO生物利用度降低及氧化应激增加，导致或加重内皮功能障碍，该现象被称为eNOS 脱偶联。
eNOS脱偶联的产生机制主要有: ① NO生成底物 L -Arg不足，使本应转移到L-Arg的电子转移到O2从而产生O2-, O2-与NO反应生成活性更强的过氧亚硝酸根离子（ONOO-），ONOO-氧化L-Arg载体，该载体转移L-Arg能力下降，造成内皮细胞L-Arg 水平降低，加重了eNOS的脱偶联，从而形成恶性循环。② NO 生成的重要辅助因子BH4供应不足, 激活的eNOS不能催化L-Arg氧化而生成L-Cit和NO，但是仍然能够接受来自NADPH的电子并将电子储存在与其相结合的四羟酮醇中，然后再将电子传递给另一底物O2，导致主要的终产物是O2-，而不是NO，BH2被ONOO-氧化成BH3，进而氧化成BH2、B。
③ROS，特别是ONOO-氧化eNOS活性中的“锌指结构”使eNOS结构发生改变从而导致活性下降。至此，不难发现ROS导致L-Arg不足、BH4减少，eNOS活性降低。氧化应激是造成eNOS脱偶联的根本原因。
1.1 ROS对NO利用率的影响
ROS通过以下机制改变NO利用率：O2-与NO 快速反应生成氧化性更强的ONOO-，ONOO-可能氧化NOS中心的锌－硫醇结构促进eNOS脱偶联，进而导致内皮功能障碍。过氧亚硝酸盐剧烈处理内皮细胞，可促使锌离子从eNOS的“锌指结构”上脱离，eNOS中的锌离子含量降低，eNOS二聚体解离成单体形成。研究糖尿病鼠和LDLR缺失鼠发现，它们的eNOS含有锌离子减少，从该鼠内皮细胞分离纯化eNOS，优先纯化得到的是单体形式eNOS，在内皮细胞内eNOS更多以单体的形成存在[1]。在高胆固
醇血症，高血压，糖尿病和衰老等疾病中，血管系统产生O2-增多，纠正胆固醇过高和用超氧化物歧化酶（SOD）或者SOD类似物处理可以减少血管系统O2-水平，进而减少ONOO-水平，逆转eNOS脱偶联，恢复内皮功能。在血管紧张素诱导的高血压模型中血管系统O2-的生成增加，补充SOD可以降低血压。临床研究发现，快速注射维生素C可以通过清除O2-提高动脉粥样硬化患者的血管舒张。
1.2 ROS与BH4代谢
1.2.1 BH4与eNOS源ROS的生成 生理条件下，BH4稳定eNOS二聚体结构，激活的eNOS把在还原酶区生成的电子转移到另一个亚基的氧化酶区，L-Arg在BH4的协助下结合该氧化区形成L-Cit和NO。BH4是eNOS发挥功能的基础辅助因子，BH4既可使eNOS二聚体结构保持稳定，增进L-Arg与eNOS 的合力，又促进氧化酶区域Fe2+-O2复合物上电子的转移[2]。eNOS激活依赖于二聚体的形成，eNOS的存在形式是酶活性的一个重要调控步骤。在保持酶活性二聚体状态上，毫无疑问，BH4发挥着关键的调控
作用，“锌指结构”上的 Zn2+具有四面体结构，可以与二聚体内侧面的半胱氨酸残基配对，该半胱氨酸残基处于BH4结合位点的附近，BH4的结合有利于Zn2+ 与半胱氨酸残基的配对。基因点突变研究也表明BH4与结合位点的结合对半胱氨酸残基与Zn2+的配对和维持NO的生成发挥着重要作用。最近的证据表明ONOO-造成Zn2+-巯基降解，反过来也可以导致BH4从结合位点上脱离，二聚体解离和eNOS脱偶联[1]。一氧化氮合酶表达和内皮细胞培养[3]研究也表明BH4的确促进eNOS的二聚化和NO的合成。当BH4缺乏时，eNOS辅助因子核黄素传递的电子与L-Arg的氧化脱偶联，Fe2+-O2复合物分解，氧化酶区域生成O2-，造成氧化应激，导致内皮功能紊乱[4]。在临床疾病中可以观察到eNOS是O2-的重要来源，这些疾病包括糖尿病[5]、抽烟、高血压[6]、慢性NO耐受和典型动脉粥样硬化症，在这些病理条件下，NO生成减少，O2-生成增多，NO与O2-反应产生ONOO-又进一步消耗NO，导致NO生物利用率降低和内皮细胞的氧化应激增加。
1.2.2 ROS与BH4氧化 随着对NOS脱偶联研究的深入，人们对NOS脱偶联过程中BH4发生氧化已达成共识，但是对于BH4氧化的确切机制还存在争议。尽管O2-的确能与BH4发生反应，但是其反应常数（3.9×105 M-1 s-1）[22]却比O2-与NO的反应常数（6.7×109 M-1 s-1）低几个数量级。另外，氧化活性更强的ONOO-也可以氧化BH4。体内和体外实验表明ONOO-在生理浓度时，生成后的几分钟内就可以氧化BH4。利用电子自旋共振（ESR）谱技术研究发现ONOO-首先把BH4氧化成BH3，再氧化成BH2，其反应常数大约为6×103 M-1 s-1。比ONOO-与维生素C、谷胱甘肽和巯醇的反应常数高出了几
倍[7]。BH4氧化除了减少BH4的生物利用率之外，还通过不具有eNOS辅助因子活性的氧化产物BH2，与BH4竞争结合eNOS而影响NO的生成[2]。在病理条件下，氧化消耗的一部分BH4可以通过二氢叶酸还原酶（DHFR）参与的再循环途径得到补充。越来越多的证据表明DHFR在BH2-BH4的循环中发挥重
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要功能，Chalupsky和Cai研究培养牛主动脉内皮细胞DHFR功能时发现，当血管紧张素II（AngII）刺激内皮细胞时，血管NADPH氧化酶生成O2-增多、H2O2的水平升高，而DHFR的表达下调、BH4水平下降、eNOS二聚体发生解偶联。通过转染DHFR的方式，AngII刺激的内皮细胞过表达DHFR可以逆转eNOS的解偶联。这些数据暗示在氧化应激状态下，DHFR可能在维持内皮BH4水平和NO生物利用率上发挥重要作用[8]。
此外，合成减少也是BH4缺乏的原因之一。BH4的生物合成途径涉及3种酶，即GTP表氧化酶I（GTPCH I）、6-丙酮酰四氢喋呤合酶（PTPS）和墨嘌呤还原酶（SR），这3种酶的活性下降或表达减少均会导致BH4缺乏，其中最为重要的是GTPCH I，它催化合成的起始步骤，也是第一个限速酶，其表达减少或者活性下降是造成BH4缺乏的重要原因之一。在类糖皮质激素诱导的高血压大鼠模型中，GTPCH ImRNA水平下降，用墨嘌呤抚育血管可以恢复内皮依赖性的血管舒张[9]。DOCA-盐诱导高血压大鼠模型最近的一些研究发现其血管的BH4水平下降与GTPCH I的活性降低有关，通过转基因增加GTPCH I的
表达可以提高BH4的合成，恢复BH4水平和eNOS的正常功能[10]。作为BH4合成途径的限速酶，GTPCH I的调控可发生在转录和转录后水平。据报道，在人类内皮细胞中，细胞因子包括IFN-γ、TNF-α、转录因子NF-κB、STAT1/3和炎症调节因子-LPS都可以增加GTPCH I的转录，酶活性[11]和BH4水平。胰岛素通过PI3K依赖途径也可以上调GTPCH的表达。GTPCH I在转录后也接受磷酸化修饰，在大鼠肾小球系膜动脉内皮细胞中，AngII和血小板生长因子（PDGF）可以通过三磷酸肌醇激酶（PI3K）依赖的磷酸化促进GTPCH的表达。最后，GTPCH I的活性还受到与GTP表氧化酶反馈反应蛋白 (GFRP)相互作用的调控。通过与GFRP作用，苯丙氨酸对GTPCH的活性发挥正调控作用，BH4发挥负反馈调节作用。
1.3 ROS与L-Arg代谢
大量的实验表明：ROS对L-Arg的代谢具有重要的影响，ROS可以与L-Arg载体蛋白作用抑制L-Arg的转运。ROS对L-Arg的转运可以通过两种机制发挥抑制作用：第一，ONOO-氧化转运蛋白中心巯基降低转运蛋白的活性；第二，超氧阴离子激活PKCα，PKCα促进L-Arg转运载体蛋白（CAT-1）磷酸化，抑制CAT-1活性，进而减少L-Arg的摄取[12]。理论上，L-Arg不足可能是导致eNOS脱偶联，产生超氧阴离子的因素之一。然而，到目前为止，L-Arg 不足引起eNOS脱偶联的证据却不是很多[13]。此外，eNOS脱偶联时，补充L-Arg是否可以改善内皮功能还存在争议。一些动物和人体实验表明补充L-Arg 可以恢复内皮功能；而另外一些实验则表明补充L-Arg并不会产生有益的影响，Chen 等在研究apoE/ iNOS双敲除小
鼠时发现长期补充L-Arg抵消了抑制iNOS的积极效应[14]。糖尿病大鼠研究发现补充L-Arg后ROS产量反而增加，内皮功能并没有明显改善[15]。也有研究结果表明bEnd.3细胞L-Arg缺乏并不足以引起eNOS依赖的ROS生成，提高L-Arg浓度反而可以增加血管内皮细胞生长因子（VEGF）诱导的ROS的生成[16]。
1.4 ROS与eNOS蛋白结构
以上大量的研究表明ROS不仅可以直接或者间接跟NO、L-Arg 转运载体蛋白、eNOS关键辅助因子BH4等生物分子发生反应，引发eNOS脱偶联，ROS特别是ONOO-更可以直接氧化eNOS活性中心的“锌指结构”释放锌离子，导致eNOS脱偶联[1]。此外，H2O2可以作为信号分子通过不同的信号途径引起eNOS磷酸化/去磷酸化修饰，调节其催化活性。H2O2可以激活C-Src、PI3K/Akt[17]、PKCα、MEK/ ERK1/2等激酶活性，进而调节eNOS活性，在BH4不足的情况下，Akt联合MEK/ERK1/2促进eNOS Ser1177磷酸化，提高eNOS活性[17-18]，可以使O2-的最大生成量提高达50%以上[17]。Ser1177磷酸化激活eNOS的机制：包含Ser1177的eNOS羧基末端具有自动抑制活性的功能，在Ser1177去磷酸化状态下，该区域阻断了eNOS两个单体之间的电子转移，当Ser1177发生磷酸化时，该区域结构改变，阻断电子传递的作用消失，eNOS活化。此外，Ser1177磷酸化大大降低了eNOS对钙离子的敏感性，PKC 介导的eNOSThr495磷酸化改变该酶对其他负调节信号的敏感性[17]。C-Src位于PI3K/Akt 和PKCα信号途径的上游，除了间接调节Ser1177、Thr495的磷酸化外，还可以促进eNOS Tyr83的磷酸化提高eNOS的活性[19]。
2 血管系统中ROS产生的机制
完全了解人类心血管系统中氧化应激的产生机制是开发特异性干预药物的关键。最新研究发现这些机制具有多样性，涉及到多个酶系统的参与。血管系统内ROS的来源广泛，包括NADPH氧化酶、XO、脂氧合酶、线粒体酶和脱偶联的eNOS[20]。大量的动物模型和临床证据表明膜结合的NADPH氧化酶、XO和脱偶联的eNOS是不同病理条件O2-的主要来源[21-24]。
2.1 NADPH氧化酶
经典NADPH氧化酶复合体的蛋白质成分包括p67phox、p47phox 、p40phox、p22phox 、gp91phox 和Rac。NADPH氧化酶至少有5种亚型。这些NADPH氧化酶亚型主要区别在催化亚基上，他们分别是Nox1、Nox2（gp91phox）、Nox3、Nox4和Nox5 [25]。Nox亚基是NADPH氧化酶关键的催化亚基，具有黄素和血红素结合区，转递NAD（P）H的一个电子给O2形成O2-，Nox4是一个例外，它不是生成O2-，而是生成H2O2。NADPH氧化酶的表达不具有组织特异性，在内皮细胞、血管平滑肌细胞和成纤维细胞等多种血管细胞中都有表达。
所有Nox亚型中，除了Nox5，其他的亚型都需要p22phox作为连接亚基。Nox4的功能是组成型的，不需要胞质调节亚基的参与。Nox1、Nox2、Nox3、Nox4是血管细胞NADPH氧化酶的主要成分。不同Nox亚基的表达与血管疾病有关，改变Nox1的表达直接影响细胞的分化，Ang II和PDGF处理血管平滑肌细
胞促进Nox1表达同时也抑制Nox4的表达。血管损伤先促进Nox1、Nox2和p22phox的表达，随后上调Nox4的表达[26]。这些结果表明Nox1和Nox2参与
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损伤的启动和对Ang II刺激的急性应答，Nox4的表达则是维持这种应答。Nox1、Nox2、Nox4和p22phox 都在人体中表达[21-22]。Azumi等第1次在人类冠状动脉粥样硬化斑块中发现NADPH氧化酶，Nox2和p22phox伴随人动脉粥样硬化的发展而大量增加[27]，Nox4的表达在损伤早期增加在损伤严重期下降[22]。
血流驱动力（例如：振动剪切力和伸展）可以激活NADPH氧化酶增加Nox的表达，细胞因子（TNF-α，TGF-β,PDGF）、血管紧张素（Ang II）和凝血酶也可以调节NADPH氧化酶活性，Ang II是激活血管NADPH氧化酶表达的最有效的刺激因子之一。肾素－血管紧张素系统激活直接导致心衰[28]、高血压和动脉粥样硬化早期的ROS的产生。高血压大鼠长期注射血管紧张素引起Nox1和p22phox mRNA的表达明显增加，但对p47phox-/-大鼠的血压却影响不明显[29]。
总之，在各种心血管疾病模型中，NADPH氧化酶是O2-的主要来源。临床研究也已证明人体NADPH氧化酶的激活与内皮功能呈负相关[30]。
2.2 黄嘌呤氧化酶
与NADPH氧化酶一样，黄嘌呤氧化酶（XO）也是血管系统O2-的重要来源之一[23-24]。组织缺血/再灌注、细胞因子、震荡剪切力等刺激都可以增加内皮细胞XO的活力。在高血压[31]、动脉粥样硬化、局部缺血/再灌注和心衰[25]等病理条件下，XO是ROS一个重要的来源。心衰患者和CAD受试者内皮细胞XO水平升高，且内皮依赖性血管舒张的损伤程度与XO水平有关[23,29]。
2.3 内皮型一氧化氮合酶
在缺乏辅助因子（BH4）和底物（L-Arg）时，eNOS生成O2-代替NO。每个eNOS单体的氧化酶区域都结合一个BH4，该BH4能够稳定eNOS二聚体，并协助eNOS一个单体传递电子到另一个单体的氧化酶区域的Fe2+-O2复合物上，形成铁－氧复合物，该复合物参与L-Arg的羟基化[21]。在BH4缺乏时，Fe2+-O2复合物分解产生O2-。O2-与NO反应生成ONOO-，ONOO-和其他强氧化剂快速与BH4发生反应，产生BH3-自由基中间体，该中间体快速分解产生BH2[32]，导致BH4大量缺乏。BH4缺乏反过来造成eNOS脱偶联生产更多的O2-。从而形成恶性循环[33]。BH4氧化和NOS脱偶联在高血压、糖尿病、血高胆固醇症和动脉粥样硬化症中都普遍存在[20,27]，模式动物实验和临床研究都表明补充BH4可以改善血管内皮功能，提高内皮依赖的血管舒张。
2.4 其他来源
ROS的其它来源还有花生四烯酸相关酶（环氧合酶和脂肪氧化酶）和线粒体呼吸链相关酶[31]。此外，
猪的血管内皮中，细胞素p450Cyp2C9亚型也可能是O2-的重要来源。◆
参考文献
[ 1 ] Zou M H, Shi C M, Cohen RA. Oxidation of the zinc-thiolate complex and uncoupling of endothelial nitric oxide synthase by
peroxynitrite [ J ] . Journal of Clinical Investigation, 2002,109:
817-826.
[ 2 ] Vasquez-Vivar J, Martasek P, Whitsett J, et al. The ratio between tetrahydrobiopterin and oxidized tetrahydrobiopterin analogues
controls superoxide release from endothelial nitric oxide synthase:
an EPR spin trapping study [ J ] . Biochemical Journal, 2002, 362:
733-739.
[ 3 ] Cai S, Alp N J, McDonald D, et al. GTP cyclohydrolase I gene transfer augments intracellular tetra
hydrobiopterin in human endothelial cells: effects on nitric oxide synthase activity, protein levels and dimerization [ J ] . Cardiovascular Research, 2002, 55: 838-849.
[ 4 ] Vasquez-Vivar J, Kalyanaraman B, Martasek P. The role of tetrahydrobiopterin in superoxide generation from eNOS: enzymology and physiological implications[ J ] . Free Radical Research, 2003, 37: 121-127.
[ 5 ] Guzik T J, Mussa S, Gastaldi D, et al. Mechanisms of increased vascular superoxide production in human diabetes mellitus: role of NAD(P)H oxidase and endothelial nitric oxide synthase[ J ] .
Circulation, 2002, 105: 1656-1662.
[ 6 ] Landmesser U, Dikalov S, Price S R, et al. Oxidation of tetrahydrobiopterin leads to uncoupling of endothelial cell nitric oxide synthase in hypertension [ J ] . Journal of Clinical Investigation, 2003, 111: 1201-1209.
[ 7 ] Kuzkaya N, Weissmann N, Harrison D G, et al. Interactions of peroxynitrite, tetrahydrobiopterin, ascorbic acid, and thiols: implications for uncoupling endothelial nitric-oxide synthase[ J ] .
Journal. of Biological Chemistry, 2003, 278: 22546-22554.
[ 8 ] Karel Chalupsky, Hua Cai. Endothelial dihydrofolate reductase: Critical for nitric oxide bioavailability and role in angiotensin II uncoupling of endothelial nitric oxide synthase[ J ] . PNAS USA, 2005, 102(25): 9056-9061.
[ 9 ] 王颖莹，张玮，庞伟灵，等. 去氧皮质酮醋酸盐高血压大鼠模型中GTPCH1 和GFRP 表达和活性的变化及其意义[ J ] .第三军医大学学报, 2005, 27 ( 8 ): 745-748.
[ 10 ] Zheng, J S, Yang, X Q, Lookingland, K J, et al. Gene transfer of human guanosine 5-triphosphate cyclohydrolase I restores
vascular tetrahydrobiopterin level and endothelial function in low
renin hypertension [ J ] . Circulation , 2003, 108: 1238-1245. [ 11 ] Huang A, Zhang Y Y, Chen K, et al. Cytokine-stimulated GTP cyclohydrolase I expression in endothelial cells requires
coordinated activation of nuclear factor-κB and Stat1/Stat3[ J ] .
Circulation Research, 2005, 96: 164-171.
[ 12 ] Krotova K Y, Zharikov S I, Block E R. Classical isoforms of PKC as regulators of CAT-1 transporter activity in pulmonary artery
endothelial cells [ J ] . American Journal of Physiological Lung
Cell Molecular Physiology, 2003, 284: 1037-1044.
[ 13 ] Berka V, Yeh H C, Gao D, et al. Redox function of tetrahydrobiopterin and effect of L-arginine on oxygen binding
in endothelial nitric oxide synthase[ J ] . Biochemistry, 2004,
43:13137-13148.
[ 14 ] Chen J, Kuhlencordt P, Urano F, et al. Effects of chronic treatment with L-arginine on atherosclerosis in apoE knockout
and apoE/inducible NO synthase double-knockout mice[ J ] .
Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2003, 23:
97-103.
[ 15 ] Satoh M, Fujimoto S, Haruna Y, et al. NAD(P)H oxidase and uncoupled nitric oxide synthase are
major sources of glomerular
superoxide in rats with experimental diabetic nephropathy[ J ] .
American Journal of Physioogical Renal Physiology, 2005, 288:
1144-1152.
[ 16 ] Lonneke M, Bevers B B, Jan A P, et al. Tetrahydrobiopterin, but Not L-Arginine, Decreases NO Synthase Uncoupling in
Cells Expressing High Levels of Endothelial NO Synthase [ J ] .
hypertension, 2006, 47: 87-94.
[ 17 ] Chun-An C, Lawrence J. Druhan, Phosphorylation of Endothelial Nitric-oxide Synthase Regulates Superoxide Generation from the
Enzyme[ J ] . Journal of Biological Chemistry, 2008, 283 ( 40 ):
27038-27047.
[ 18 ] Hua C, Zong M L, Michael E, et al. Akt-Dependent Phosphorylation of Serine 1179 and Mitogen-Activated Protein
Kinase Kinase/Extracellular Signal-Regulated Kinase 1/2
Cooperatively Mediate Activation of the Endothelial Nitric-Oxide
Synthase by Hydrogen Peroxide[ J ] .Molecular Pharmacology,
2003, 63 ( 2 ): 325-331.
[ 19 ] David F, Jarrod E Church. Src Kinase Activates Endothelial Nitric-oxide Synthase by Phosphorylating Tyr-83 [ J ]. Journal.
of Biological Chemistry, 2005, 280 ( 43 ): 35943-35952.
[ 20 ] Alp N J, Channon, K M. Regulation of endothelial nitric oxide
第11卷 第12期 2009 年 12 月
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Vol. 11 No. 12 Dec .，2009
1 理论基础1.1 概念
《妇人良方》曰：“人有带脉横于腰间，如束带
状，病生于此故名带。”而其临床表现《沈氏女科辑
要》曰：“此为带下病。如其太多，或五稠杂及腥腥秽者，斯为病候。”《女科证治约旨》云：“……阴中有物，淋漓下降，绵绵不断，即所谓带下也。”这体现了大多数医家对带下病中带下过多的认识，即带
reactive oxygen species (ros)从带脉论治带下病
谈 媛，许传荃，董 莉
（上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海 200437）
收稿日期：2009-06-08基金项目：上海市教委第三期重点学科建设资助项目（S30303）；上海市朱南孙首席名中医工作室资助项目
作者简介：谈媛（1983-），女，硕士研究生，研究方向：妇科生殖内分泌。通讯作者：董莉（1970-），女，副教授、副主任医师，硕士生导师，博士，主要从事中西医结合妇科生殖内分泌疾病的研究。E-mail: dongli888@yahoo。
摘 要：带下病之病因病机从古至今诸多医家颇多论述，笔者追古溯源，从带脉论治，综而论之，以求完备。 带
下为女性阴道排出的一种阴液，白或无透明，其性黏而不稠，其量适中，无特殊臭气，津津常润，是正常的生理现象，称生理性带下，俗称白带。王孟英在《沈氏女科辑要》：“带下，女子生而既有，津津常润，非本病也。”为生理性带下。
关键词：带脉；带下病
中图分类号：R271.13 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2009) 12- 0040- 02Treating Vaginal Discharge Diseases Based on Dai Channel
TAN Yuan，XU Chuan-quan，DONG Li
（Yueyang Hospital of Integrated Traditional Chinese And Western Medicine Affiliated
to Shanghai University of Chinese Medicine, Shanghai 200437, China）
Abstract：
In all ages, there are many statements about etiology and pathogenesis of vaginal discharge diseases. We traced the ancient theories and discussed this disease based on Dai Channel in order to get a complete review. Leucorrhea, discharged from vagina in a moderate amount, is white or transparent without any special odor which can make the vagina moist. It is a normal physiological phenomenon. It is said in Shen's Synopsis of Women's Diseases written that normal leucorrhea is a physiological discharge for women to moisten the vagina and is called physiological leucorrhea.
Key words：
Dai Channel; Vaginal Discharge synthase by tetrahydrobiopterin in vascular disease[ J ] .Arterio- sclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2004, 24:413-420.[ 21 ] Guzik T J, Sadowski J, Kapelak B, et al. Systemic regulation of
vascular NAD(P)H oxidase activity and nox isoform expression in human arteries and veins. Arteriosclerosis[ J ] . Thrombosis and Vascular Biology, 2004, 24: 1614-1620.
[ 22 ] Sorescu D, Weiss D, Lassègue B, et al. Superoxide production
and expression of nox family proteins in human atherosclerosis[ J ] .
Circulation, 2002, 105: 1429-1435.
[ 23 ] Spiekermann S, Dikalov S, Tatge H, et al. Electron spin
resonance characterization of vascular xanthine and NAD(P)H oxidase activity in patients with coronary artery disease: relation to endothelium-dependent vasodilation[ J ] . Circulation, 2003, 107: 1383-1389.
[ 24 ] Landmesser U, Spiekermann S, Dikalov S, et al. Vascular
oxidative stress and endothelial dysfunction in patients with chronic heart failure: role of xanthine-oxidase and extracellular superoxide dismutase[ J ] . Circulation, 2002, 106: 3073-3078.
[ 25 ] Lambeth. JD NOX enzymes and the biology of reactive oxygen[ J ].
Nature Reviews Immunology, 2004, 4: 181-189.
[ 26 ] Sz öcs K, Lassègue Be, Sorescu D, et al. Upregulation of Nox-based NAD(P)H oxidases in restenosis after carotid injury[ J ]. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2002, 22: 21-27.
[ 27 ] Guzik T J, Sadowski J, Guzik B, et al. Coronary artery superoxide
production and nox isoform expression in human coronary artery
disease[ J ] . Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2006, 26: 333-339.
[ 28 ]
Widder, J, Behr T, Fraccarollo D,et al. Vascular endothelial dysfunction and superoxide anion production in heart failure are p38 MAP kinase-dependent [ J ] . Cardiovascular Research, 2004, 63: 161-167.
[ 29 ] Landmesser U, Cai H, Dikalov S, et al. Role of p47(phox) in vascular oxidative stress and hypertension caused by angiotensin II[ J ] . Hypertension, 2002, 40: 511-515.
[ 30 ]
Channon KM, Guzik TJ. Mechanisms of superoxide production in human blood vessels: relationship to endothelial dysfunction, clinical and genetic risk factors[ J ] . Journal of Physiological Pharmacology, 2002, 53: 515-524.[ 31 ] Mueller FH, Laude K，McNally J S, et al. ATVB in focus: redox mechanisms in blood vessels[ J ] . Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2005, 25: 274-278.
[ 32 ]
Kuzkaya N, Weissmann N, Harrison D G, et al. Interactions of peroxynitrite, tetrahydrobiopterin, ascorbic acid, and thiols: implications for uncoupling endothelial nitric-oxide synthase[ J ]. Journal of Biological Chemistry, 2003, 278:22546-22554.
[ 33 ]
Landmesser U, Dikalov S, Price S R, et al. Oxidation of tetrahydrobiopterin leads to uncoupling of endothelial cell nitric oxide synthase in hypertension[ J ] . Journal of Clinical Investigation, 2003, 111: 1201-1209.
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