ABX Pentra系列五分类血细胞分析仪简介
ABX Pentra系列全自动五分类血细胞分析仪,采用了白细胞计数通道,双鞘流检测通道(LMNE散点图)和白细胞/嗜碱细胞(WBC/BAOS)通道同时进行检测来完成白细胞五分类的全面分析。
LMNE检测通道采用三种技术原理同时进行白细胞的分类:1、双鞘流原理(DHSS)2、细胞化学染(Cytochemistry)结合吸光法原理3、鞘流阻抗技术(Focused Flow Impendance)。
白细胞/嗜碱细胞检测通道:采用生物溶解技术,阻抗技术,域值界标技术进行白细胞计数及嗜碱细胞的检测。
ABX采用了先进的DHSS专利检测技术,在分析五分类的同时能够检测两异常白细胞亚:①巨大未成熟细胞(LIC)百分比及绝对值②异型淋巴细胞(ALY)百分比及绝对值。
ABX先进的白细胞分类原理能够满足临床对异常细胞的较高检测灵敏度,能够提供82种不同的报警信息及提示信息,形成了一套非常完整的白细胞分类的报警系统。
检测技术介绍:
⑴流式细胞技术(FCM):在此检测器中,细胞/颗粒在鞘流液的作用下,聚焦成一条单个细胞排
列的直线,然后依次通过流式通道中的检测器,进行细胞的不同物理/化学参数的测定。
⑵ DHSS技术(Double Hydrodynamic Sequential System)简称双鞘流系统:流式通道中有二个检测
装置①60µm鞘流微孔用于细胞体积的测定②42µm的光窗测定吸光比率由于分析细胞的内容物。细胞经鞘流稀释液作用,排列在流式通道中央,细胞经第一束鞘流后通过阻抗微孔测定细胞的真正体积,然后经第二束鞘流后,到达光窗进行细胞的光散射及光吸收的测定,分析细胞的内部结构。ABX DHSS通道应用此技术,实现了对大量细胞进行依次、准确、快速的测定。
技术优势:
¾避免了多个细胞同时通过检测器而造成的计数误差
¾防止气泡及静电的队细胞分类的影响,大大提高了白细胞分类的准确度及精密度
¾可识别两类异常白细胞亚:不大未成熟细胞(LIC)及异型淋巴细胞(ALY)
reactive diluent
¾样品稳定期(Post-draw):超过48小时
⑶时间检测装置(Time Fixed Device):ABX DHSS独特的设计,能够保证每个细胞依次通过鞘流
微孔,检测细胞体积测定,在200µs内细胞应到达光窗,检测细胞的光散射/吸收,进行细胞内容物的分析。此检测装置能够有效防止气泡及静电的干扰,保证获得高精度的白细胞的分类结果(LMNE散点图)。
⑷细胞化学染技术(Cytochemistry):是经典的细胞分类技术,此染剂中含有溶血素及氯唑黑
活体染料(Chlorazol Black E)。在仪器的LMNE检测池中,全血样品与染剂充分混匀,在35度下进行孵育,此过程的作用为:①溶解红细胞②对单核细胞的初级颗粒、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的特异颗粒进行不同程度的染,同时对细胞的膜(细胞膜、核膜、颗粒膜)也进行不同程度的着③固定细胞的形态,使其保持自然状态。由于淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞对染剂的着程度不同、每种细胞特定的细胞核形态和颗粒的结构造成光散射的强度不同,产生了特定的吸光比率。
注:细胞化学染技术请参阅Lawrence Kass M.D.Staining of Granulocytic Cells by Chlorazol Black E 0002-9173/81/1200/0810-0812;American Society of Clincial Pathologists.
⑸生物溶血素技术:在嗜碱细胞检测通道中,全血样品与BasylyseII(PH2.4)溶血素结合,嗜碱
细胞保持自然状态,红细胞完全溶解,而其他百细胞膜被破坏,胞浆溢出,形成膜包裹核的状态,应用阻抗原理进行体积分析。
⑹浮动界标技术:主要应用在血小板检测及嗜碱细胞的检测,直方图的最大界标依据细胞的变化
做出相应的调整,是不断变化的。
⑺白细胞平衡检测原理(WBC Count Balance):白细胞的计数在WBC/HGB通道中,同时此结果与
LMNE双鞘流池及WBC/BASO通道结果相联系。
⑻血小板的防返流装置:为了防止涡流现象对血小板计数的影响,ABX采用了一种真空装置有效
的减少了涡流现象的影响。
白细胞分类的方法学:
1.细胞经染孵育后,到达光窗检测侧细胞的吸光比率,将此光信号转化为仪器可识别的电子脉
冲信号,脉冲信号的大小及形状与被检测的细胞的核及颗粒具有一致性。从而可以反映了每个被检测细胞的内部结构特性(核,颗粒的特性),为精确分析白细胞分类提供了可靠信息。
在DHSS检测通道中,鞘流微孔提供了细胞真正的体积,光窗检测提供了细胞特异性的吸光比率,将两个参数分别设定为LMNE散点图的X轴和Y轴,把每一个细胞分别定位在相应的矩阵中,此两种技术完美结合提供了科学、全面的白细胞分类原理。
阻抗(细胞大小)
ABX DIAGNOSTICS -SAUDI ARABIA -April 1999
LMNE分类散点图演示
⑴淋巴细胞:典型的淋巴细胞体积较小、形态规则、胞浆内没有颗粒,其吸光率最低,所以定位在
散点图的右下部矩阵中,正常淋巴细胞散点图为正态体积分布。
⑵单核细胞:典型的单核细胞体积较大、肾状核、胞浆内有初级颗粒(几乎不着),细胞核一般
不分叶,光散射较少,所以位于吸光率轴的最下端,依据单核细胞的体积,位于体积轴的最右端。另外,
异常单核细胞及特大单核细胞可出现在LIC(巨大未成熟细胞)矩阵中。
⑶中性粒细胞:典型的中性粒细胞具有中性颗粒及核的分叶结构,中性颗粒部分着,同时由于颗粒及核的分叶等形态上的复杂性,而产生的光散射。所以中性粒细胞散点图位于中部。核分叶越多的中性粒细胞,吸光性越强,在散点图上的位置向右移。同时杆状细胞(Bands)体积与中性粒细胞接近,但核的复杂程度低,吸光率低,散点图位于中性粒细胞与单核细胞之间。
⑷嗜酸性粒细胞:由于嗜酸性粒细胞含有特异颗粒,与染液特异性着,其着强度最深,位于Y-轴的最上端,此方法提高了嗜酸性粒细胞的分类的准确性。
⑸巨大未成熟细胞(Large Immature Cell):未成熟粒细胞因其体积较大,可含有颗粒,光散射强,
位于嗜中性粒细胞散点图的右侧,在LIC矩阵图中从左到右依次排列晚幼粒、中幼粒、早幼粒细胞,另外各种原始细胞位于单核细胞的右侧区域中。由于此散点图中可能有大单核细胞,引起LIC假性计数的增加(LIC的计数结果被计算到在嗜中性粒细胞中)。LIC包括:大单核细胞、高嗜碱性的单核细胞、巨大中性粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、原始细胞。
⑹异型淋巴细胞(Atypical Lymphs):在散点图中位于淋巴细胞与单核细胞之间的一细胞,包括:小原始粒细胞、大淋巴细胞、反应性淋巴样细胞(Reactive lymphoid forms)、刺激性淋巴细胞(Stimulated lymphocytes)、浆细胞等。
嗜碱细胞的检测通道:
在WBC/BASO 检测池中,全血样品与BasolyseII (PH2.4)溶血素混合,在35°C 恒温下,溶解红细胞,由于嗜碱性粒细胞具有抗酸性,能够保持形态完整,而其他白细胞胞浆溢出,成为裸核状态。细胞
通过鞘流微孔(80µm),每个细胞产生于细胞体积成比例的电子脉冲,绘制WBC/BASO 直方图。依据阈值设定,区分白细胞裸核与嗜碱性粒细胞。
Parameters (12)
Basophils
嗜碱性粒细胞测定
为了更好的保证白细胞的总比为100%,仪器会用嗜碱细胞计数结果对中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞进行校正。从而保证了LMNE 分类通道与WBC/BASO 检测通道协调合作,完成了白细胞全面的分类结果。

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