:明胶明矾各1g,于100ml体积分数为1%的甘油中,加热到70℃,熔化并搅拌混合呈完全透明状
APES:
它可以和组织、玻片上的氢键形成共价键,防止脱片。用甲醇/丙酮配成2%浓度使用。英文名:
Aminopropyltriethoxy silane
中文名:3-氨丙基三乙氧硅烷
xx普特氏粘片剂
明胶:
1.0g;蒸馏水:100mL;石炭酸(可不用):
2.0g;甘油:15mL;
配制方法:
配制时明胶溶解于30℃的蒸馏水中(水浴锅中进行),溶解后加入石炭酸和甘油,搅拌均匀过滤,贮存于玻璃瓶中;将清洁的载玻片放入上述溶液中浸泡数分钟后,捞出,烤干(40度)备用
注意:
待处理的载波片一定要洗干净,捞片后,防尘在烘箱烘干(一定要烘干)即可,烘片时温度不可过高,40度烘干即可,否则片子上会出现明胶“晶体”,染背景会很脏,至于要不要灭菌,关键要看你的实验要求。
常用的粘片剂为郝伯特(Haupt)粘贴剂:
甲液:
明胶1xx
蒸馏水100毫升
甘油15毫升
苯酚2xx
乙液:
甲醛4毫升tablet5
蒸馏水100毫升
做组织的,楼上的用APES太贵了。我都用铬矾明胶。普通的免疫组化是没问题的。打胶时先将铬矾明胶液预热至60°,然后把片子放进去半分钟至一分钟。自然凉干即可。这样处理的片子即使微波修复至98°,也不会脱片子。
3、xx普特氏明胶粘片剂
明胶1g
蒸馏水100ml
石炭酸2g
甘油15ml
配制时先将明胶溶解于30℃的蒸馏水中(在水浴锅内进行),待溶解后再加石炭酸和甘油,搅拌均匀后,趁热过滤,贮存于玻璃瓶中。
铬矾明胶的配方:
铬矾
0.05g,明胶
0.5g,蒸馏水100ml。
配制方法:
在250ml烧杯中加60ml左右蒸馏水,加入
0.5g明胶,边加温边搅拌溶解明胶,待其完全溶解后,再加入铬矾及蒸馏水至100ml。注意:
涂胶时水温在60℃左右为最佳,如发现有肉眼可见残渣,应过滤后使用;待处理的载波片一
定要洗干净,捞片后,防尘在烘箱烘干(一定要烘干)即可,烘片时温度不可过高,40度烘干即可,否则片子上会出现明胶“晶体”,染背景会很脏,至于要不要灭菌,关键要看你的实验要求。
粘合剂
1、铬矾明胶液
铬矾(或甲铬矾)
0.5g
明矾(Gelatine)5g
蒸馏水1000ml
配制方法:
先将少许蒸馏水溶解铬矾(硫酸铬钾)后,再加入明胶及蒸馏水,于70oC水溶液中胶溶化后
置电动磁力搅拌器上,持续搅拌均匀,如有沉渣可过滤后使用。将清洁的载玻片置上述液体中浸泡数分钟后,烤干备用,可防止脱片。
2、甲醛明胶液
40%甲醛
2.5ml
明胶
0.5g
蒸馏水至100ml
配制方法:
将少许蒸馏水(约80ml)将明胶加热溶解,待完全溶解后,加入甲醛,最后补充蒸馏水至100ml备用。将清洁的载玻片置上述液体中浸泡数分钟后,烤干备用,可防止脱片。
3、APES液
APES                              1ml
丙酮50ml
配制方法:
取APES1ml,加丙酮50ml,充分搅拌均匀备用。将清洁的载玻片放入APES液中20~30秒后,取出,用丙酮液洗去多余的APES液,注意不要留有气泡,晾干备用。经该方法处理的玻片具有良好的防脱片能力。
4、多聚赖氨酸液
多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)1ml
蒸馏水10ml
配制方法:
取市售Poly-L-Lysine 1ml,加入蒸馏水10ml,置塑料容器中,将清洁的玻片放入该液中5分钟,取出放置无尘干燥箱中晾干备用或60oC干燥箱烤干备用。所需容器不能用玻璃制品。经该方法处理的玻片具有很强的粘合能力。但价格较APES贵得多。

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