流式细胞仪数据分析
5.1 数据采集及显示
光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号。 流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由分析细胞学协会制定。
根据FSC标准,数据存储格式应包括三个文件:样本获取文件,数据设置文件和数据分析结果。苹果下拉菜单怎么设置 4参数(FSCSSCFITCPE)的单细胞分析会生成8位数据。当单个样品累计收集到10000个细胞时,FCS数据文件为80kB
数据采集存储完毕后,细胞亚可以几种不同格式显示。单参数如FSCFITCFL1)可使用直方图,横轴表示荧光通道。纵轴表示在该通道内收集到的细胞数量(如图5-1)。处在同一通道的每一细胞均符合该通道的信号值,而且具有相同的信号密度。通道右侧信号的荧光强度明显高于左侧,越靠右侧荧光亮度越强。 5-1 流式数据分析图
双参数可在二维散点图中同时显示,X轴显示通道1FL1),Y轴显示通道2FL2)。3维图通过XYZ三个轴分别显示每个通道的细胞量(如图5-1)。
习题:数据采集及显示
1 在直方图中横轴和纵轴分别表示
2 二维点图用于显示          参数。
3 CellQuest软件中3维图中Z轴代表               
5.2 设门
通过设门的方法可以定义细胞亚的区域。如:血样本是混合细胞,如果想单独分析淋巴球细胞,可根据FSC或细胞大小,在FSCSSC的散点图中设门,其数据结果只反映淋巴细胞亚的荧光特性。 5-2 全血样本中淋巴细胞亚的数据分析图
习题:设门
1 设门的方法通常用于分析样本内的指定细胞。(对 错)
5.3 细胞亚的数据分析
数据分析包括从点图中的list-mode文件中显示数据,然后统计点图中的细胞分布情况。如前所述,分别有几种形式的点图用于显示数据,而且可通过设门的方法区分指定的细胞亚。 如图5-3所示,在淋巴细胞亚周围设门,以单独分析或分选该亚细胞。

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