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引物

1-序列数据的编辑与比对

2024-07-10 23:38:59

1-序列数据的编辑与比对DAN barcoding引物序列COBU:5'-TYTCAACAAAYCAY AAR gATATTgg-3'COBL:5'-TAAACTTCWggRTgWCCAAARAA TCA-3'(COBL反向互补序列:5'-TGATTYTTTGG WCAYCCWGAAGTTTA-3')* 该引物序列对应的片段长度为658bp* 注意:保存分子系统学分析数据的所有文件夹都要用英文命名...

荧光定量PCR引物设计

2024-06-30 19:54:10

荧光定量PCR引物设计专业的定量PCR设计软件:beacon Designer有时一对100分的引物扩增效率特别低,换了一对貌似很烂的引物,结果溶解曲线却长得很漂亮~扩增效率也蛮高。个人认为这个跟你选择的位置有关看引物Tm值相差是否很高,适当降低反响退火温度,看看是否有效看所扩增片段GC含量以及产物Tm是否很高,比方水稻基cDNA扩增常常用到GC buffer。看所用扩增基因是否为组织特异性表达看...

基于PCR技术的细菌分类鉴定研究

2024-05-16 21:44:52

基于PCR技术的细菌分类鉴定研究PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)技术是一种能够在实验室中快速复制DNA分子的方法。它被广泛应用于对细菌进行分类和鉴定。在细菌学中,分类鉴定是非常关键的,因为只有正确地鉴定细菌种类,才能够正确地选择适当的方案。因此,PCR技术的应用在细菌分类鉴定方面是非常有意义的。1. PCR技术的原理和操作方法PCR技术是一种快速、准...

pcr检测原理

2024-05-16 21:42:38

pcr检测原理PCR检测原理。PCR(Polymerase Chain Reaction)是一种分子生物学技术,被广泛应用于医学诊断、生物学研究和法医学等领域。其原理是通过酶的作用,在体外扩增DNA片段,从而使微量的DNA得以扩增至足够检测的水平。PCR检测原理主要包括DNA的变性、引物的结合、DNA的合成三个步骤。首先是DNA的变性。PCR反应液中的DNA双链在高温条件下(通常为94-96摄氏度...

分子生物学研究中的PCR技术

2024-05-16 21:24:06

分子生物学研究中的PCR技术PCR(Polymerase Chain Reaction)技术是分子生物学中一种重要的技术手段,在DNA分子复制、基因克隆以及生物体转基因等多个方面都有着广泛的应用。本文将从PCR技术的基本原理、PCR反应体系、PCR多样性分析、PCR在生物检测和疾病诊断等方面进行阐述。一、PCR技术的基本原理PCR技术是一种在体外扩增DNA的方法,利用特定引物(primers)在限...

RTPCR操作流程及其相关注意事项

2024-05-16 12:22:58

RT-PCR一知识背景:1、基因表达:DNA          RNA        Protein2、PCR技术(Polymerase chain reaction):即聚合酶链式反应。在模板、引物和四种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促反应,其特异性由两个人工合成的引物序列决定。反应分三步:A...

pcr反应的名词解释

2024-05-16 12:18:38

pcr反应的名词解释PCR(聚合酶链式反应)是一种分子生物学技术,用于在体外扩增DNA片段。PCR技术可以在较短的时间内复制和扩增DNA片段,因此在医学、生物学、犯罪学和进化生物学等领域被广泛应用。以下是27个双语例句:1. PCR amplifies specific DNA fragments in vitro.PCR在体外扩增特定的DNA片段。2. The use of PCR has re...

聚合酶链式反应(PCR)基本操作步骤

2024-05-16 10:08:19

聚合酶链式反应(PCR)聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工...

核算中质量与浓度的换算

2024-04-28 00:12:35

核算中质量与浓度的换算光度计测量的转换: 双链DNA (ds DNA):A260 = OD260 = 1 相当于50 µg/ml溶液单链DNA(ss DNA):A260 = OD260 = 1相当于33 µg/ml溶液RNA:A260 = OD260 = 1相当于40 µg/ml溶液参考文献:Freifelder, D., Physical Biochemistry: Applicati...

检测结直肠癌血清miRNA-128的专用引物、试剂盒及方法

2024-04-20 19:29:14

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利说明书(10)申请公布号 CN 103074431 A(43)申请公布日 2013.05.01(21)申请号 CN201310012196.1(22)申请日 2013.01.14(71)申请人 山东大学齐鲁医院    地址 250014 山东省济南市历下区文化西路107号(72)发明人 王传新 张欣 王海燕 (74)专利代理机...

一键完成microRNA定量PCR引物设计

2024-04-16 20:48:21

⼀键完成microRNA定量PCR引物设计尽管microRNA芯⽚和microRNA测序检测⽅法已经普遍使⽤,但qRT-PCR依旧是检验microRNA表达定量的⾦标准。由于microRNA的结构特殊,长度只有18-25个碱基,⽆法直接采⽤常规的PCR技术扩增,因此RT-qPCR的引物设计对很多刚刚接触microRNA的同学都是⼀个难题。在针对microRNA的PCR技术中,设计其引物的理念是基于...

RAPD检查方法及意义

2024-03-24 10:43:17

RAPD检查方法及意义RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)即随机扩增多态性DNA,是一种利用特定引物与无结构DNA作用,从而扩增出其特異或通用性DNA片段的技术。它可以扩增出庞大的片段,也可以扩增出裂解服从于经典的单倍体型的微不足道的片段。RAPD技术借助于PCR(聚合酶链反应)技术,可以仅用少量的DNA,用非特异性引物进行扩增,从而得到很多特定碱基序列...

分子标记技术及其进展

2024-03-24 08:53:32

(接封3)[15]T ischer E ,M itchell R ,Hartman T ,et al .The human gene for vascular en 2dothelia growth factor ,multiple protein forms are encoded through alternative zx on splicing[J ].J.Biol.Chem ,1991,...

双峰驼多态性引物及其筛选方法和鉴定亲子关系的方法[发明专利]

2024-03-24 08:51:26

专利名称:双峰驼多态性引物及其筛选方法和鉴定亲子关系的方法专利类型:发明专利发明人:吉日木图,明亮申请号:CN201510114950.1申请日:20150317公开号:CN104630383A公开日:20150520专利内容由知识产权出版社提供摘要:本发明公开了一种双峰驼转录组微卫星分子标记的多态性引物设计及其筛选方法和用于鉴定双峰驼亲子关系的方法。所述的多态性引物鉴定双峰驼亲子关系的方法包括:...

T载体克隆的DNA序列分析

2024-03-24 08:40:31

T载体克隆的DNA序列分析试验目的:  了解常规DNA序列分析技术(Sanger双脱氧法)的原理及操作步骤。  试验原理:   在分子生物学讨论中,DNA的序列分析是进一步讨论和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)创造的双脱氧链末端终止法和Maxam和Gilbert(1977)创造的化学降解法。两种方法在原理上差异很大,但都是依据核苷...

snp芯片的原理及应用

2024-03-24 08:38:46

SNP芯片的原理及应用1. 引言单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)是基因组中最常见的变异形式,它在人类疾病的研究中起着重要的作用。SNP芯片是一种高通量基因分型技术,可以用来检测个体基因组中的上万个SNP位点。本文将介绍SNP芯片的原理以及其在各个领域的应用。2. SNP芯片的原理SNP芯片是一种将DNA序列多态性引入到DNA芯片上的高通量基因分...

扩增片段长度多态性

2024-03-24 08:33:21

扩增片段长度多态性 (AFLP,Amplified restriction fragment polymorphism),是1993年荷兰科学家Zabeau和Vos发展起来的一种检测DNA多态性的分子标记技术。文章主要讲述该技术的原理、流程及特点,并从以下三个方面讲述该技术的应用情况:动物学方面,讲述其在动物遗传学,动物系统学,性别鉴定与繁殖行为研究上的应用;植物学方面,讲述其在种质资源鉴定,作物...

Taq酶

2024-03-24 08:32:56

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工合成的两个寡核苷酸引物在...

SSR标记的原理

2024-03-24 08:31:45

简单重复序列(Simple Sequence Repeat,SSR)   1.简单重复序(SSR)也称微卫星DNA,其串联重复的核心序列为1一6 bp,其中最常见是双核苷酸重复,即(CA) n和(TG) n每个微卫星DNA的核心序列结构相同,重复单位数目10一60个,其高度多态性主要来源于串联数目的不同。2.SSR标记的基本原理:根据微卫星序列两端互补序列设计引物,通过PCR反应扩增微卫...

PCR,酶切技术

2024-03-24 08:30:03

聚合酶链式反应(PCR)聚合酶链式反应(Polymerize Chain Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工...

如何用PCR法检测基因的多态性

2024-03-24 08:20:14

如何用PCR法检测基因的多态性基因多态性PCR法(聚合酶链反应法)是一种广泛应用于分子生物学领域的基因检测技术。它能够在短时间内扩增特定序列的DNA片段,从而实现对基因多态性的检测。以下是使用PCR法检测基因多态性的步骤:1.设计引物首先,需要根据目标基因的序列设计引物(寡核苷酸序列)。引物一般包括一对前、后引物,它们各自与目标序列的两侧互补配对。引物的设计应考虑到目标基因区域的多态性,以确保引物...

论文-多重PCR引物设计的软件开发

2024-03-21 15:02:02

多重PCR引物设计的软件开发第一章  引  言1.1  背景知识简介聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是体外扩增DNA的一种技术;其能够在短时间内根据极微量的模板序列扩增出大量特异性DNA片断,扩增过程类似于核裂变。Mullis博士在1983年发明了该技术,并因此于1993年获得诺贝尔化学奖。PCR技术是现代分子生物学中最有...

做核酸查新冠的原理

2024-03-10 03:37:58

做核酸查新冠的原理核酸检测是目前新冠病毒(COVID-19)诊断的重要方法之一。核酸检测的原理是通过提取患者样本中的病毒RNA,并将其转录为相应的DNA,在PCR反应中扩增病毒DNA的特定区域,最终通过检测扩增产物来判断患者是否感染新冠病毒。核酸检测一般使用的样本类型包括鼻咽拭子、咽拭子、唾液、痰液等。提取样本中的核酸,通常采用的方法是酚-氯仿法或商用核酸提取试剂盒。提取后的核酸可能包含病毒RNA...

流感病毒的核酸检测技术操作规范

2024-03-10 00:31:34

流感病毒的核酸检测技术操作规范(一)流感病毒Conventional one step RT-PCR检测应用核酸检测技术为疑似流感病毒感染病例诊断提供依据,为流感病毒的型别和亚型的鉴定提供技术方法。按照规定方法对标本和病毒进行处理和检测,保证检测结果的快速性和可靠性,同时确保样本不被污染和污染环境。1. 生物安全要求实验室操作应当遵守生物安全实验室的有关生物安全的规定。季节性流感病毒生物安全二级,...

DNA分子标记及其在作物遗传育种中的应用

2024-02-03 19:05:23

DNA分子标记及其在作物遗传育种中的应用摘 要:本文对四种DNA分子标记技术的原理和特点,以及不同DN A分子标记在作物亲缘关系与遗传多样性、指纹图谱的建立、遗传图谱的构建与基因定位、及分子标记辅助选择育种等方面所取得的应用效果进行了较为详尽的论述,充分展示这项技术的发展具有巨大的应用潜力和广阔的应用前景。关键词:DNA分子标记;遗传育种;应用伴随着人们对生命认识的不断加深以及遗传学的发展,遗传标...

列出mrd检测方法(一)

2024-01-31 22:00:41

列出mrd检测方法(一)MRD检测方法MRD(Minimal Residual Disease)是指在后仍残留在患者体内的极小数量的癌细胞或其他致病微生物。准确检测MRD对于判断患者的反应和预后具有重要意义。以下是一些常用的MRD检测方法:流式细胞术(Flow Cytometry)•流式细胞术是一种基于免疫荧光标记的技术,用于检测细胞表面标记物。•通过在血液或骨髓细胞中使用特定的抗体标记淋...

分子生物学研究方法习题

2024-01-10 09:08:06

分子生物学常用技术练习题1 【测试题】 【名词解释】1.blotting(印渍技术)  2.Southern blotting    3.Northern blotting    4.Western blotting5.dot blotting        6.DNA芯片技术&n...

SSR 实验步骤

2023-12-29 13:58:12

沙芥SSR引物开发步骤-磁珠富集法器材:高速冷冻离心机、低温水浴锅、PCR仪、研钵和研槌、离心管(1.5ml和2.0ml)、移液及尖、PCR管、一次性橡胶手套、凝胶成像系统、超净工作台、涡旋振荡器、电泳仪、制冰机、高压灭菌锅、PH计、培养皿、聚丙烯酰胺凝胶电泳仪。试剂:琼脂糖、CTAB、β巯基乙醇(1mg/ml EB)、BufferI、PCR产物纯化试剂盒、NaCl、Tris-盐酸、溴乙淀、无...

口蹄疫PCR检测技术的建立

2023-12-19 16:45:46

摘要:口蹄疫是我国比较多发的一类动物疫病,口蹄疫的检测诊断是做好口蹄疫防控工作的关键。为了更好更快地检测和诊断口蹄疫,本研究在口蹄疫血清3ABC 检测阳性的基础上尝试建立一种快速灵敏的PCR 检测技术。通过查询基因序列、引物设计、引物合成、PCR 反应条件摸索和优化、PCR 扩增、凝胶电泳成像,最终在待测样品中成功地扩增出A 型口蹄疫病毒预期大小的条带,可以快速检测出A 型口蹄疫病毒。O 型和As...

PCR的退火温度选择

2023-12-17 14:47:36

trime熔解温度(Tm)是引物的一‎个重要参数‎。这是当50‎%的引物和互‎补序列表现‎为双链DN‎A分子时的‎温度.Tm对于设‎定PCR退‎火温度是必‎需的。在理想状态‎下,退火温度足‎够低,以保证引物‎同目的序列‎有效退火, 同时还要足‎够高,以减少非特‎异性结合。合理的退火‎温度从55‎℃到70℃。退火温度一‎般设定比引‎物的 Tm低5℃。 设定Tm有‎几种公式。有的是来源‎于高盐溶液‎中...

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